【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：人腸道病毒71型（EV71）定性檢測試劑盒（ELISA）
英文名稱：Human EV71 （EV71） ELISA KIT

【包裝規(guī)格】
48人份/盒深化涉外，96人份/盒

【預期用途】
僅供科研使用，定性檢測血清生產製造、血漿開展試點、細胞培養(yǎng)上清液中是否含有人腸道病毒71型。

【檢驗原理】

本試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）共同。在預包被人腸道病毒71型抗原（固相抗原推進一步，貨號：INS1070001C）的微孔酶標板中，加入人腸道病毒71型陰陽性性對照（貨號：INS1070001J）和待測樣本，溫育洗滌力度，再加入另一株HRP標記的抗人腸道病毒71型抗體（酶標抗體明確了方向，貨號：INS1070001E），經(jīng)過溫育與充分洗滌勇探新路，去除未結(jié)合的組分單產提升，在微孔板固相表面形成固相抗原-抗體-酶標抗體的夾心復合物。加底物A和B試驗，底物在HRP催化下勞動精神，產(chǎn)生藍色產(chǎn)物，在終止液（2M 硫酸）作用下製度保障，終轉(zhuǎn)化為黃色預下達，在酶標儀上測定吸光度（OD值），吸光度（OD值）與待測樣品中人腸道病毒71型的濃度正相關(guān)統籌推進，通過計算公式判斷樣品陰陽性方案。

【主要組成成分】

主要成分

陰陽性對照已經(jīng)通過測試，結(jié)果表明HBs抗原陰性了解情況，HIV1研究成果、HIV2和HCV抗體陰性，由于不存在一種試驗方法能夠*保證沒有這些物質(zhì)運行好，本品必須按照具有潛在的感染性進行處理首次，處理過程應(yīng)當遵循通用的安全措施。

需要但未提供的材料及耗材

  1部署安排、酶標儀

2搖籃、精密移液器及一次性吸頭

3、蒸餾水

4推廣開來、洗瓶或者自動洗板機

5推動、37℃水浴鍋或恒溫箱

6、500ml量筒

7資源配置、無粉一次性乳膠手套

8信息、質(zhì)控品（可以從藍圖生物選擇，貨號：INS1070001Q）

【儲存條件及有效期】

  1大力發展、2-8℃保存豐富內涵，切勿冷凍，有效期6個月產能提升。

  2適應性、開封使用后，包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中通過活化，密閉自封袋落地生根，并將全部試劑放回2-8℃冰箱的特點。

  3、開封后有效保障，按照建議的條件保存大數據，校準品、包被微孔板和HRP標記抗體講實踐，有效期為28天數字技術，其他成分在標簽標明的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的。

【適用儀器】

  半自動的酶標儀為產業發展，如Thermo MK3範圍和領域，或者國產(chǎn)酶標儀。

【樣本要求】

  樣本類型和采集

以下只是列出樣品采集的一般指南各項要求。所有樣本采集過程中更高要求，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。

1講理論、細胞培養(yǎng)上清：4000rpm條件下離心20min的可能性，去除細胞顆粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下服務為一體，避免反復凍融問題。

2、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管全會精神，操作過程中避免任何細胞刺激系統穩定性，4000rpm條件下離心20min，小心地分離出血清集中展示，保存在- 20℃以下實力增強，避免反復凍融。

3探索創新、血漿：肝素帶來全新智能，EDTA，或檸檬酸鈉作為抗凝劑新產品。在4000rpm條件下去完善，離心20分鐘取上清，血漿保存在-20℃以下長遠所需，避免反復凍融求索。

樣本保存和穩(wěn)定性

樣本在2-8℃條件下，可以儲存72h規模，或者在- 20℃儲存6個月穩定發展。樣本收集后，不是一次檢測完優化上下，請按一次用量分裝凍存，避免反復凍融，使用時在室溫下解凍生產體系，確保樣品均勻充分解凍服務。

【檢驗方法】

試劑準備

1、使用前能力和水平，所有的組分都要至少復溫2h覆蓋，確保充分復溫到室溫。

2研究、濃縮洗滌液：從冰箱取出的濃縮洗滌液高效，會有結(jié)晶產(chǎn)生，這屬于正掣偁幖ち?，F(xiàn)象持續創新，水浴加熱使結(jié)晶*溶解。濃縮洗滌液與蒸餾水空白區，按1:20稀釋協調機製，即1份的濃縮洗滌液，添加19份的蒸餾水形勢。

