運(yùn)用DGGE搜尋未知突變
DGGE 是基于以下原理實力增強，即增加聚丙烯酰胺凝膠內(nèi)變性劑的濃度會熔解雙鏈DNA 的不同區(qū)域體系流動性。當(dāng)溫度達(dá)到zui低熔解度區(qū)域的熔解溫度Tm 時(shí)，DNA 部分熔解重要工具，在凝膠中形成遷移率下降的分支分子（Myers et al.1987）積極拓展新的領域。在均一的運(yùn)行溫度（50—65°C）和尿素與甲酰胺線性變性梯度條件下即形成了變性環(huán)境配套設備。梯度以垂直或平行于電泳方向形成。DGGE 是zui靈敏的突變檢測方法競爭力所在，其效率可達(dá)99%（Grompe 1993）引人註目。DCode 系統(tǒng)通過以下途徑優(yōu)化DGGE：
- 溫度控制模塊提供45–70°C 內(nèi)的*運(yùn)行溫度
- 系統(tǒng)可運(yùn)行2 塊16 x 16 cm 凝膠或4 塊7.5 x 10 cm 凝膠
- 可選擇的MacMelt 或WinMelt 軟件優(yōu)化了GC 夾及引物的置放
DGGE 的兩種模式。A 溝通機製，凝膠的變性梯度方向與電泳方向垂直好宣講。從原生乳腺癌種擴(kuò)增的p53 基因6 號外顯子的野生型和突變型等位基因通過垂直DGGE（80V，56°C領先水平，2 小時(shí)）分離。感謝AL Borresen, Radium Hospital, Oslo, Norway 提供的數(shù)據(jù)。B 戰略布局，凝膠的變性梯度方向與電泳方向平行事關全面。p53 基因8 號外顯子的野生型和突變型等位基因在8%丙烯酰胺：甲叉37.5：1 平行梯度（40–65% 變性劑）凝膠上，1 x TAE 緩沖液狀態， 60°C技術節能，150 V，電泳2.5 個(gè)小時(shí)廣泛認同。左泳道國際要求，突變型等位基因；中鍛造，野生型等位基因競爭激烈；右，突變型與野生型等位基因改善。
DGGE分離示意圖空白區。所示為一個(gè)變性梯度方向與電泳方向垂直的凝膠，以及一個(gè)有單個(gè)熔解區(qū)域的目標(biāo)序列信息化。野生型和突變型樣品加入到制備孔內(nèi)充分發揮。在低變性劑濃度時(shí)，DNA的片段為雙鏈充分發揮，但當(dāng)濃度增加時(shí)雙鏈DNA 開始熔解選擇適用，形成分枝分子。到濃度非常高時(shí)設計，DNA的片段可熔解形成2條單鏈業務指導。
運(yùn)用DGGE搜尋未知突變
DGGE 是基于以下原理，即增加聚丙烯酰胺凝膠內(nèi)變性劑的濃度會熔解雙鏈DNA 的不同區(qū)域就此掀開。當(dāng)溫度達(dá)到zui低熔解度區(qū)域的熔解溫度Tm 時(shí)長足發展，DNA 部分熔解，在凝膠中形成遷移率下降的分支分子（Myers et al.1987）。在均一的運(yùn)行溫度（50—65°C）和尿素與甲酰胺線性變性梯度條件下即形成了變性環(huán)境實施體系。梯度以垂直或平行于電泳方向形成組建。DGGE 是zui靈敏的突變檢測方法，其效率可達(dá)99%（Grompe 1993）效果較好。DCode 系統(tǒng)通過以下途徑優(yōu)化DGGE：
- 溫度控制模塊提供45–70°C 內(nèi)的*運(yùn)行溫度
- 系統(tǒng)可運(yùn)行2 塊16 x 16 cm 凝膠或4 塊7.5 x 10 cm 凝膠
- 可選擇的MacMelt 或WinMelt 軟件優(yōu)化了GC 夾及引物的置放
DGGE 的兩種模式重要的意義。A ，凝膠的變性梯度方向與電泳方向垂直等多個領域。從原生乳腺癌種擴(kuò)增的p53 基因6 號外顯子的野生型和突變型等位基因通過垂直DGGE（80V再獲，56°C，2 小時(shí)）分離應用擴展。感謝AL Borresen, Radium Hospital, Oslo, Norway 提供的數(shù)據(jù)體驗區。B ，凝膠的變性梯度方向與電泳方向平行活動上。p53 基因8 號外顯子的野生型和突變型等位基因在8%丙烯酰胺：甲叉37.5：1 平行梯度（40–65% 變性劑）凝膠上有望，1 x TAE 緩沖液， 60°C導向作用，150 V標準，電泳2.5 個(gè)小時(shí)。左泳道堅持好，突變型等位基因；中大幅增加，野生型等位基因特性；右，突變型與野生型等位基因等特點。
DGGE分離示意圖建言直達。所示為一個(gè)變性梯度方向與電泳方向垂直的凝膠，以及一個(gè)有單個(gè)熔解區(qū)域的目標(biāo)序列將進一步。野生型和突變型樣品加入到制備孔內(nèi)充分發揮。在低變性劑濃度時(shí)，DNA的片段為雙鏈成就，但當(dāng)濃度增加時(shí)雙鏈DNA 開始熔解重要方式，形成分枝分子。到濃度非常高時(shí)系統，DNA的片段可熔解形成2條單鏈非常重要。
