本試劑盒用于測定人血清非常重要、血漿及相關(guān)液體樣本中一氧化碳血紅蛋白（HbCO）含量。

人一氧化碳血紅蛋白（HbCO）elisa試劑盒實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人一氧化碳血紅蛋白（HbCO）水平空間廣闊。用純化的
人一氧化碳血紅蛋白（HbCO）抗體包被微孔板營造一處，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次
加入一氧化碳血紅蛋白（HbCO）知識和技能，再與HRP 標(biāo)記的一氧化碳血紅蛋白（HbCO）抗體結(jié)合取得顯著成效，
形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色實現。TMB 在HRP 酶的催
化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色規劃，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的一氧化碳血紅
蛋白（HbCO）呈正相關(guān)方便。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）基礎上，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線
計算樣品中人一氧化碳血紅蛋白（HbCO）濃度各領域。
試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶 8 標(biāo)準(zhǔn)品（16ng/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個
標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取應用領域，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗進行培訓。若不能
馬上進(jìn)行試驗發展機遇，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3 的樣品法治力量，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性全技術方案。
人一氧化碳血紅蛋白（HbCO）elisa試劑盒操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋共享。
8ng/L 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
4ng/L 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2ng/L 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1ng/L 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0.5ng/L 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑信息化，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔生動、
待測樣品孔新型儲能。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl新品技，
然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5 倍）範圍。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡
量不觸及孔壁紮實做，輕輕晃動混勻空間廣闊。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜提供深度撮合服務，棄去液體服務品質，甩干，每孔加滿洗滌液組成部分，靜置30 秒后棄去表現明顯更佳，如此
重復(fù)5 次狀態，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl指導，空白孔除外廣泛認同。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5更高效。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl全面協議，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻具體而言，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl工具，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零喜愛，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）重要的角色。 測定應(yīng)在加終止
液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
操作程序總結(jié)：
計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)向好態勢，OD 值為縱坐標(biāo)平臺建設，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的
OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度貢獻力量；再乘以稀釋倍數(shù)使用；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值代入方程式發行速度，計算出樣品濃度更加堅強，再乘以稀釋倍數(shù)，
即為樣品的實際濃度性能。
注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用初步建立，酶標(biāo)包被板開封后如未
用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存供給。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出的方法，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果重要的意義。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器持續，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差再獲。一次加樣時間
控制在5 分鐘內(nèi)產品和服務，如標(biāo)本數(shù)量多，*使用排槍加樣體驗區。
4． 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線增多，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定進一步推進，計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）導向作用。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染創新為先。
6．底物請避光保存真正做到。
7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品創新延展，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理強化意識。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異基本情況，以英文說明書為準(zhǔn)現場。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃力量。
2．人一氧化碳血紅蛋白（HbCO）elisa試劑盒有效期：6 個月