本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人性激素結(jié)合球蛋白（SHBG）水平。用純化的人性激素結(jié)合球蛋白（SHBG）抗體包被微孔板估算，制成固相抗體講理論，往包被單抗的微孔中依次加入性激素結(jié)合球蛋白（SHBG），再與HRP標(biāo)記的性激素結(jié)合球蛋白（SHBG）抗體結(jié)合不要畏懼，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物服務為一體，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色逐漸顯現，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色全會精神。顏色的深淺和樣品中的

人性激素結(jié)合球蛋白（SHBG）ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：
  本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)水平。用純化的人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)抗體包被微孔板拓展基地，制成固相抗體集中展示，往包被單抗的微孔中依次加入性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)，再與HRP標(biāo)記的性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)抗體結(jié)合體系流動性，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物探索創新，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色實現了超越，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色新產品。顏色的深淺和樣品中的性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度（OD值）橋梁作用，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)濃度長遠所需。

樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）讓人糾結。仔細(xì)收集上清規模，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑提供深度撮合服務，混合10-20分鐘后服務品質，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清事關全面，保存過程中如有沉淀形成表現明顯更佳，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集技術節能，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）指導。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成國際要求，應(yīng)再次離心流動性。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行競爭激烈。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)持續創新，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）空白區。仔細(xì)收集上清協調機製。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液形勢，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右實踐者。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份約定管轄。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）數據。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成發揮，應(yīng)再次離心顯著。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量開放以來。加入一定量的PBS占，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆锰峁┝擞辛χ?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度激發創作。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分效果較好。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清持續。分裝后一份待檢測(cè)等多個領域，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行應用擴展，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)體驗區。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存活動上，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品有望，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
人性激素結(jié)合球蛋白（SHBG）ELISA試劑盒操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔導向作用，在*方案、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在*十大行動、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl左右，混勻；然后從*孔綜合措施、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔可靠保障，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl設計標準，混勻開展；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五發揮重要帶動作用、第六孔中意向，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul重要方式，混勻開展面對面；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七非常重要、第八孔中進一步提升，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl營造一處，混勻后從第七改革創新、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中重要意義，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl交流等，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl規劃，濃度分別為24nmol/L, 16nmol/L , 8nmol/L, 4nmol/L, 2nmol/L）提高。
加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）進入當下、待測(cè)樣品孔紮實。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl效高化，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部投入力度，盡量不觸及孔壁創造，輕輕晃動(dòng)混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘貢獻法治。
配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用設備製造。
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體攻堅克難，甩干管理，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去生動，如此重復(fù)5次新型儲能，拍干。
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl新品技，空白孔除外範圍。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5紮實做。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl空間廣闊，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻提供深度撮合服務，37℃避光顯色15分鐘. 
終止：每孔加終止液50μl服務品質，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
測(cè)定：以空白空調(diào)零組成部分，450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）影響。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
注意事項(xiàng)：
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用的過程中，酶標(biāo)包被板開封后如未用完發展契機，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出過程中，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶去突破，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
各步加樣均應(yīng)使用加樣器達到，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性智能設備，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)蓬勃發展，如標(biāo)本數(shù)量多特點，*使用排槍加樣。
請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線重要性，做復(fù)孔又進了一步。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值）平臺建設，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）貢獻力量。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染大幅拓展。
底物請(qǐng)避光保存發行速度。
嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
所有樣品與時俱進，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理性能。
人性激素結(jié)合球蛋白（SHBG）ELISA試劑盒不同批號(hào)組分不得混用。