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K1-Fluo 激光共聚焦顯微鏡在細(xì)胞骨架研究中的應(yīng)用

來源: 上海巨納科技有限公司    2022年12月13日 14:24  

隨著生物學(xué)的發(fā)展,對觀察細(xì)胞形態(tài)所使用的儀器精度也越來越高需求,激光共聚焦顯微鏡具有高靈敏度堅定不移,高分辨率,高放大率等優(yōu)點更讓我明白了,而且它不但可以在水平方向上對標(biāo)本進(jìn)行測量和分析迎難而上,還可以獲得清晰的三維圖像。同時它還可以處理活的樣品探索,不會對樣品造成化學(xué)或物理破壞堅持先行,因此它在形態(tài)學(xué),分子細(xì)胞生物學(xué)滿意度,神經(jīng)科學(xué)情況較常見,藥理學(xué)可持續,遺傳學(xué)等研究領(lǐng)域中成為有力的工具。

K1-Fluo 激光共聚焦顯微鏡的介紹

共聚焦顯微鏡的原理

K1-Fluo ABM 是在熒光顯微鏡的基礎(chǔ)上加裝了激光掃描裝置體製,使用405nm ,488nm , 561nm , 638nm波長的激光作為光源構建,并利用計算機(jī)進(jìn)行圖像處理,獲得高分辨率服務延伸,高質(zhì)量的圖像共創輝煌。K1-Fluo ABM 主要由激光發(fā)射器,掃描器研究,熒光顯微鏡高效,計算機(jī)存儲器以及處理和控制系統(tǒng)組成。通過針孔成像技術(shù)還可以對樣品進(jìn)行無損傷斷層掃描提高,并且利用自帶的軟件自動進(jìn)行三維重構(gòu)機構。

由于K1-Fluo 采用針孔共聚焦技術(shù),在物鏡的焦平面上放置了一個帶有小孔的擋板開展試點,可以將焦平面以外的雜散光擋住攜手共進,消除球差,并進(jìn)一步消除色差推進一步。

傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡使用的是場光源經過,標(biāo)本上每一點的圖像都會受到鄰近點的衍射的干擾,激光共聚焦顯微鏡采用點掃描技術(shù)力度,激光束經(jīng)照明針孔形成點光源對焦平面上進(jìn)行逐點掃描明確了方向,標(biāo)本上被照射的熒光在探測針孔處成像,該點以外的熒光均被探測針孔擋住勇探新路,因此大大提高了清晰度單產提升。在物鏡轉(zhuǎn)臺上裝上步進(jìn)馬達(dá),就可以控制物鏡上下移動試驗,就可以獲得一張紙連續(xù)的光學(xué)切片勞動精神,在利用計算機(jī)系統(tǒng)自動進(jìn)行三維重建。

與此同時LSCM也是觀察活細(xì)胞動態(tài)製度保障、多重免疫熒光標(biāo)記和離子熒光標(biāo)記的有力工具預下達。

K1-FluoDMB激光共聚焦顯微鏡的應(yīng)用案例

微絲(MF),又稱肌動蛋白統籌推進,是真核細(xì)胞中由肌動蛋白組成的高度動態(tài)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)方案,其參與細(xì)胞內(nèi)多種生理活動,如細(xì)胞質(zhì)流動了解情況、細(xì)胞分裂深入、細(xì)胞顆粒的運輸、肌肉收縮等等重要的。細(xì)胞骨架通常是通過迅速的聚合解聚來調(diào)整或改變其形態(tài)開展研究,從而在細(xì)胞中開展各種功能以及應(yīng)對外界刺激時維持細(xì)胞正常的生理活動姿勢。細(xì)胞中微絲骨架的動態(tài)變化直接接受肌動蛋白結(jié)合蛋白(ABPs)的調(diào)節(jié)。ABPs通過與單體肌動蛋白或絲狀肌動蛋白結(jié)合培養,調(diào)節(jié)二者之間的動態(tài)平衡技術,進(jìn)而調(diào)控微絲骨架的組織和功能。通過采用探針標(biāo)記對體內(nèi)的微絲骨架進(jìn)行標(biāo)記再利用激光共聚焦顯微鏡進(jìn)行激發(fā)熒光可以獲得可視化的圖像推動。正是由于發(fā)光探針結(jié)合激光共聚焦顯微鏡的使用,才使得對于細(xì)胞骨架的系統(tǒng)性研究越來越透徹資源配置,從而一步步揭開細(xì)胞骨架的奧秘信息。


1.細(xì)胞觀察

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2. 細(xì)胞凋亡

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結(jié)論:

通過多篇文獻(xiàn)的反映,激光熒光共聚焦顯微鏡呈現(xiàn)一系列的優(yōu)點大力發展,比如:高清晰豐富內涵,高分辨率圖像的采集,無損傷連續(xù)光學(xué)切片的采集產能提升,三維圖像的重建適應性,對感興趣區(qū)域的掃描,定位通過活化,測量等落地生根。

通過激光共聚焦顯微鏡可以獲得豐富的實驗數(shù)據(jù),有利于支持實驗研究健康發展,而K1-Fluo自帶的分析軟件還可以對樣品進(jìn)行最直觀的分析有效保障。

總而言之,我們相信長效機製,LSCM 可以開拓生命科學(xué)實時觀察活細(xì)胞的機(jī)構(gòu)和離子動態(tài)生物學(xué)變化的途徑講實踐,隨著新軟件的不斷開發(fā)以及各個學(xué)科的不斷發(fā)展和滲透,為了CLSM 必將由更廣闊的發(fā)展前景奮戰不懈。



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