僅供科研使用表現明顯更佳,不得用于臨床檢驗(yàn)狀態。
貓胰島素(INS)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)說(shuō)明書(shū)
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱:貓胰島素(INS)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)
英文名稱:Cat Insulin(INS) ELISA KIT
【包裝規(guī)格】
48人份/盒,96人份/盒
【預(yù)期用途】
僅供科研使用指導,定量檢測(cè)血清廣泛認同、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中貓胰島素(INS)的濃度流動性。
【檢驗(yàn)原理】
貓胰島素(INS)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)鍛造。在預(yù)包被抗貓胰島素(INS)抗體(固相抗體)的微孔酶標(biāo)板中,加入貓胰島素(INS)校準(zhǔn)品和待測(cè)樣本持續創新,再加入另一株HRP標(biāo)記的抗貓胰島素(INS)抗體(酶標(biāo)抗體)改善,經(jīng)過(guò)溫育與充分洗滌,去除未結(jié)合的組分協調機製,在微孔板固相表面形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體的夾心復(fù)合物信息化。加底物A和B,底物在HRP催化下實踐者,產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物取得明顯成效,在終止液(2M 硫酸)作用下,zui終轉(zhuǎn)化為黃色貢獻力量,在酶標(biāo)儀上測(cè)定吸光度(OD值)使用,吸光度(OD值)與待測(cè)樣品中貓胰島素(INS)的濃度正相關(guān)。擬合校準(zhǔn)品曲線覆蓋範圍,可以計(jì)算出樣本中貓胰島素(INS)的濃度優化程度。
【主要組成成分】
主要成分
組分 | 數(shù)量 | 主要成分 |
校準(zhǔn)品 | 0.5ml/管*6管 | 抗原配制的6個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品 |
包被微孔板 | 96T | 預(yù)包被固相抗體 |
HRP標(biāo)記抗體 | 6mL | HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體 |
底物液A | 6mL | 過(guò)氧化脲工作液 |
底物液B | 6mL | TMB工作液 |
20×濃縮洗滌液 | 30mL | 含0.15%Tween20的PBS |
說(shuō)明書(shū) | 1份 | -- |
自封袋 | 1個(gè) | -- |
不干膠 | 2片 | -- |
校準(zhǔn)品濃度依次為: 800積極性、400奮勇向前、200、100實施體系、50組建、0pg/mL。校準(zhǔn)品已經(jīng)通過(guò)測(cè)試效果較好,結(jié)果表明HBs抗原陰性重要的意義,HIV1持續、HIV2和HCV抗體陰性,由于不存在一種試驗(yàn)方法能夠*保證沒(méi)有這些物質(zhì)再獲,本品必須按照具有潛在的感染性進(jìn)行處理產品和服務,處理過(guò)程應(yīng)當(dāng)遵循通用的安全措施。
需要但未提供的材料及耗材
1體驗區、酶標(biāo)儀
2增多、精密移液器及一次性吸頭
3、蒸餾水
4有望、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī)
5進一步推進、37℃水浴鍋或恒溫箱
6、500ml量筒
7方案、無(wú)粉一次性乳膠手套
8應用的選擇、質(zhì)控品(可從藍(lán)圖生物科技產(chǎn)品研發(fā)系統(tǒng)中選擇)
【儲(chǔ)存條件及有效期】
1、2-8℃保存左右,切勿冷凍背景下,有效期6個(gè)月。
2可靠保障、開(kāi)封使用后等特點,包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中,密閉自封袋多種,并將全部試劑放回2-8℃冰箱將進一步。
3、開(kāi)封后用上了,按照建議的條件保存提升行動,校準(zhǔn)品、包被微孔板和HRP標(biāo)記抗體關註,有效期為14天研究進展,其他成分在標(biāo)簽標(biāo)明的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的。
【適用儀器】
半自動(dòng)的酶標(biāo)儀連日來,如Thermo MK3快速融入,或者國(guó)產(chǎn)酶標(biāo)儀。
【樣本要求】
樣本類(lèi)型和采集
以下只是列出樣品采集的一般指南系統。所有樣本采集過(guò)程中增強,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1交流等、細(xì)胞培養(yǎng)上清:4000rpm條件下離心20min更加廣闊,去除細(xì)胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下提高,避免反復(fù)凍融可以使用。
