EZ020細(xì)胞及動(dòng)物組織RNA直擴(kuò)RT-PCR試劑盒 細(xì)胞組織或細(xì)胞基因的擴(kuò)增與克隆製造業、RNA病毒基因的擴(kuò)增優化服務策略、RNA病毒PCR診斷、RNA病毒Real-time PCR.發展基礎。

PCR前的核酸提取過程操作復(fù)雜兩個角度入手，耗時(shí)、好禮同期，難以實(shí)現(xiàn)高通量操作生產效率，且易造成實(shí)驗(yàn)室氣溶膠污染。本公司給予*的Direct Lysis試劑效果，開發(fā)了組織細(xì)胞直接擴(kuò)增技術(shù)使用，可不用提取核酸，對(duì)組織或細(xì)胞樣本簡(jiǎn)單處理后長期間，直接進(jìn)行PCR基本情況、RT-PCR現場、qPCR以及RT-PCR高端化。該系列試劑盒可廣泛應(yīng)用于基因克隆、轉(zhuǎn)基因或基因敲除鑒定我有所應、基因表達(dá)分析提單產、病毒診斷等PCR相關(guān)的各種實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：

低樣本量：樣品用量小至關重要，20-40ul即可滿足需求

快捷：30min內(nèi)制備模板發展空間，無需其他設(shè)備

高效：經(jīng)反復(fù)驗(yàn)證，可有效擴(kuò)增組織細(xì)胞中長(zhǎng)達(dá)1800bp的DNA和RNA的片段

直接：無需柱純化有所應、步驟簡(jiǎn)單足了準備，降低氣溶膠產(chǎn)生

高通量：能夠在96孔板或8聯(lián)管中操作

RNA direct：RNA也可進(jìn)行直接擴(kuò)增，同類產(chǎn)品少，且對(duì)比競(jìng)品效果優(yōu)

產(chǎn)品名稱：EZ020細(xì)胞及動(dòng)物組織RNA直擴(kuò)RT-PCR試劑盒

英文名稱：EZ Cell and Tissue RNA Direct PCR Kit（One Step)

產(chǎn)品貨號(hào)：EZ020-01/EZ020-02

產(chǎn)品規(guī)格：30T/100T

產(chǎn)品報(bào)價(jià)：1200元/3000元

試劑盒應(yīng)用：細(xì)胞組織或細(xì)胞基因的擴(kuò)增與克隆幅度、RNA病毒基因的擴(kuò)增結構、RNA病毒PCR診斷、RNA病毒Real-time PCR.貢獻。

試劑盒組成：RNA-EZ-1規模最大、RNA-EZ-2、RNA-EZ-3統籌、RNA-EZ-4最深厚的底氣、RT-Enzyme、2*RT-Buffer振奮起來、ddH2O

保存條件：-20ºC保存品質。使用前將RNA-EZ-1、RNA-EZ-4在室溫或37ºC充分溶解深入各系統。RNA-EZ-3最為顯著、RNA-EZ-4和RT-Enzyme使用時(shí)需置于冰上。

EZ020細(xì)胞及動(dòng)物組織RNA直擴(kuò)RT-PCR試劑盒使用方法：

細(xì)胞中RNA的擴(kuò)增

（1）將6ul RNA-EZ-1與3ul RNA-EZ-2充分融合規定。

（2）取20ul細(xì)胞懸液（10^5-10^6cells/ml）,加入上述混合液環境，混勻。

（3）置于37ºC靜置10分鐘高質量。

（4）加入1ul RNA-EZ-3相對簡便，混勻。

（5）置于37ºC靜置15分鐘流程。

（6）置于98ºC加熱5分鐘合作。

（7）加入60ul的RNA-EZ-4，混勻助力各業。

（8）取2ul（7）中處理液進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增極致用戶體驗。

組織塊中RNA的擴(kuò)增

（1）用 H2O 將 RNA-EZ-1 稀釋 5 倍，每 25 μL 的 RNA-EZ-1 稀釋液中加入 3 μL 的 RNA-EZ-2應用，混合均勻建議。同時(shí)處理多個(gè)組織塊時(shí)，可以按照以上比例配制預(yù)混液并分裝到每個(gè)離心管 26 µL相貫通。

（2）切取半顆米粒大小的組織塊（< 3 mm3）不斷發展，*浸入上述混合液中。

（3）置于 37ºC 靜置 10 分鐘自動化方案。

（4）加入 1µL RNA-EZ-3緊密協作，混勻。

（5）置于 37ºC 靜置 15 分鐘效率。

（6）置于 98ºC 加熱 5 分鐘規模。

（7）加入 60 μL RNA-EZ-4，混勻。

（8）取 2 μL（7）中處理液進(jìn)行 RT-PCR 擴(kuò)增發展目標奮鬥。

Real-Time PCR

取上述細(xì)胞或組織處理液性能穩定，加入特異性引物和 TaqMan 探針，可進(jìn)行特異性靶標(biāo) RNA 的定

量檢測(cè)作用。如需進(jìn)行 SYBR Green Real-time PCR情況正常，請(qǐng)選擇 EZ021-01/-02（EZ® Cell and Tissue RNA Direct

PCR Kit（One Step)）。

在 RNase free 的離心管中配制 PCR 反應(yīng)體系

按照以下方法設(shè)定 PCR 反應(yīng)

注意事項(xiàng)

（1）取樣的細(xì)胞量應(yīng)當(dāng)適中技術特點，濃度不宜過高或過低提高鍛煉，處理后溶液應(yīng)當(dāng)以透明為宜。

（2） 樣品處理過程中應(yīng)當(dāng)防止交叉污染凝聚力量，*設(shè)置陰性對(duì)照參與處理過程有所提升，以檢測(cè)環(huán)境的污染。

（3）用本產(chǎn)品擴(kuò)增的 RNA 不宜太長(zhǎng)新的力量，1000bp 及以內(nèi)的片段佳先進水平，前期研究中可擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá) 1800bp的片段，擴(kuò)增片段越*率越低全面展示。擴(kuò)增的成功率也與 RNA 的豐度重要平臺、二級(jí)結(jié)構(gòu)以及引物等有關(guān)。

（4）本產(chǎn)品同樣適用于相應(yīng)的細(xì)胞或組織中 RNA 病毒的 PCR核心技術、Real-Time PCR 診斷應用提升。

（5）2×RT-Buffer 中加入了染料和相應(yīng)試劑，可直接進(jìn)行電泳創造性，無需另加 Loading buffer發展的關鍵。

（6）處理 96 孔板中的細(xì)胞時(shí)，可按照 ddH2O:RNA-EZ-1:RNA-EZ-2=20:5:3 的比例配制預(yù)混液規模設備，使用多道移液器直接加入 96 孔板經(jīng) DPBS 洗滌的細(xì)胞中真諦所在，實(shí)現(xiàn)高通量操作。

（7）2×RT-Buffer 中的染料不影響 TaqMan 探針的效果競爭力。