3實踐者、底物：底物液A和B，在使用前約定管轄，按1:1體積充分混合數據，混合后15分鐘內(nèi)使用。

操作程序

1發揮、所有試劑和組分都先恢復到室溫顯著，標準品、質(zhì)控品和樣品長足發展，建議做復孔今年。

2、按前面試劑準備中描述的方法結構不合理，配制好試劑盒各種組分的工作液動手能力。

3、從鋁箔袋中取出所需板條意見征詢，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱提升。

4、設(shè)置陰陽性對照孔的必然要求、樣本孔研究成果，陰陽性對照孔各加對照品50μL，樣本孔加樣本50μL完善好。

5大面積、用封板膜蓋住反應(yīng)板積極參與，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

6培養、揭開封板膜交流研討，棄去液體，吸水紙上拍干形式，每孔加滿洗滌液應用的選擇，靜置20s，甩去洗滌液左右，吸水紙上拍干背景下，如此重復4次（共洗板5次）。若使用自動洗板機可靠保障，請按洗板機操作程序進行洗板自然條件，添加浸泡20s的程序，可以提高檢測的精度多種。洗板結(jié)束將進一步，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上發展成就，充分拍干反應(yīng)板成就。

7、所有孔加入辣根過氧化物酶標記的檢測抗體100μL開展面對面。

8系統、用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min進一步提升。

8空間廣闊、揭開封板膜，棄去液體改革創新，吸水紙上拍干知識和技能，每孔加滿洗滌液，靜置20s新模式，甩去洗滌液實現，吸水紙上拍干，如此重復4次（共洗板5次）組織了。若使用自動洗板機服務體系，請按洗板機操作程序進行洗板，添加浸泡20s的程序搶抓機遇，可以提高檢測的精度分析。洗板結(jié)束，加底物前全面闡釋，要在干凈不掉屑的紙上非常激烈，充分拍干反應(yīng)板競爭力所在。

9、將底物A和B按1:1體積充分混合設備製造，所有孔中加入底物混合液100μL分享。用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min信息化。

   10、所有孔加入終止液50μL生動，在酶標儀上讀取各孔吸光度（OD值）新型儲能。

【檢驗結(jié)果的解釋】

檢測完成后，以陰性對照的OD+0.25新品技，做為閾值範圍，樣本OD值大于閾值，為陽性紮實做；樣本OD值低于閾值為陰性空間廣闊。

【檢驗方法的局限性】

1、僅供科研使用提供深度撮合服務，不得用于臨床診斷服務品質。

2、在試劑盒標示的有效期內(nèi)使用組成部分，過期產(chǎn)品不得使用影響。

3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用的過程中。

4發展契機、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。

5促進進步、如果樣本值高于大標準品濃度值發力，請將樣本適當稀釋后，再重新測定迎來新的篇章。

6共創美好、待測樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會干擾檢測結(jié)果，檢測前空白區，請排除該因素協調機製。

7、通過其他方法得到的檢測結(jié)果形勢，與本試劑盒測定結(jié)果不具有直接的可比性實踐者。

【產(chǎn)品性能指標】

1、物理性能

試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明服務機製、無沉淀或者絮狀物貢獻力量。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝使用，無破損漏氣。

2發行速度、陰性結(jié)果

陰性對照的OD值不高于0.2更加堅強。

3、陽性結(jié)果

陽性對照的OD值不低于0.8性能。

4初步建立、特異性

本試劑盒識別天然和重組人腸道病毒71型，與結(jié)構(gòu)類似物無交叉供給。

5的方法、穩(wěn)定性

    2℃-8℃保存，有效期6個月進行探討。

【注意事項】

生物安全

1落到實處、檢測必須符合實驗室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴格防止交叉污染最新，所有樣品技術創新、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)按照傳染物進行處置。

2重要作用、試劑盒的液體組分中持續向好，含有proclin-300防腐劑，可能引起皮膚過敏反應(yīng)充足，避免吸入煙霧與皮膚接觸進一步推進。

3、底物液對皮膚方案、眼睛和上呼吸道有刺激作用應用的選擇，避免吸入煙霧。戴上防護手套左右，實驗完成后*洗手背景下。

技術(shù)提示

1、混合蛋白溶液時可靠保障，避免起泡自然條件。

2、加校準品與樣本時開展，每個校準品濃度和樣本都要更換移液槍頭互動互補，公共組分應(yīng)該懸臂加樣，避免交叉污染提單產。

3深入實施、合適的溫育時間，和充分的洗滌步驟，是保證實驗結(jié)果準確性的必要條件效果。

4有所應、底物溶液為無色液體，保存過程中變?yōu)樗{色合作關系，代表底物溶液已經(jīng)失效著力提升，不得使用。

5傳遞、終止液加樣順序與底物溶液加樣順序*融合，加入終止液后，藍色底物產(chǎn)物相關性，會瞬間變?yōu)辄S色規劃。

6、實驗中可以使用，用剩的板條，應(yīng)立即放回自封袋中紮實，密封（低溫干燥）保存效高化。

7、所有液體組分投入力度，使用前充分搖勻創造，嚴格按照說明書標明的時間、加樣量及加樣順序進行溫育操作貢獻法治。

廢物處理

  所有使用或未使用的試劑設備製造，所有污染性的一次性材料，應(yīng)當遵循傳染性或潛在傳染性產(chǎn)品的處理程序攻堅克難，每個實驗室都有責任根據(jù)其實驗的類型和危險性級別管理，進行廢物和污物的處理，同時要嚴格依照有關(guān)規(guī)定對待所有的廢物和污物雙向互動。