810003馬胰島素（INS）定量檢測(cè)試劑盒（ELISA）：英文名稱：Horse Insulin（INS） ELISA KIT。本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）製高點項目。僅供科研使用為產業發展，定量檢測(cè)血清、血漿有所增加、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中馬胰島素（INS）的濃度各項要求。

僅供科研使用，不得用于臨床檢驗(yàn)越來越重要的位置。

馬胰島素(INS)定量檢測(cè)試劑盒（ELISA）說(shuō)明書(shū)

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：馬胰島素(INS)定量檢測(cè)試劑盒（ELISA）

英文名稱：Horse Insulin（INS） ELISA KIT

【包裝規(guī)格】

48人份/盒新技術，96人份/盒

【預(yù)期用途】

僅供科研使用，定量檢測(cè)血清結構重塑、血漿聽得懂、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中馬胰島素(INS)的濃度。

【檢驗(yàn)原理】

馬胰島素(INS)定量檢測(cè)試劑盒（ELISA）采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）高質量發展。在預(yù)包被抗馬胰島素(INS)抗體（固相抗體）的微孔酶標(biāo)板中全方位，加入馬胰島素(INS)校準(zhǔn)品和待測(cè)樣本，再加入另一株HRP標(biāo)記的抗馬胰島素(INS)抗體（酶標(biāo)抗體）影響力範圍，經(jīng)過(guò)溫育與充分洗滌大局，去除未結(jié)合的組分，在微孔板固相表面形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體的夾心復(fù)合物邁出了重要的一步。加底物A和B有序推進，底物在HRP催化下，產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物積極拓展新的領域，在終止液（2M 硫酸）作用下配套設備，zui終轉(zhuǎn)化為黃色更優質，在酶標(biāo)儀上測(cè)定吸光度（OD值），吸光度（OD值）與待測(cè)樣品中馬胰島素(INS)的濃度正相關(guān)推進高水平。擬合校準(zhǔn)品曲線脫穎而出，可以計(jì)算出樣本中馬胰島素(INS)的濃度。

【主要組成成分】

主要成分

校準(zhǔn)品濃度依次為： 1600生產創效、800結構、400、200優化上下、100能力建設、0pg/mL。校準(zhǔn)品已經(jīng)通過(guò)測(cè)試生產體系，結(jié)果表明HBs抗原陰性服務，HIV1、HIV2和HCV抗體陰性參與水平，由于不存在一種試驗(yàn)方法能夠*保證沒(méi)有這些物質(zhì)大型，本品必須按照具有潛在的感染性進(jìn)行處理，處理過(guò)程應(yīng)當(dāng)遵循通用的安全措施明確相關要求。

需要但未提供的材料及耗材

  1重要意義、酶標(biāo)儀

2、精密移液器及一次性吸頭

3深化涉外、蒸餾水

4體系、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī)

5、37℃水浴鍋或恒溫箱

6開展試點、500ml量筒

7攜手共進、無(wú)粉一次性乳膠手套

8、質(zhì)控品（可從藍(lán)圖生物科技產(chǎn)品研發(fā)系統(tǒng)中選擇）

【儲(chǔ)存條件及有效期】

  1、2-8℃保存，切勿冷凍開展研究，有效期6個(gè)月。

  2明確了方向、開(kāi)封使用后，包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中業務指導，密閉自封袋改進措施，并將全部試劑放回2-8℃冰箱。

  3長足發展、開(kāi)封后今年，按照建議的條件保存，校準(zhǔn)品結構不合理、包被微孔板和HRP標(biāo)記抗體動手能力，有效期為14天逐步改善，其他成分在標(biāo)簽標(biāo)明的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的。

【適用儀器】

  半自動(dòng)的酶標(biāo)儀提升，如Thermo MK3自動化裝置，或者國(guó)產(chǎn)酶標(biāo)儀。

【樣本要求】

  樣本類型和采集

以下只是列出樣品采集的一般指南應用前景。所有樣本采集過(guò)程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑運行好。

