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LTD4 ELISA試劑盒

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LTD4 ELISA Kit白三烯D4(LTD4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 用途:該試劑盒用于體外定量檢測血清基礎、血漿或其他相關(guān)生物液體中天然及部分重組LTD4濃度。

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LTD4  ELISA Kit白三烯D4(LTD4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

 

用途

該試劑盒用于體外定量檢測血清形勢、血漿或其他相關(guān)生物液體中天然及部分重組LTD4濃度實踐者。

LTD4  ELISA Kit白三烯D4(LTD4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  檢測原理

本試劑盒采用競爭ELISA法。用LTD4抗原包被于酶標板上約定管轄,實驗時樣品或標準品中的LTD4與包被的LTD4競爭*標記的抗LTD4單抗上的結(jié)合位點數據,游離的成分被洗去。加入辣根過氧化物酶標記的親和素發揮,*與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物顯著,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)開放以來,TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色占,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值提供了有力支撐,LTD4濃度與OD450值之間呈反比激發創作,通過繪制標準曲線計算出樣品中LTD4的濃度。

反應(yīng)類型競爭法
規(guī)格96T
反應(yīng)時間2.5h
反應(yīng)性通用
檢測方法Colormetric
檢測范圍0.31-20 ng/mL
靈敏度0.19 ng/mL
樣本體積50μL
樣本類型血清進一步意見、血漿或其他相關(guān)生物液體

特異性

可檢測樣本中的LTD4增幅最大,且與其它相關(guān)蛋白無明顯交叉反應(yīng)。

重復(fù)性

板內(nèi)生產能力,板間變異系數(shù)均<10%標準。

LTD4  ELISA Kit白三烯D4(LTD4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  典型數(shù)據(jù)

由于實驗操作條件的不同(如操作者示範推廣、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等)即將展開,標準曲線的OD值會有所差異積極參與。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實驗者需根據(jù)自己的實驗建立標準曲線培養。

(ng/mL)O.DAverage
200.373 
0.431
0.402
100.5 
0.55
0.525
50.751 
0.741
0.746
2.51.097 
1.097
1.097
1.251.559 
1.549
1.554
0.632.02 
2
2.01
0.312.371 
2.383
2.377
02.849 
2.867
2.858

精密度

板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次交流研討。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。

 Intra-assay PrecisionInter-assay Precision
Sample123123
n202020202020
Mean
(ng/mL)
1.002.909.301.002.7010.20
Standard deviation0.100.200.300.100.100.40
C V (%)10.006.903.2310.003.703.92

回收率

分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白形式,做回收實驗建設應用,得出回收率范圍和平均回收率。

Sample TypeRange (%)Average Recovery (%)
Serum (n=5)86-9792
EDTA plasma (n=5)86-10093
Cell culture media (n=5)84-9990

線性

分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白日漸深入,做回收實驗動力,得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍互動式宣講,4倍自然條件,8倍,16倍做回收實驗開展,得出回收率范圍及平均回收率互動互補。

  Serum (n=5)EDTA plasma (n=5)Cell culture media (n=5)
1:2Range (%)89-10487-10193-107
Average (%)969299
1:4Range (%)88-10189-103104
Average (%)9494104
1:8Range (%)92-10789-10394-107
Average (%)979699
1:16Range (%)91-10289-10197-110
Average (%)9694103

試劑盒組成及保存

未拆封的試劑盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用試劑盒意向,請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分意料之外。

中文名稱英文名稱規(guī)格保存條件
ELISA酶標板(可拆卸)Micro ELISA Plate(Dismountable)8 孔×12 條-20℃,可存放6個月
凍干標準品Reference Standard2支
濃縮*化抗體(100×)Concentrated Biotinylated Detection Ab1支 120 μL
濃縮HRP酶結(jié)合物(100×)Concentrated HRP Conjugate1支 120 μL-20℃(避光)形式,可存放6個月
標準品&樣品稀釋液Reference Standard & Sample Diluent1瓶 20 mL4℃.可存放6個月
*化抗體稀釋液Biotinylated Detection Ab Diluent1瓶 14 mL
酶結(jié)合物稀釋液HRP Conjugate Diluent1瓶 14 mL
濃縮洗滌液(25×)Concentrated Wash Buffer (25×)1瓶 30 mL
底物溶液(TMB)Substrate Reagent1瓶 10 mL4℃(避光)
反應(yīng)終止液Stop Solution1瓶 10 mL4℃
封板覆膜Plate Sealer5 張 
產(chǎn)品說明書Product Description1 份
質(zhì)檢報告Certificate of Analysis1 份

說明:所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染置之不顧。
試劑體積以實際發(fā)貨版說明書為準。相關(guān)試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些數字化,請在使用時量取而非直接倒出方便。

試驗所需自備物品

  • 1.酶標儀(450nm波長濾光片)
  • 2.高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
  • 3.37℃恒溫箱各領域,雙蒸水或去離子水
  • 4.吸水紙

操作步驟

1.Add 50 μL of standard or sample to each well.

2.Immediay add 50 μL of Biotinylated Detection Ab to each well.

3.Incubate for 45 min at 37℃. Aspirate and wash 3 times.

4.Add 100 μL of HRP Conjugate to each well. Incubate for 30 min at 37℃. Aspirate and wash 5 times.

5.Add 90 μL of Substrate Reagent. Incubate for 15 min at 37℃.

6.Add 50 μL of Stop Solution.

7.Read the OD at 450 nm immediay. Calculation of the results.


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