2進入當下、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激效高化,4000rpm條件下離心20min新體系,小心地分離出血清,保存在- 20℃以下創造,避免反復(fù)凍融長效機製。
3、血漿:肝素全技術方案,EDTA分享,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在4000rpm條件下信息化,離心20分鐘取上清方式之一,血漿保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融新型儲能。
樣本保存和穩(wěn)定性
樣本在2-8℃條件下創新能力,可以儲(chǔ)存72h,或者在- 20℃儲(chǔ)存6個(gè)月範圍。樣本收集后廣度和深度,不是一次檢測(cè)完,請(qǐng)按一次用量分裝凍存引領作用,避免反復(fù)凍融加強宣傳,使用時(shí)在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍用的舒心。
【檢驗(yàn)方法】
試劑準(zhǔn)備
1技術發展、使用前,所有的組分都要至少?gòu)?fù)溫30min集成,確保充分復(fù)溫到室溫重要手段。
2、濃縮洗滌液:從冰箱取出的濃縮洗滌液穩定性,會(huì)有結(jié)晶產(chǎn)生像一棵樹,這屬于正常現(xiàn)象去突破,水浴加熱使結(jié)晶*溶解能運用。濃縮洗滌液與蒸餾水,按1:20稀釋具體而言,即1份的濃縮洗滌液工具,添加19份的蒸餾水。
3喜愛、底物:底物液A和B重要的角色,在使用前,按1:1體積充分混合向好態勢,混合后15分鐘內(nèi)使用平臺建設。
操作程序
1、所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫貢獻力量,標(biāo)準(zhǔn)品使用、質(zhì)控品和樣品,建議做復(fù)孔發行速度。
2更加堅強、按前面試劑準(zhǔn)備中描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液性能。
3初步建立、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱供給。
4、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔創新內容,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL空間載體,樣本孔加待測(cè)樣本50μL,空白孔不加十分落實。
5倍增效應、除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔製造業,加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL多樣性。
6、用封板膜蓋住反應(yīng)板新格局,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min明顯。
7、揭開(kāi)封板膜顯示,棄去液體創新為先,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液科普活動,靜置20s創新延展,甩去洗滌液,吸水紙上拍干長期間。
8基本情況、如此重復(fù)4次(共洗板5次)。若使用自動(dòng)洗板機(jī)高端化,請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板力量,添加浸泡20s的程序我有所應,可以提高檢測(cè)的精度。洗板結(jié)束深入實施,加底物前至關重要,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板效果。
9有所應、將底物A和B按1:1體積充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL合作關系。用封板膜蓋住反應(yīng)板著力提升,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min。
10結構、所有孔加入終止液50μL重要的作用,在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度(OD值)。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
檢測(cè)完成后更優美,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度做為縱坐標(biāo)各方面,對(duì)應(yīng)的吸光度(OD值)作為橫坐標(biāo),利用計(jì)算機(jī)軟件成效與經驗,采用四參數(shù)Logistic曲線擬合(4-pl)適應性,創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線方程,通過(guò)樣本的吸光度(OD值)稍有不慎,利用方程計(jì)算樣品的濃度值重要作用。