1首次、細(xì)胞培養(yǎng)上清：4000rpm條件下離心20min，去除細(xì)胞顆粒和聚合物部署安排，上清液保存在- 20℃以下搖籃，避免反復(fù)凍融。

2推廣開來、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管推動，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，4000rpm條件下離心20min資源配置，小心地分離出血清信息，保存在- 20℃以下，避免反復(fù)凍融大力發展。

3豐富內涵、血漿：肝素，EDTA產能提升，或檸檬酸鈉作為抗凝劑適應性。在4000rpm條件下，離心20分鐘取上清通過活化，血漿保存在-20℃以下落地生根，避免反復(fù)凍融。

樣本保存和穩(wěn)定性

樣本在2-8℃條件下重要方式，可以儲(chǔ)存72h開展面對面，或者在- 20℃儲(chǔ)存6個(gè)月。樣本收集后模式，不是一次檢測(cè)完自動化，請(qǐng)按一次用量分裝凍存，避免反復(fù)凍融高品質，使用時(shí)在室溫下解凍不折不扣，確保樣品均勻充分解凍。

【檢驗(yàn)方法】

試劑準(zhǔn)備

1資源優勢、使用前高效利用，所有的組分都要至少?gòu)?fù)溫30min特征更加明顯，確保充分復(fù)溫到室溫。

2講理論、濃縮洗滌液：從冰箱取出的濃縮洗滌液的可能性，會(huì)有結(jié)晶產(chǎn)生，這屬于正撤諡橐惑w，F(xiàn)象問題，水浴加熱使結(jié)晶*溶解。濃縮洗滌液與蒸餾水全會精神，按1:20稀釋系統穩定性，即1份的濃縮洗滌液，添加19份的蒸餾水集中展示。

3實力增強、底物：底物液A和B，在使用前探索創新，按1:1體積充分混合帶來全新智能，混合后15分鐘內(nèi)使用。

操作程序

1新產品、所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫去完善，標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品推進高水平，建議做復(fù)孔脫穎而出。

2、按前面試劑準(zhǔn)備中描述的方法生產創效，配制好試劑盒各種組分的工作液結構。

3、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱雙重提升。

4、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔事關全面、樣本孔和空白孔表現明顯更佳，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL，樣本孔加待測(cè)樣本50μL技術節能，空白孔不加指導。

5、除空白孔外國際要求，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔流動性，加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL。

6、用封板膜蓋住反應(yīng)板持續創新，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min改善。

7、揭開(kāi)封板膜協調機製，棄去液體信息化，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液實踐者，靜置20s取得明顯成效，甩去洗滌液，吸水紙上拍干數據。

8設計、如此重復(fù)4次（共洗板5次）。若使用自動(dòng)洗板機(jī)改進措施，請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板，添加浸泡20s的程序長足發展，可以提高檢測(cè)的精度今年。洗板結(jié)束，加底物前結構不合理，要在干凈不掉屑的紙上動手能力，充分拍干反應(yīng)板。

9意見征詢、將底物A和B按1:1體積充分混合重要的意義，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板等多個領域，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min再獲。

10、所有孔加入終止液50μL應用擴展，在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度（OD值）體驗區。

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

檢測(cè)完成后，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度做為縱坐標(biāo)活動上，對(duì)應(yīng)的吸光度（OD值）作為橫坐標(biāo)有望，利用計(jì)算機(jī)軟件，采用四參數(shù)Logistic曲線擬合（4-pl）導向作用，創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線方程方案，通過(guò)樣本的吸光度（OD值），利用方程計(jì)算樣品的濃度值十大行動。

如果樣品被稀釋左右，通過(guò)上述方法測(cè)的的濃度值，要乘以稀釋倍數(shù)，才是樣品的zui終濃度傳承。

【檢驗(yàn)方法的局限性】

1等特點、僅供科研使用，不得用于臨床診斷多種。

2將進一步、在試劑盒標(biāo)示的有效期內(nèi)使用，過(guò)期產(chǎn)品不得使用發展成就。

3成就、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。

4開展面對面、使用試劑盒配套的樣品稀釋液系統。

5、如果樣本值高于zui高標(biāo)準(zhǔn)品濃度值進一步提升，請(qǐng)將樣本適當(dāng)稀釋后空間廣闊，再重新測(cè)定。

6改革創新、待測(cè)樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果知識和技能，檢測(cè)前，請(qǐng)排除該因素交流等。

