非洲豬瘟檢測試劑盒#2022價格已更新【】????????????????????????#???2022 ???????
非洲豬瘟檢測儀需要配備我們的非洲豬瘟檢測試劑盒才能快速檢測非洲豬瘟的存在優化服務策略。屠宰場的檢測基數(shù)大發揮效力,需要檢測的豬數(shù)量很多,所以選購設(shè)備時需要注意設(shè)備是否能夠快速檢測明顯,這樣才能滿足需要,提高效率顯示。
非洲豬瘟病毒熒光PCR核酸檢測試劑盒說明書
【獸藥名稱】
通用名稱:非洲豬瘟病毒熒光PCR核酸檢測試劑盒
漢語拼音:Feizliouzhuwen Bingdu Yingguang PCR Hesuan Jianceshijihe
英文名稱:African swine Fever Virus (ASFV) PCR Nucleic Acid Diagnostic Kit
商品名稱:無
【主要成分與含量】試劑盒中含有如下組分:
試劑盒組分 | 含量 |
陽性對照 | 250μL/管×1管
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陰性對照 | 250μL/管×1管
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PCR反應(yīng)液 | 850μL/管×1管
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萌混合液 | 150μL/管×1管
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說明書 | 1份/盒 |
【作用與用途】 本試劑盒可用于血液創新為先、脾臟、肝臟科普活動、淋巴結(jié)創新延展、 樣品中非洲豬瘟病毒核酸的檢測。 扁桃體長期間、腎臟基本情況、肌肉、環(huán)境樣品等 |
【用法與判定】
1 用法
1.1待檢樣品釆集高端化、保存及運輸
1.1.1樣品釆集
(1) 活豬樣品 無菌采集抗凝血或血清5mL
(2) 病死豬剖檢樣品或屠宰場剖檢樣品 無菌采集死豬的牌力量、肺、腎提單產、扁桃體深入實施、淋巴結(jié)、肌肉等組織樣品精準調控。2?8°C低溫運至實驗室用于檢測功能。
(3) 病豬污染的周邊環(huán)境 采集與病豬相關(guān)場所的糞便、飼料解決、污水樣品預期。2?8°C低溫運至實驗室用于檢測。
1.1.2樣品保存 采集的樣品在2?8°C保存應(yīng)不超過24小時幅度,-70°C條件下保存結構,避免反復(fù)凍 融。
1.1.3樣品運輸泡沫箱加冰袋后密封進行運輸貢獻。包裝和運輸應(yīng)符合農(nóng)業(yè)農(nóng)村部《高致病性動 物病原微生物菌(毒)種或者樣品運輸包裝規(guī)范》和交通運輸部門關(guān)于危險品運輸管理的有關(guān)規(guī)定更優美。
1.2樣品處理
1.2.1血液樣品處理 抗凝血樣品置于離心管中,8000 r/min離心2分鐘取上層血漿,編號待 檢成效與經驗。非抗凝血樣品置于離心管中適應性,待凝固后,8000 r/min離心2分鐘取200μL上層血清稍有不慎,編號待檢重要作用。
1.2.2組織樣品處理取適量脾臟、肝臟最為顯著、淋巴結(jié)尤為突出、扁桃體、肌肉等組織環境,置于研磨器或研磨管中研磨空間載體,再加適量生理鹽水混勻,制成約10%的組織勻漿相對簡便,8000 r/min離心2分鐘重要組成部分,取200μL上 清于RNase/DNase-free無菌離心管中,編號備用合作。
1.2.3環(huán)境樣品處理
1.2.3.1糞便勃勃生機、飼料樣品處理方法取適量的糞便、飼料放入盛有PBS緩沖液的研磨管中研磨混勻極致用戶體驗,制成約10%的勻漿液.8000 r/min離心2分鐘提供有力支撐,取200μL上清于RNase/DNase-free無菌離心 管中,編號備用建議。
1.2.3.2污水樣品處理方法 直接取200μL污水進行核酸提取技術交流。
1.3病毒核酸的提取用磁珠法或柱式法進行DNA核酸提取。
1.4熒光PCR反應(yīng):
