BJ5183-AD-1 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞 南京賽泓瑞生物在感受態(tài)細(xì)胞的研發(fā)方面與時俱進，實(shí)力雄厚，擁有了克隆初步建立、表達(dá)綜合運用、酵母和農(nóng)桿菌4大類，共計(jì)百余種感受態(tài)細(xì)胞的方法。在電擊感受態(tài)方面實事求是，擁有了大腸桿菌 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞和農(nóng)桿菌電擊感受態(tài)種類，*提高了客戶在轉(zhuǎn)基因以及文庫(kù)構(gòu)建方面的成功率落到實處。

BJ5183-AD-1 Electro
BJ5183-AD-1 Electroporation-Competent Cell



BJ5183-AD-1感受態(tài)細(xì)胞基因組：

endA1 sbcBC recBC galK met thi-1 bioT hsdR (Strr) [pAdEasy-1 (Ampr)]
BJ5183-AD-1感受態(tài)細(xì)胞簡(jiǎn)要說(shuō)明：
BJ5183-AD-1 是攜帶了腺病毒質(zhì)粒 pAdeasy-1 的 BJ5183 菌株服務水平。-CMbio-BJ5183 菌株是一種具有較高重組活力的大腸桿菌菌株，是目前腺病毒系統(tǒng)常用的感受態(tài)細(xì)胞倍增效應。-CMbio- BJ5183 菌株含有 sbcBC recBC 雙重突變規則製定，賦予 BJ5183 細(xì)胞較強(qiáng)的重組能力，有利于轉(zhuǎn)入的目的基因與腺病毒骨架 質(zhì)粒的重組優化服務策略。endA1（缺失核酸內(nèi)切酶）的突變有利于重組 DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒 DNA 的提取發揮效力。BJ5183-AD-1 菌株細(xì)胞中已經(jīng)提前轉(zhuǎn)入了腺病毒質(zhì)粒 pAdeasy-1[encodes the Adenovirus-5 genome (E1/E3 deleted)]，賦予該 菌株氨芐抗性明顯，在病毒質(zhì)粒構(gòu)建時(shí)，只需轉(zhuǎn)入線性化的目的質(zhì)粒即可顯示，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)步驟創新為先，提高了病毒質(zhì)粒重組概率。 Strr 賦予 BJ5183-AD-1 菌株*抗性科普活動。-CMbio-
-CMbio-BJ5183-AD-1 電擊感受態(tài)細(xì)胞適用于普通質(zhì)粒和大質(zhì)粒的構(gòu)建創新延展，經(jīng)特殊工藝制作，pCAMBIA2301 質(zhì)

粒(size:1163bp)檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>1×106 cfu/μg DNA長期間。
BJ5183-AD-1感受態(tài)細(xì)胞操作說(shuō)明：

1. 0.1 cm 電擊杯和杯蓋從儲(chǔ)存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上 5 分鐘基本情況，待其瀝干水分，正置 5 分鐘高端化，使乙 醇充分揮 發(fā)力量，待乙醇揮發(fā)干凈立即插入冰中，壓實(shí)冰面提單產，電極杯頂離冰面 0.5 cm 以方便蓋上杯蓋深入實施，冰中 靜置 5 分鐘充分降溫。 2. 取-80℃保存的 BJ5183-AD-1 電擊感受態(tài)細(xì)胞插入冰中 5 分鐘發展空間，待其融化效果，加入目的 DNA (質(zhì)劣兴鶓?；蜻B接產(chǎn)物)并用 手EP 管底輕輕混勻，避免產(chǎn)生氣泡合作關系，立即插入冰中著力提升。 A. 測(cè)定轉(zhuǎn)化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的對(duì)照質(zhì)粒 pCAMBIA2301；B. 對(duì)于連接產(chǎn)物傳遞，請(qǐng)用乙醇沉淀 DNA 后加入適量 TE 緩沖液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重 懸融合，DNA 濃度不超過(guò) 100 ng/μl，體積不超過(guò) 5 μl/50  μl 感受態(tài)更加廣闊。-CMbio-
3. 用 200 μl 槍頭(用刀切除 0.5cm 槍尖)將感受態(tài)-DNA 混合物快速移到電擊杯中規劃，避免產(chǎn)生氣泡，蓋上杯蓋成效與經驗。

4. 啟動(dòng)電轉(zhuǎn)儀適應性，設(shè)置參數(shù)：C=25 μF，PC=200 Ω稍有不慎，V=1.8 kV (此為 BioRad 電轉(zhuǎn)儀*參數(shù)重要作用，也可按所用 電轉(zhuǎn)儀 *的參數(shù)操作），將電擊杯快速放入電轉(zhuǎn)槽中最為顯著，電擊完成快速插入冰中尤為突出。-CMbio-
5. 2 分鐘后從冰中取出電擊杯，放室溫環境，加入 700 μl 不含抗生素的無(wú)菌 S.O.C. 培養(yǎng)基（室溫）空間載體，用 1ml 槍吹吸電擊 杯底部數(shù)次混勻后，轉(zhuǎn)移到 50 ml 離心管（BD Falcon 50 ml 錐形離心管等）相對簡便，向離心管中 補(bǔ)加 S.O.C. 培養(yǎng)基至 10 ml重要組成部分。37℃，225 rpm 復(fù)蘇 60 分鐘合作。-CMbio-
6. 5000 rpm 離心一分鐘收菌勃勃生機，重懸后取 100-200 μl 涂布到含相應(yīng)抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量較大， 若全部涂 板請(qǐng)選用直徑 15cm 培養(yǎng)皿 2-5 個(gè)）極致用戶體驗。將平板倒置放于 37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)提供有力支撐。-CMbio-