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- 公司名稱 上海研生實(shí)業(yè)有限公司
- 品牌
- 型號(hào)
- 所在地 上海市
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2017/7/5 15:45:29
- 訪問次數(shù) 243
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人登革熱病毒(DFV)ELISA試劑盒標(biāo)本要求:
1.標(biāo)本處理:血清搖籃、血漿標(biāo)本可直接檢測
2.標(biāo)本按要求制備后盡早進(jìn)行實(shí)驗(yàn)技術。如不能及時(shí)檢測,可將標(biāo)本在-20℃保存一個(gè)月推動,但應(yīng)避免反復(fù)凍融相對較高。
3.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性開展研究。
人登革熱病毒(DFV)ELISA試劑盒使用目的:
本試劑盒定性測定人血液姿勢、或其它相關(guān)組織中登革熱病毒(DFV)的表達(dá)。
實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定標(biāo)本中人登革熱病毒(DFV)首要任務。用純化的人登革熱病毒(DFV)抗體包被微孔板綠色化,制成固相抗體不同需求,可與樣品中登革熱病毒(DFV)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的登革熱病毒(DFV)抗體結(jié)合建設應用,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物支撐作用,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色動力,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色同時。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較效高性,從而判定標(biāo)本中人登革熱病毒(DFV)的存在與否模式。
人登革熱病毒(DFV)ELISA試劑盒標(biāo)本要求:
1.標(biāo)本處理:血清、血漿標(biāo)本可直接檢測
2.標(biāo)本按要求制備后盡早進(jìn)行實(shí)驗(yàn)提升。如不能及時(shí)檢測高品質,可將標(biāo)本在-20℃保存一個(gè)月,但應(yīng)避免反復(fù)凍融支撐能力。
3.不能檢測含NaN3的樣品資源優勢,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)特征更加明顯,每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔估算、陽性對(duì)照2孔、空白對(duì)照1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑的可能性,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰不要畏懼、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照(標(biāo)準(zhǔn)品)50μl措施。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl大大縮短,然后再加待測樣品10μl要落實好。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部緊密相關,人登革熱病毒(DFV)ELISA試劑盒盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻先進技術,
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘培訓。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體宣講手段,甩干重要工具,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去配套設備,如此重復(fù)5次更優質,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl引人註目,空白孔除外領域。
7.溫育:操作同3溝通機製。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl註入新的動力,再加入顯色劑B 50μl領先水平,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘
10.終止:每孔加終止液50μl雙重提升,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)戰略布局。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)表現明顯更佳。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行狀態。
人登革熱病毒(DFV)酶聯(lián)免疫分析試劑盒結(jié)果判定:
試驗(yàn)有效性:陽性對(duì)照孔平均值≥1.00; 陰性對(duì)照平均值≤0.15
臨界值(CUT OFF)計(jì)算:臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
陰性判定:樣品OD值< 臨界值(CUT OFF)者為登革熱病毒(DFV)陰性
陽性判定:樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為登革熱病毒(DFV)陽性
注意事項(xiàng)
1.操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行,本試劑不同批號(hào)組分不得混用指導。
2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用基石之一,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存增持能力。
3.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出共同努力,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果追求卓越。
4.封板膜只限一次性使用逐漸完善,以避免交叉污染。
5.底物請(qǐng)避光保存合理需求。
人登革熱病毒(DFV)ELISA試劑盒保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃是目前主流。
2.有效期:6個(gè)月
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