【產(chǎn)品名稱(chēng)】
通用名稱(chēng)：人登革熱病毒（Dengue）定性檢測(cè)試劑盒（ELISA）
英文名稱(chēng)：Human Dengue （Dengue） ELISA KIT

【包裝規(guī)格】
48人份/盒各方面，96人份/盒

【預(yù)期用途】
僅供科研使用防控，定性檢測(cè)血清、血漿適應性、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中是否含有人登革熱病毒堅實基礎。

【檢驗(yàn)原理】

本試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。在預(yù)包被人登革熱病毒抗原（固相抗原重要作用，貨號(hào)：LT1050002C）的微孔酶標(biāo)板中等地，加入人登革熱病毒陰陽(yáng)性性對(duì)照（貨號(hào)：LT1050002J）和待測(cè)樣本，溫育洗滌尤為突出，再加入另一株HRP標(biāo)記的抗人登革熱病毒抗體（酶標(biāo)抗體規定，貨號(hào)：LT1050002E），經(jīng)過(guò)溫育與充分洗滌空間載體，去除未結(jié)合的組分供給，在微孔板固相表面形成固相抗原-抗體-酶標(biāo)抗體的夾心復(fù)合物。加底物A和B利用好，底物在HRP催化下深入各系統，產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，在終止液（2M 硫酸）作用下系列，終轉(zhuǎn)化為黃色作用，在酶標(biāo)儀上測(cè)定吸光度（OD值），吸光度（OD值）與待測(cè)樣品中人登革熱病毒的濃度正相關(guān)慢體驗，通過(guò)計(jì)算公式判斷樣品陰陽(yáng)性著力增加。

【主要組成成分】

主要成分

陰陽(yáng)性對(duì)照已經(jīng)通過(guò)測(cè)試，結(jié)果表明HBs抗原陰性科技實力，HIV1處理、HIV2和HCV抗體陰性，由于不存在一種試驗(yàn)方法能夠*保證沒(méi)有這些物質(zhì)在此基礎上，本品必須按照具有潛在的感染性進(jìn)行處理助力各行，處理過(guò)程應(yīng)當(dāng)遵循通用的安全措施。

需要但未提供的材料及耗材

  1自主研發、酶標(biāo)儀

2確定性、精密移液器及一次性吸頭

3、蒸餾水

4損耗、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī)

5講故事、37℃水浴鍋或恒溫箱

6、500ml量筒

7性能穩定、無(wú)粉一次性乳膠手套

8全面革新、質(zhì)控品（可以從藍(lán)圖生物選擇，貨號(hào)：LT1050002Q）

【儲(chǔ)存條件及有效期】

  1情況正常、2-8℃保存行業分類，切勿冷凍技術特點，有效期6個(gè)月。

  2數據顯示、開(kāi)封使用后高質量，包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中也逐步提升，密閉自封袋記得牢，并將全部試劑放回2-8℃冰箱。

  3重要的作用、開(kāi)封后更多可能性，按照建議的條件保存，校準(zhǔn)品反應能力、包被微孔板和HRP標(biāo)記抗體共謀發展，有效期為28天，其他成分在標(biāo)簽標(biāo)明的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的結構重塑。

【適用儀器】

  半自動(dòng)的酶標(biāo)儀聽得懂，如Thermo MK3，或者國(guó)產(chǎn)酶標(biāo)儀高質量發展。

【樣本要求】

  樣本類(lèi)型和采集

以下只是列出樣品采集的一般指南全方位。所有樣本采集過(guò)程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑影響力範圍。

1、細(xì)胞培養(yǎng)上清：4000rpm條件下離心20min，去除細(xì)胞顆粒和聚合物共創輝煌，上清液保存在- 20℃以下組建，避免反復(fù)凍融。

2需求、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管堅定不移，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，4000rpm條件下離心20min更讓我明白了，小心地分離出血清指導，保存在- 20℃以下，避免反復(fù)凍融充分。

3進一步完善、血漿：肝素，EDTA競爭力，或檸檬酸鈉作為抗凝劑調整推進。在4000rpm條件下，離心20分鐘取上清機製性梗阻，血漿保存在-20℃以下機製，避免反復(fù)凍融全過程。

樣本保存和穩(wěn)定性

樣本在2-8℃條件下，可以?xún)?chǔ)存72h探討，或者在- 20℃儲(chǔ)存6個(gè)月不負眾望。樣本收集后，不是一次檢測(cè)完明確相關要求，請(qǐng)按一次用量分裝凍存重要意義，避免反復(fù)凍融，使用時(shí)在室溫下解凍深化涉外，確保樣品均勻充分解凍體系。

【檢驗(yàn)方法】

試劑準(zhǔn)備

1、使用前開展試點，所有的組分都要至少?gòu)?fù)溫2h攜手共進，確保充分復(fù)溫到室溫。

2推進一步、濃縮洗滌液：從冰箱取出的濃縮洗滌液經過，會(huì)有結(jié)晶產(chǎn)生，這屬于正沉Χ?，F(xiàn)象明確了方向，水浴加熱使結(jié)晶*溶解。濃縮洗滌液與蒸餾水善謀新篇，按1:20稀釋?zhuān)?份的濃縮洗滌液增產，添加19份的蒸餾水。

3方法、底物：底物液A和B行動力，在使用前，按1:1體積充分混合切實把製度，混合后15分鐘內(nèi)使用保供。

操作程序

1、所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫進行部署，標(biāo)準(zhǔn)品責任、質(zhì)控品和樣品，建議做復(fù)孔保護好。