1.4.1從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液拓展、酶混合液在此基礎上,室溫融化后,2000 r/min離心5秒前來體驗。設(shè)被 檢樣品自主研發、陽性對照和陰性對照總和為n,則反應(yīng)體系配制如下:
試劑 體系
PCR 反應(yīng)液 17× (n+1) μL
酶混合液 3× (n+1) μL
1.4.2在新的RNase/DNase-fire 1.5 ml離心管中加入上述試劑,充分混勻后瞬時離心更加廣闊。按照20μL/ 管分裝量將試劑分裝至熒光PCR反應(yīng)管損耗。
1.4.3在上述制備好的熒光PCR反應(yīng)管中分別加入陰性對照、陽性對照各5μL非常完善、處理好的待測核酸各5μL,終體積25μL/管性能穩定,蓋好熒光PCR反應(yīng)管蓋,混勻后瞬時離心作用,轉(zhuǎn)移到熒光PCR儀器 上情況正常。
144將PCR反應(yīng)管放置在熒光PCR儀樣品槽中行業分類,在熒光PCR儀上運行以下程序:
步驟 | 條件 | 循環(huán)數(shù) | ||
50, 1 | ||||
預(yù)變性 | ℃3分鐘 | 95 ℃: 8 秒 55 ℃: 8 秒
| PCR擴増 | 40 |
熒光通道選擇FAM,在PCR擴增階段每個循環(huán)的55℃時采集熒光信號。設(shè)置擴增體系為25μL, 同時要選擇passive reference和quencher為none的模式提高鍛煉。(注:若熒光PCR儀(如AB17500)按說明 書中的反應(yīng)程序設(shè)置后因持溫時間短無法運行發展邏輯,可將預(yù)擴增和PCR擴增條件變更為95C: 5秒 55°C: 30 秒)
2結(jié)果判定
2.1試驗有效性判定
陽性對照有典型擴增曲線且Ct值≤30.且陰性對照無Cl值或無擴增曲線,線形為直線或輕微斜線有所提升,無指數(shù)增長期聽得進。則判試驗結(jié)果有效。否則先進水平,此次試驗視為無效便利性。
2.2樣品判定
2.2.1陽性:樣本檢測結(jié)果Ct值≤35且有明顯指數(shù)增長期,判定檢出非洲豬瘟病毒核酸重要平臺。
2.2.2可疑:樣本檢測結(jié)果Ct值在35?38范圍內(nèi)深刻認識。此時應(yīng)對樣本進行重復(fù)檢測,如果重復(fù)實驗 結(jié)果Ct值仍在35?38范圍內(nèi)應用提升,有明顯指數(shù)增長期.則判定為陽性主動性,否則為陰性。
2.2.3陰性:樣本檢測結(jié)果Ct值>38或無Ct值要素配置改革,判定未檢出非洲豬瘟病毒核酸。
【注意事項】(1)實驗前請仔細閱讀本試劑盒說明書高效節能,嚴格按照操作步驟執(zhí)行影響力範圍,在操作過 程中對時間、試劑體積等精確控制可以獲得好的結(jié)果新創新即將到來。
(2) 實驗室應(yīng)嚴格按照有關(guān)規(guī)定分區(qū)管理邁出了重要的一步,依照配液區(qū)-模板提取區(qū)-擴增區(qū)-分析區(qū)順序 進行基因檢測。各區(qū)間人員設施、器材需求、試劑及空氣流向應(yīng)有嚴格要求。
(3) 核酸提取有關(guān)耗村確保潔凈組合運用、無DNase/RNase,提取過程盡量低溫更讓我明白了、快速,完成后進入 下一步實驗或凍保積極。
(4) 對于頂部采光儀器要帶新的一次性PE手套對熒光PCR管封蓋探索,對于底部采光儀
器要避免徒手或使用過的手套接觸熒光PCR管底,檢測過程中使用不帶熒光物質(zhì)一次性乳膠手套產業。
(5) 凍存試劑使用前應(yīng)于室溫下*融化滿意度,瞬時離心使液體*沉于管底。避免反復(fù)凍融可持續, 以免影響試劑性能主要抓手。
(6) 樣品、陽性對照等在使用后及時封蓋,.避免組分間及氣溶膠等的污染造成假陽性創新科技。
(7) 擴增產(chǎn)物禁止開蓋服務延伸,實驗產(chǎn)生的廢棄物應(yīng)及時收集,遠離PCR實驗室進行無害化處理高效流通。
【規(guī)格】50頭份/盒
【貯藏與有效期】試劑盒置-20°C以下避光保存調解製度,有效期12個月。
【批準文號】獸藥生字163668871
【生產(chǎn)企業(yè)】鄭州中道生物技術(shù)有限公司
僅供獸醫(yī)診斷使用
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