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BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受態(tài)細胞

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BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受態(tài)細胞南京賽泓瑞生物在感受態(tài)細胞的研發(fā)方面發展目標奮鬥,實力雄厚技術先進,擁有了克隆、表達延伸、酵母和農(nóng)桿菌4大類認為,共計百余種感受態(tài)細胞。在電擊感受態(tài)方面技術特點,擁有了大腸桿菌 電轉化感受態(tài)細胞和農(nóng)桿菌電擊感受態(tài)種類提高鍛煉,*提高了客戶在轉基因以及文庫構建方面的成功率。

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BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受態(tài)細胞基因型:

FompT hsdS(rB mB) dcm+ Tetr galλ(DE3) endA Hte [argU proL Camr] [argU ileY leuW Strep/Specr]

BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受態(tài)細胞簡要說明:

 BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL菌株來源于Stratagene公司的BL21-Gold 菌株凝聚力量,缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶,從而減少對重組蛋白的降解聽得進,補充大腸桿菌缺乏的4種稀有密碼子( AGA新的力量、AUA、CCC便利性、CUA) 對應的tRNA (argU全面展示、ileY、proL深刻認識、leuW)核心技術,提高外源基因,尤其是富含AT-或 GC-的真核基因在原核系統(tǒng)中的表達水平主動性。
該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3區(qū)(DE3區(qū)含有T7噬菌體RNA聚合酶)創造性,可同時表達T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶,可用于pET系列道路,pGEX規模設備,pMAL等質粒的蛋白表達真諦所在,同時具有四環(huán)素,*競爭力,*充分,*抗性。
 BL21- Codon Plus(DE3)-RIPL 感受態(tài)細胞由特殊工藝制作廣泛應用,經(jīng)pUC19質粒檢測轉化效率高達108cfu/μg關註度。

BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受態(tài)細胞操作說明:

  1.  取100μl冰上融化的 BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL感受態(tài)細胞,加入目的質粒并輕輕混勻哪些領域,冰上靜置25分鐘敢於挑戰。

2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘積極,晃動會降低轉化效率探索。

  1.  向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB),混勻后37℃產業,200rpm復蘇60分鐘滿意度。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上可持續。

  1.  將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)主要抓手。

 

BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受態(tài)細胞注意事項:

  1.   感受態(tài)細胞在冰上融化。
  2.  混入質粒時應輕柔操作構建。
  3.  轉化高濃度的質羷撔驴萍??上鄳獪p少終用于涂板的菌量。
  4.  誘導時共創輝煌,IPTG濃度可選(0.1-2mM均可)具有重要意義。

5. 為獲得需要量的蛋白,誘導時間大部分,溫度強大的功能,IPTG濃度需實驗者優(yōu)化。

BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細胞其他*:


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