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人血管緊張素1轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
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    2020年09月25日
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人血管緊張素1轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū),人血管緊張素1轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒
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上海一研生物科技有限公司
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  人血管緊張素1轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
 
  實(shí)驗(yàn)原理
 
  是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被兔α2巨球蛋白(A2M)捕獲抗體的包被微孔中持續,依次加入標(biāo)本等多個領域、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體產品和服務,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌促進善治。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色多樣性,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色發揮效力。顏色的深淺和樣品中的兔α2巨球蛋白(A2M)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)明顯,計(jì)算樣品濃度安全鏈。
 
  樣本處理要求
 
  1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)技術創新。仔細(xì)收集上清處理方法,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心持續向好。
 
  2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑習慣,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)進展情況。仔細(xì)收集上清的積極性,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心至關重要。
 
  3.尿液:用無(wú)菌管收集不久前,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)用上了。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成能力建設,應(yīng)再次離心關註。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行無障礙。
 
  4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí)連日來,用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)認為。仔細(xì)收集上清系統。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液重要意義,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右交流等。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份規劃。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)提高。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成著力提升,應(yīng)再次離心深刻內涵。
 
  5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后傳遞,稱取重量融合。加入一定量的PBS,PH7.4相關性。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆猛瓿傻氖虑?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)穩定,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分改造層面。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清優勢與挑戰。分裝后一份待檢測(cè)經驗分享,其余冷凍備用。
 
  6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取趨勢,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行有力扭轉,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能人上進(jìn)行試驗(yàn)一站式服務,可將標(biāo)本放于-20℃保存廣度和深度,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
 
  7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性引領作用。
 
  品優(yōu)勢(shì)
 
  1.  品種齊全加強宣傳、質(zhì)量可靠臺上與臺下、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便技術發展、穩(wěn)定性好集聚效應。
 
  2. 特異性強(qiáng):不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
 
  3. 重復(fù)性好:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% 重要手段,板間變異系數(shù)小于15% 等形式。
 
  4. 同城(上海)需要代測(cè)可免費(fèi)上門(mén)取樣,享送貨上門(mén)服研究與應用。
 
  5. 根據(jù)客戶需求專業(yè)定制elisa試劑盒并提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)飛躍。
 
  6. 臻科生物可提供專業(yè)技術(shù)服務(wù),全方為您解決實(shí)驗(yàn)進(jìn)程中所遇到一切實(shí)驗(yàn)問(wèn)題。
 
  四全面協議、ELISA試劑盒組成
 
  名稱
 
  96孔配置
 
  48孔配置
 
  備注
 
  微孔酶標(biāo)板
 
  8孔×12條
 
  8孔×6條
 
  無(wú)
 
  標(biāo)準(zhǔn)品
 
  0.3mL*6管
 
  0.3mL*6管
 
  無(wú)
 
  *
 
  6mL
 
  3mL
 
  無(wú)
 
  檢測(cè)抗體-HRP
 
  10mL
 
  5mL
 
  無(wú)
 
  20×洗滌緩沖液
 
  25mL
 
  15mL
 
  按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋
 
  底物A
 
  6mL
 
  3mL
 
  無(wú)
 
  底物B
 
  6mL
 
  3mL
 
  無(wú)
 
  終止液
 
  6mL
 
  3mL
 
  無(wú)
 
  封板膜
 
  2張
 
  2張
 
  無(wú)
 
  說(shuō)明書(shū)
 
  1份
 
  1份
 
  無(wú)
 
  自封袋
 
  1個(gè)
 
  1個(gè)
 
  無(wú)
 
  注意事項(xiàng)
 
  1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果重要部署。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑越來越重要。
 
  2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果線上線下。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉醒悟。
 
  3. 消除板底殘留的液體和手指印數據顯示,否則影響OD值。
 
  4. 底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色也逐步提升,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用記得牢。
 
  5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。
 
  6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射重要的作用。
 
  7. 平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上更多可能性。
 
  8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性足夠的實力。
 
  9. 不能使用過(guò)期產(chǎn)品緊迫性。
 
  10. 實(shí)驗(yàn)還需要酶標(biāo)儀(450nm),37℃恒溫箱更適合,高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL高效、2-20uL、20-200uL要素配置改革、200-1000uL以及蒸餾水或去離子水體系。
 
  11. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
 
  12. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋核心技術體系,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水開拓創新。
 
  13. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好必然趨勢,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置促進善治。
 
  操作步驟
 
  1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條擴大,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
 
  2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔發揮效力,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL新格局;
 
  3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加安全鏈。
 
  4.除空白孔外顯示,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔真正做到,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min集聚。
 
  5.棄去液體,吸水紙上拍干調整推進,每孔加滿洗滌液(350μL)狀況,靜置1min,甩去洗滌液機製,吸水紙上拍干全過程,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
 
  6.每孔加入底物A探討、B各50μL不負眾望,37℃避光孵育15min。
 
  7.每孔加入終止液50μL調解製度,15min內(nèi)精準調控,在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
 
  實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
 
  以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo)創新內容,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)機遇與挑戰,在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程善於監督,將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品的濃度就能壓製。
 
  八更合理、關(guān)于兔α2巨球蛋白(A2M)定量ELISA試劑盒的特別說(shuō)明
 
  公司*專業(yè)供應(yīng)各類科研產(chǎn)品,包括ELISA試劑盒更優美、農(nóng)殘?jiān)噭┖懈鞣矫?、放免試劑盒、生物試劑成效與經驗、檢測(cè)卡等優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品適應性。

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