7更加廣闊、通過(guò)其他方法得到的檢測(cè)結(jié)果，與本試劑盒測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性提高。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

1可以使用、物理性能

試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明、無(wú)沉淀或者絮狀物紮實。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝效高化，無(wú)破損漏氣。

2投入力度、劑量反應(yīng)曲線線性

校準(zhǔn)品劑量反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)r值發展機遇，大于等于0.9900。

3法治力量、精密度

批內(nèi)精密度：三組已知的高全技術方案、中、低濃度樣品共享，進(jìn)行二十次在同一個(gè)板塊內(nèi)精度評(píng)估信息化。批內(nèi)變異系數(shù)CV%小于10%。

批間精密度：三組已知的高生動、中新型儲能、低濃度樣品創新能力，進(jìn)行二十次在不同板塊內(nèi)精度評(píng)估。批間變異系數(shù)CV%小于15%範圍。

4求得平衡、靈敏度

zui低檢出劑量小于10pg/mL。

5空間廣闊、回收率

三組已知的高至關重要、中、低濃度樣品服務品質，進(jìn)行五次回收率評(píng)估的發生，回收率在85%-115%之間。

6影響、特異性

本試劑盒識(shí)別天然和重組馬胰島素(INS)新的動力，與結(jié)構(gòu)類似物無(wú)交叉。

7發展契機、穩(wěn)定性

    2℃-8℃保存像一棵樹，有效期6個(gè)月。

【注意事項(xiàng)】

生物安全

1去突破、檢測(cè)必須符合實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范的規(guī)定全面協議，嚴(yán)格防止交叉污染，所有樣品具體而言、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)按照傳染物進(jìn)行處置。

2智慧與合力、試劑盒的液體組分中喜愛，含有proclin-300防腐劑，可能引起皮膚過(guò)敏反應(yīng)開放要求，避免吸入煙霧與皮膚接觸向好態勢。

3、底物液對(duì)皮膚服務機製、眼睛和上呼吸道有刺激作用貢獻力量，避免吸入煙霧。戴上防護(hù)手套大幅拓展，實(shí)驗(yàn)完成后*洗手發行速度。

技術(shù)提示

1、混合蛋白溶液時(shí)與時俱進，避免起泡性能。

2、加校準(zhǔn)品與樣本時(shí)綜合運用，每個(gè)校準(zhǔn)品濃度和樣本都要更換移液槍頭供給，公共組分應(yīng)該懸臂加樣，避免交叉污染。

3進行探討、合適的溫育時(shí)間落到實處，和充分的洗滌步驟，是保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的必要條件最新。

4技術創新、底物溶液為無(wú)色液體，保存過(guò)程中變?yōu)樗{(lán)色體驗區，代表底物溶液已經(jīng)失效增多，不得使用。

5有望、終止液加樣順序與底物溶液加樣順序*明顯，加入終止液后，藍(lán)色底物產(chǎn)物顯示，會(huì)瞬間變?yōu)辄S色創新為先。

6、實(shí)驗(yàn)中科普活動，用剩的板條創新延展，應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存長期間。

7基本情況、所有液體組分，使用前充分搖勻高端化，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)標(biāo)明的時(shí)間力量、加樣量及加樣順序進(jìn)行溫育操作。

廢物處理

  所有使用或未使用的試劑提單產，所有污染性的一次性材料深入實施，應(yīng)當(dāng)遵循傳染性或潛在傳染性產(chǎn)品的處理程序，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都有責(zé)任根據(jù)其實(shí)驗(yàn)的類型和危險(xiǎn)性級(jí)別發展空間，進(jìn)行廢物和污物的處理效果，同時(shí)要嚴(yán)格依照有關(guān)規(guī)定對(duì)待所有的廢物和污物。