2×SYBR Green PCR Mastermix試劑組成:
2×SYBR Green PCRmix 含有 PCR Buffer自動化方案、MgCl2、dNTPs越來越重要、HS Taq DNA Polymerase線上線下、SYBRGreen I、穩(wěn)定劑等成分醒悟。
2×SYBR Green PCR Mastermix產(chǎn)品簡介:
2×SYBR Green PCRmix 是采用 SYBR Green ? 嵌合熒光法進(jìn)行 Real Time PCR 的專用試劑數據顯示。含有常溫下封閉 Taq 酶活性的化學(xué)修飾法熱啟動 HS Taq DNA Polymerase,能夠有效抑制低溫條件下引物非特異性退火或者引物二聚體引起的非特異性擴增能運用,提高擴增反應(yīng)的特異性達到。
本試劑經(jīng)過特殊配制,采用優(yōu)化配方的 qPCR 專用 Buffer不可缺少,大大提高了 qPCR 反應(yīng)的擴增效率和檢測靈敏度蓬勃發展,可以在較寬的定量區(qū)域內(nèi)得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線,準(zhǔn)確進(jìn)行定量積極回應。
本試劑與多數(shù)廠家的熒光定量 PCR儀兼容重要性,如 Applied Biosystems、 Eppendorf 多種場景、Bio-Rad 和 Roche 等多元化服務體系。
試劑原理:
本產(chǎn)品利用化學(xué)修飾熱啟動酶 HS Taq DNA polymerase 進(jìn)行 qPCR 擴增反應(yīng),通過擴增產(chǎn)物嵌合 SYBR Green ? 而激發(fā)的熒光信號強度進(jìn)行檢測擴大公共數據。
1深度、PCRPCR 法是以微量 DNA 進(jìn)行目的片段擴增的方法。通過 DNA 鏈的熱變性核心技術體系、引物退火開拓創新、DNA 聚合酶作用下引物的延伸三個步驟循環(huán)往復(fù),可在短時間內(nèi)擴增大量 DNA 片段必然趨勢。
2主動性、熒光檢出SYBR Green I 是一種結(jié)合于小溝中的雙鏈 DNA 結(jié)合染料創造性。與雙鏈 DNA 結(jié)合后,其熒光大大增強道路,最大吸收波長約為 497nm規模設備,發(fā)射波長最大約為 520nm。SYBR Green I 可以與所有的雙鏈 DNA 相結(jié)合指導,無需使用探針競爭力,即可實現(xiàn)檢測,通用性好規則製定,且靈敏度很高製造業。
但是,由于 SYBR Green I 與所有的雙鏈 DNA 相結(jié)合關規定,因此由引物二聚體發展基礎、單鏈二級結(jié)構(gòu)以及錯誤的擴增產(chǎn)物引起的假陽性會影響定量的精確性。在定量儀器檢測過程中建強保護,可以通過測量升高溫度后熒光的變化同期,由解鏈曲線來分析產(chǎn)物的均一性,從而區(qū)分產(chǎn)物的融解峰溫度而區(qū)分特異與非特異的產(chǎn)物使命責任。