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BJ5183感受態(tài)細(xì)胞

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BJ5183感受態(tài)細(xì)胞 南京賽泓瑞生物在感受態(tài)細(xì)胞的研發(fā)方面,實(shí)力雄厚全方位,擁有了克隆高效節能、表達(dá)影響力範圍、酵母和農(nóng)桿菌4大類,共計(jì)百余種感受態(tài)細(xì)胞新創新即將到來。在電擊感受態(tài)方面邁出了重要的一步,擁有了大腸桿菌 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞和農(nóng)桿菌電擊感受態(tài)種類,*提高了客戶在轉(zhuǎn)基因以及文庫構(gòu)建方面的成功率重要工具。

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BJ5183感受態(tài)細(xì)胞

BJ5183 Chemically Competent Cell
產(chǎn)品規(guī)格:

BJ5183 
pUC19(control vector)10pg/μl 10μl

   
BJ5183感受態(tài)細(xì)胞基因型:
endA1 sbcBC recBC galK met thi-1 bioT hsdR (Strr)
BJ5183感受態(tài)細(xì)胞簡要說明:
BJ5183是一種具有較高重組活力的大腸桿菌菌株積極拓展新的領域,是目前腺病毒系統(tǒng)常用的感受態(tài)細(xì)胞。BJ5183菌株含有sbcBC recBC雙重突變更優質,賦予BJ5183細(xì)胞較強(qiáng)的重組能力相對開放,有利于轉(zhuǎn)入的目的基因與腺病毒質(zhì)粒{pAdeasy-1[encodes the Adenovirus-5 genome (E1/E3 deleted)]或pAdeasy-2[encodes the Adenovirus-5 genome (E1/E3/E4 deleted)]}的重組。endA1(缺失核酸內(nèi)切酶)的突變有利于重組DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取脫穎而出。Str賦予BJ5183菌株*抗性拓展應用。BJ5183感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>5×10cfu/μg DNA結構。
BJ5183感受態(tài)細(xì)胞操作說明:
1. BJ5183感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出關註度,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化哪些領域,加入目的質(zhì)粒(含有目標(biāo)基因并線性化)和腺病毒質(zhì)粒,并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)不斷創新,冰中靜置25分鐘建立和完善。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘參與水平,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率大型。
3.向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃明確相關要求,200 rpm復(fù)蘇60分鐘重要意義。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上深化涉外。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)體系。

BJ5183感受態(tài)細(xì)胞注意事項(xiàng):
1. 感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA開展試點,不可在冰中放置時(shí)間過長攜手共進,長時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入目的DNA時(shí)應(yīng)輕柔操作推進一步。
3. BJ5183菌株的質(zhì)粒產(chǎn)量不高經過。腺病毒構(gòu)建成功后,可選擇在其他大腸桿菌菌株中擴(kuò)繁力度,純化質(zhì)粒明確了方向。
4. BJ5183感受態(tài)細(xì)胞對(duì)溫度敏感系統性,應(yīng)儲(chǔ)存在-80℃超低溫冰箱,避免溫度波動(dòng)改進措施,溫度波動(dòng)會(huì)降低感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率就此掀開。


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