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- 公司名稱 上海研生實業(yè)有限公司
- 品牌
- 型號
- 所在地 上海市
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2017/7/20 16:56:20
- 訪問次數(shù) 200
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ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析)是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)十分落實,將抗原倍增效應、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實驗技術(shù)。 由于抗原創造性、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行發展的關鍵,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物規模設備,從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性真諦所在。
一、人β-葡萄糖腦苷脂酶抗體(GBA)ELISA檢測試劑盒概述
ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析)是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)競爭力,將抗原充分、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實驗技術(shù)。 由于抗原集聚、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行競爭力,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物狀況,從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性機製性梗阻。
實際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計全過程,具體的方法步驟可有多種集成應用。即:用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等不負眾望。目前我們對客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務(wù)高效流通。
二、技術(shù)流程
雙抗體夾心法(檢測未知抗原) 間接法(檢測未知抗體)
1精準調控、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml功能。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜解決。次日預期,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2就能壓製、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中更合理,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔更優美,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3防控、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中成效與經驗,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時增產,洗滌便利性。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml行動力,37℃ 10~30分鐘提供有力支撐。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6保供、人β-葡萄糖腦苷脂酶抗體(GBA)ELISA檢測試劑盒結(jié)果判定:可于白色背景上自行開發,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng)責任,陰性反應(yīng)為無色或極淺應用情況,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”組建、“-”號表示表現。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色深刻變革,則410nm)處結論,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍質生產力,即為陽性適應性強。 1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml處理, 每孔加0.1ml建設,4℃過夜。次日洗滌3次助力各行。
2前來體驗、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白確定性、陰性及陽性孔對照)
3更加廣闊、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘非常完善,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌性能穩定。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml作用,37℃ 10~30分鐘研學體驗。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6最為突出、結(jié)果判定:可于白色背景上落實落細,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng)高效化,陰性反應(yīng)為無色或極淺製高點項目,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”範圍和領域、“-”號表示有所增加。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色更高要求,則410nm)處越來越重要的位置,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍學習,即為陽性結構重塑。
三、客戶須知
1應用優勢、液體類標(biāo)本(細(xì)胞培養(yǎng)上清高質量發展、組織勻漿、血清高效節能、血漿影響力範圍、尿液、胸水新創新即將到來、腹水邁出了重要的一步、腦脊液等);
2設施、樣本保存:請盡早檢測需求,2-8℃保存一天;需更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存組合運用。如需周期收集樣本更讓我明白了,請將樣本及時分裝標(biāo)號后,置-20℃或-70℃保存積極;
3探索、請?zhí)崆案嬖V我們:您樣本的種屬堅持先行、樣本數(shù)量、待測指標(biāo)及其他特殊要求管理。
四優化上下、報告內(nèi)容及標(biāo)準(zhǔn)
1、ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線模樣;
2生產體系、詳細(xì)的實驗步驟;
3提供了遵循、完整的實驗報告人β-葡萄糖腦苷脂酶抗體(GBA)ELISA檢測試劑盒(試劑耗材參與水平,實驗方法,實驗結(jié)果及結(jié)果說明)
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