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lncRNA測(cè)序

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長鏈非編碼RNAs(long non-coding RNAs製造業,lncRNAs)一般是指長度大于200 nt的RNA優化服務策略,位于細(xì)胞核內(nèi)或胞漿中,不參與蛋白質(zhì)編碼功能發展基礎,以RNA形式在多種層面上(表觀遺傳調(diào)控兩個角度入手、轉(zhuǎn)錄調(diào)控以及轉(zhuǎn)錄后調(diào)控等)調(diào)控基因的表達(dá)水平,在生命活動(dòng)中具有重要作用同期。

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長鏈非編碼RNA測(cè)序(long non-coding RNA sequencing探索,lncRNA-Seq)是一種使用特定方法降低樣本中rRNA 的豐度,對(duì)富集到的 RNA進(jìn)行文庫構(gòu)建產業,再對(duì)高通量測(cè)序儀產(chǎn)出的數(shù)據(jù)進(jìn)行信息分析的研究方法競爭力。lncRNA-Seq可一次性獲得樣本中大部分的lncRNAs信息,對(duì)lncRNAs的類別狀況、功能進(jìn)行深入分析機製性梗阻,從而快速準(zhǔn)確地獲得與特定生物學(xué)過程(例如發(fā)育、**等)相關(guān) lncRNA信息全過程。

 

數(shù)據(jù)分析內(nèi)容

標(biāo)準(zhǔn)分析項(xiàng)目

1) 去除接頭序列集成應用、低質(zhì)量序列,得到高質(zhì)量數(shù)據(jù)不負眾望;

2) 與核糖體數(shù)據(jù)庫比對(duì)高效流通,去除核糖體RNA(rRNA)數(shù)據(jù)

3) 轉(zhuǎn)錄本組裝;

4) 鑒定已知轉(zhuǎn)錄本(包括已知lncRNA)和新轉(zhuǎn)錄本精準調控;

5) 預(yù)測(cè)新的lncRNA功能;

6) lncRNA定量及差異分析(需至少2個(gè)樣品);

7) lncRNA差異表達(dá)模式聚類解決;

分析項(xiàng)目

基于互補(bǔ)序列的lncRNA-mRNA互作分析形勢;

構(gòu)建重要的lncRNA-mRNA網(wǎng)絡(luò)圖;

網(wǎng)絡(luò)拓補(bǔ)學(xué)分析及網(wǎng)絡(luò)模塊分析科技實力;

功能富集分析;

ceRNA預(yù)測(cè)分析重要的作用;

 

樣品要求

1.樣品類型:細(xì)胞、新鮮組織或RNA樣品規模最大。

2.樣品量:細(xì)胞樣品請(qǐng)?zhí)峁┲辽?×107個(gè)細(xì)胞穩中求進,組織樣品請(qǐng)?zhí)峁┲辽?00mg的組織塊或切片,RNA樣品請(qǐng)?zhí)峁?0 μg以上的總RNA最深厚的底氣。

3.樣品質(zhì)量:RNA無明顯降解協同控製,提取的總RNA OD260/280值在1.8~2.2之間,濃度≥ 500 ng/μl品質,28S:18S ≥ 1.5重要作用,RIN ≥7。

4.樣品保存:細(xì)胞樣品或新鮮組織塊(切成~50mg的小塊)可用TRIZOL或RNA保護(hù)劑處理或液氮凍存后最為顯著,-80℃保存尤為突出。RNA樣品可溶于乙醇或RNA-free的超純水中,-80℃保存自行開發。樣品保存期間避免反復(fù)凍融進行部署。

5.樣品運(yùn)輸:樣品置于1.5 ml管中,封口膜封好應用情況,干冰運(yùn)輸保護好。


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