如果樣品被稀釋,通過(guò)上述方法測(cè)的的濃度值最為顯著,要乘以稀釋倍數(shù)尤為突出,才是樣品的zui終濃度。
【檢驗(yàn)方法的局限性】
1環境、僅供科研使用空間載體,不得用于臨床診斷。
2相對簡便、在試劑盒標(biāo)示的有效期內(nèi)使用重要組成部分,過(guò)期產(chǎn)品不得使用。
3合作、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用勃勃生機。
4、使用試劑盒配套的樣品稀釋液極致用戶體驗。
5提供有力支撐、如果樣本值高于zui高標(biāo)準(zhǔn)品濃度值,請(qǐng)將樣本適當(dāng)稀釋后,再重新測(cè)定品率。
6相貫通、待測(cè)樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果,檢測(cè)前技術發展,請(qǐng)排除該因素集聚效應。
7集成、通過(guò)其他方法得到的檢測(cè)結(jié)果重要手段,與本試劑盒測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
1更加廣闊、物理性能
試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明損耗、無(wú)沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝非常完善,無(wú)破損漏氣性能穩定。
2、劑量反應(yīng)曲線線性
校準(zhǔn)品劑量反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)r值作用,大于等于0.9900情況正常。
3、精密度
批內(nèi)精密度:三組已知的高技術特點、中提高鍛煉、低濃度樣品,進(jìn)行二十次在同一個(gè)板塊內(nèi)精度評(píng)估凝聚力量。批內(nèi)變異系數(shù)CV%小于10%有所提升。
批間精密度:三組已知的高、中新的力量、低濃度樣品先進水平,進(jìn)行二十次在不同板塊內(nèi)精度評(píng)估。批間變異系數(shù)CV%小于15%全面展示。
4重要平臺、靈敏度
zui低檢出劑量小于10pg/mL。
5核心技術、回收率
三組已知的高應用提升、中、低濃度樣品溝通協調,進(jìn)行五次回收率評(píng)估要素配置改革,回收率在85%-115%之間。
6保障性、特異性
本試劑盒識(shí)別天然和重組貓胰島素(INS)帶動產業發展,與結(jié)構(gòu)類(lèi)似物無(wú)交叉。
7、穩(wěn)定性
2℃-8℃保存倍增效應,有效期6個(gè)月規則製定。
【注意事項(xiàng)】
生物安全
1、檢測(cè)必須符合實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范的規(guī)定優化服務策略,嚴(yán)格防止交叉污染堅定不移,所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)按照傳染物進(jìn)行處置更讓我明白了。
2迎難而上、試劑盒的液體組分中,含有proclin-300防腐劑探索,可能引起皮膚過(guò)敏反應(yīng)堅持先行,避免吸入煙霧與皮膚接觸。
3滿意度、底物液對(duì)皮膚情況較常見、眼睛和上呼吸道有刺激作用,避免吸入煙霧主要抓手。戴上防護(hù)手套體製,實(shí)驗(yàn)完成后*洗手。
技術(shù)提示
1創新科技、混合蛋白溶液時(shí)服務延伸,避免起泡。
2高效流通、加校準(zhǔn)品與樣本時(shí)調解製度,每個(gè)校準(zhǔn)品濃度和樣本都要更換移液槍頭,公共組分應(yīng)該懸臂加樣功能,避免交叉污染應用的因素之一。
3、合適的溫育時(shí)間預期,和充分的洗滌步驟敢於監督,是保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的必要條件。
4結構、底物溶液為無(wú)色液體重要的作用,保存過(guò)程中變?yōu)樗{(lán)色,代表底物溶液已經(jīng)失效規模最大,不得使用穩中求進。
5、終止液加樣順序與底物溶液加樣順序*最深厚的底氣,加入終止液后協同控製,藍(lán)色底物產(chǎn)物,會(huì)瞬間變?yōu)辄S色。
6試驗、實(shí)驗(yàn)中勞動精神,用剩的板條,應(yīng)立即放回自封袋中製度保障,密封(低溫干燥)保存預下達。
7、所有液體組分統籌推進,使用前充分搖勻方案,嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)標(biāo)明的時(shí)間、加樣量及加樣順序進(jìn)行溫育操作保護好。
廢物處理
所有使用或未使用的試劑組建,所有污染性的一次性材料表現,應(yīng)當(dāng)遵循傳染性或潛在傳染性產(chǎn)品的處理程序特點,每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都有責(zé)任根據(jù)其實(shí)驗(yàn)的類(lèi)型和危險(xiǎn)性級(jí)別,進(jìn)行廢物和污物的處理結論,同時(shí)要嚴(yán)格依照有關(guān)規(guī)定對(duì)待所有的廢物和污物和諧共生。