2組建、按前面試劑準(zhǔn)備中描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液特點。

3深刻變革、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。

4質生產力、設(shè)置陰陽(yáng)性對(duì)照孔適應性強、樣本孔，陰陽(yáng)性對(duì)照孔各加對(duì)照品50μL推動，樣本孔加樣本50μL相對較高。

5、用封板膜蓋住反應(yīng)板信息，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min相關。

6、揭開(kāi)封板膜首要任務，棄去液體綠色化，吸水紙上拍干不同需求，每孔加滿(mǎn)洗滌液發展，靜置20s，甩去洗滌液總之，吸水紙上拍干面向，如此重復(fù)4次（共洗板5次）。若使用自動(dòng)洗板機(jī)研學體驗，請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板建設項目，添加浸泡20s的程序，可以提高檢測(cè)的精度落實落細。洗板結(jié)束相結合，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上製高點項目，充分拍干反應(yīng)板為產業發展。

7、所有孔加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL有所增加。

8各項要求、用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min越來越重要的位置。

8新技術、揭開(kāi)封板膜，棄去液體順滑地配合，吸水紙上拍干深入，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置20s前沿技術，甩去洗滌液基礎，吸水紙上拍干，如此重復(fù)4次（共洗板5次）更默契了。若使用自動(dòng)洗板機(jī)先進技術，請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板培訓，添加浸泡20s的程序，可以提高檢測(cè)的精度宣講手段。洗板結(jié)束重要工具，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上配套設備，充分拍干反應(yīng)板更優質。

9、將底物A和B按1:1體積充分混合推進高水平，所有孔中加入底物混合液100μL脫穎而出。用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min生產創效。

   10結構、所有孔加入終止液50μL，在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度（OD值）優化上下。

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

檢測(cè)完成后能力建設，以陰性對(duì)照的OD+0.25，做為閾值生產體系，樣本OD值大于閾值服務，為陽(yáng)性；樣本OD值低于閾值為陰性能力和水平。

【檢驗(yàn)方法的局限性】

1覆蓋、僅供科研使用，不得用于臨床診斷研究。

2高效、在試劑盒標(biāo)示的有效期內(nèi)使用，過(guò)期產(chǎn)品不得使用深化涉外。

3體系、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。

4開展試點、使用試劑盒配套的樣品稀釋液攜手共進。

5、如果樣本值高于大標(biāo)準(zhǔn)品濃度值推進一步，請(qǐng)將樣本適當(dāng)稀釋后高質量，再重新測(cè)定。

6選擇適用、待測(cè)樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果管理，檢測(cè)前，請(qǐng)排除該因素。

7改進措施、通過(guò)其他方法得到的檢測(cè)結(jié)果就此掀開，與本試劑盒測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

1今年、物理性能

試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明穩步前行、無(wú)沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝動手能力，無(wú)破損漏氣逐步改善。

2、陰性結(jié)果

陰性對(duì)照的OD值不高于0.2提升。

3大大提高、陽(yáng)性結(jié)果

陽(yáng)性對(duì)照的OD值不低于0.8。

4研究成果、特異性

本試劑盒識(shí)別天然和重組人登革熱病毒取得了一定進展，與結(jié)構(gòu)類(lèi)似物無(wú)交叉。

5首次、穩(wěn)定性

    2℃-8℃保存可能性更大，有效期6個(gè)月部署安排。

【注意事項(xiàng)】

生物安全

1搖籃、檢測(cè)必須符合實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴(yán)格防止交叉污染推廣開來，所有樣品推動、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)按照傳染物進(jìn)行處置。

2資源配置、試劑盒的液體組分中信息，含有proclin-300防腐劑，可能引起皮膚過(guò)敏反應(yīng)大力發展，避免吸入煙霧與皮膚接觸豐富內涵。

3、底物液對(duì)皮膚產能提升、眼睛和上呼吸道有刺激作用多種，避免吸入煙霧。戴上防護(hù)手套充分發揮，實(shí)驗(yàn)完成后*洗手發展成就。

技術(shù)提示

1、混合蛋白溶液時(shí)重要方式，避免起泡開展面對面。

2、加校準(zhǔn)品與樣本時(shí)，每個(gè)校準(zhǔn)品濃度和樣本都要更換移液槍頭進一步提升，公共組分應(yīng)該懸臂加樣空間廣闊，避免交叉污染。

3改革創新、合適的溫育時(shí)間支撐能力，和充分的洗滌步驟，是保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的必要條件高效利用。

4特征更加明顯、底物溶液為無(wú)色液體，保存過(guò)程中變?yōu)樗{(lán)色講理論，代表底物溶液已經(jīng)失效的可能性，不得使用。

5服務為一體、終止液加樣順序與底物溶液加樣順序*問題，加入終止液后，藍(lán)色底物產(chǎn)物全會精神，會(huì)瞬間變?yōu)辄S色系統穩定性。

6、實(shí)驗(yàn)中集中展示，用剩的板條實力增強，應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存探索創新。

7帶來全新智能、所有液體組分，使用前充分搖勻新產品，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)標(biāo)明的時(shí)間去完善、加樣量及加樣順序進(jìn)行溫育操作。

廢物處理

  所有使用或未使用的試劑新品技，所有污染性的一次性材料範圍，應(yīng)當(dāng)遵循傳染性或潛在傳染性產(chǎn)品的處理程序，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都有責(zé)任根據(jù)其實(shí)驗(yàn)的類(lèi)型和危險(xiǎn)性級(jí)別紮實做，進(jìn)行廢物和污物的處理空間廣闊，同時(shí)要嚴(yán)格依照有關(guān)規(guī)定對(duì)待所有的廢物和污物。