穩(wěn)定細(xì)胞株篩選實(shí)驗(yàn)
一大面積、穩(wěn)定細(xì)胞株篩選實(shí)驗(yàn)服務(wù)介紹
穩(wěn)定細(xì)胞系是指將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上積極參與,載體被轉(zhuǎn)染到宿主細(xì)胞并整合到染色體中,用載體中所含的抗性標(biāo)志進(jìn)行篩選培養,篩選得到可穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白交流研討,或者穩(wěn)定表達(dá)沉默特定基因的細(xì)胞株。常用物理方法(電轉(zhuǎn))方案、化學(xué)方法(脂質(zhì)體等)應用的選擇、生物方法(病毒)。
二左右、穩(wěn)定細(xì)胞株篩選實(shí)驗(yàn)原理
外源基因在細(xì)胞中的表達(dá)可分為兩大類背景下,一類是瞬時(shí)表達(dá),一類是穩(wěn)定表達(dá)(又叫*表達(dá))可靠保障。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中自然條件,雖然可以達(dá)到高水平的表達(dá),但通常只持續(xù)幾天開展。后者外源DNA整合到宿主細(xì)胞染色體上互動互補,使宿主細(xì)胞可*表達(dá)目的基因。建立穩(wěn)定細(xì)胞株意向,一般是根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標(biāo)志選用相應(yīng)的藥物對(duì)靶細(xì)胞進(jìn)行篩選意料之外。zui常用的抗性標(biāo)記基因有潮霉素(hygromycin)文化價值、*(neomycin)和嘌呤霉素(puromycin)。
三置之不顧、實(shí)驗(yàn)流程
1不斷完善、載體構(gòu)建(表達(dá)質(zhì)粒載體、病毒載體)方便;
2基礎上、轉(zhuǎn)染/感染;
3知識和技能、目的蛋白初步檢測(cè)取得顯著成效;
4、抗生素篩選實現;
5不容忽視、目的蛋白再次檢測(cè)(定性/半定量);
6服務體系、單克隆細(xì)胞株穩(wěn)定性檢測(cè)說服力。
四、 客戶提供
培養(yǎng)好的細(xì)胞
五分析、 公司提供:
基本實(shí)驗(yàn)步驟表示、圖片、數(shù)據(jù)分析結(jié)果和穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株
實(shí)驗(yàn)周期:大約3-4月左右非常激烈,具體需要根據(jù)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)內(nèi)容而定競爭力所在。