蛋白組學(xué)分析設計，是蛋白質(zhì)分析的一項(xiàng)非常重要的技術(shù)，一般會使用ESI-LCMS或者M(jìn)ALDI-TOFMS改進措施。許多蛋白質(zhì)和肽極其微量就此掀開，需要質(zhì)譜儀的高靈敏度檢測才能發(fā)現(xiàn)，而這就需要一個(gè)非常穩(wěn)定的前端HPLC支持此微量檢測今年。
Prominence nano系列是一套納升LC系統(tǒng)穩步前行，可在納升流量下進(jìn)行精準(zhǔn)流速的溶劑輸送。按照應(yīng)用不同動手能力，可以配置成1D和2D系統(tǒng)逐步改善。
Prominence nano具備納升流速下的高保留時(shí)間重復(fù)性，非常低的系統(tǒng)死體積和極低的交叉污染等特點(diǎn)提升。
基本性能
· 納升流速傳感器可保證精確的納升溶劑傳輸
· RFC系統(tǒng)大大降低溶劑消耗
· 低容量納升閥---保證了低的系統(tǒng)死體積
· 高靈敏度分析
納米輔助控制軟件的直觀操作
· 圖形界面直觀操作
· 可視化監(jiān)控儀器運(yùn)行狀態(tài)
· 二維參數(shù)的便捷設(shè)置
蛋白質(zhì)組分析的應(yīng)用
· 高保留時(shí)間重復(fù)性
· 二維LC的高分辨率
納升流速傳感器可保證精確的納升溶劑傳輸
LC-20AD nano采用了新的RFC技術(shù),可對每一個(gè)泵進(jìn)行獨(dú)立的流速控制大大提高，在納升流速下保證好的流量精度。的RFC系統(tǒng)是由高精度的納升流速感應(yīng)器控制應用前景，確保在任何時(shí)間精準(zhǔn)的流速測量有很大提升空間。同時(shí)，流量傳感器配置了精確的溫度控制機(jī)制首次，以減少不確定的環(huán)境因素對溶劑輸送的影響可能性更大。LC-20AD nano在梯度分析能保證很好的流速穩(wěn)定性，在300nL/min時(shí)候保留時(shí)間重復(fù)性的RSD小于0.2%搖籃。
RFC系統(tǒng)的原理
泵內(nèi)配置了一個(gè)流速傳感器共享應用，可持續(xù)監(jiān)測泵輸出的納升流速。為了保證流速在設(shè)定的范圍內(nèi)標準，采用反饋控制模式示範推廣，傳感器的監(jiān)測到真實(shí)流速后可以自動調(diào)整分流比例，從而保證流速的準(zhǔn)確性即將展開。另外大幅增加，分流后的流動相在混合前就經(jīng)過回流管路回到溶劑瓶，不會浪費(fèi)溶液傳承。
低溶劑消耗
RFC系統(tǒng)可確保每個(gè)泵輸出的溶劑分流后又回到流動相瓶中等特點。就算在高壓梯度分析中，兩種溶劑在分離后并不會像廢棄物一樣排出多種，從而降低溶劑消耗并減少對環(huán)境的影響將進一步。
FCV納升閥，低死體積
FCV nanoFCV納升閥體積為25nL發展成就，在納升范圍內(nèi)幾乎不會展寬成就。在納升LC使用捕集柱進(jìn)樣和二維系統(tǒng)中重要方式，F(xiàn)CV 納升閥是的。FCV 納升閥通過使用強(qiáng)化的定子和聚醚醚酮的轉(zhuǎn)子系統，可以大大降低樣品的吸附非常重要，同時(shí)獲得很好的耐用性。
高靈敏度分析
SIL-20ACSIL-20AC的直接進(jìn)樣功能與FCV納升閥的低擴(kuò)射性能相結(jié)合可實(shí)現(xiàn)微量體積樣品的進(jìn)樣分析提升。FCV納升閥后連接的捕集柱可以對進(jìn)樣的樣品進(jìn)行捕集濃縮高品質，從而實(shí)現(xiàn)高靈敏度分析。而且支撐能力，SIL-20AC被為交叉污染的自動進(jìn)樣器資源優勢，這些特征都可以滿足高靈敏度MS分析的要求。
2維LC的輔助控制軟件
輔助控制軟件可對2維LC進(jìn)行便捷設(shè)置特征更加明顯，在軟件圖形界面上可輕松對2維HPLC的進(jìn)行復(fù)雜梯度編程估算，設(shè)定流速等，然后生成方法文件并下載至儀器中進(jìn)行控制的可能性，而圖形化的流路圖和梯度曲線代表當(dāng)前狀態(tài)不要畏懼。簡便的設(shè)置可避免單獨(dú)使用LC控制軟件帶來的一系列的操作問題。
Prominence nano 2D系統(tǒng)在線的結(jié)合了離子交換和反向色譜模式（如下圖所示）問題，每種色譜模式都獨(dú)立運(yùn)行逐漸顯現，兩種模式的結(jié)合可進(jìn)行的分離。Prominence nano 2D系統(tǒng)可與配備Nano ESI源的LCMS系統(tǒng)聯(lián)用進(jìn)行濕法蛋白組學(xué)分析發展機遇，也可以與點(diǎn)靶儀和MALDI-TOF質(zhì)譜聯(lián)用進(jìn)行干法蛋白組學(xué)分析長效機製。
易操作的一維體系
Nano-Assist一維LC設(shè)置圖1D 納升LC系統(tǒng)對于確認(rèn)SDS PAGE分離前的蛋白質(zhì)十分有效，1D系統(tǒng)只需要非常簡單的操作就可以實(shí)現(xiàn)全技術方案。當(dāng)然分享，輔助控制軟件在1D和2D系統(tǒng)中使用都是十分方便的。
高保留時(shí)間重復(fù)性
蛋白質(zhì)組分析需要比較不同樣本的色譜峰差異信息化，而樣本中又存在許多特征相似的多肽方式之一，對保留時(shí)間的重復(fù)性要求非常高。Prominence nano系統(tǒng)的高重復(fù)性可保證蛋白質(zhì)組分析的高精數(shù)據(jù)新型儲能，配置了RFC系統(tǒng)的LC-20AD nano可以在流速為300 nL/min獲得RSD不超過0.2% 的保留時(shí)間重復(fù)性創新能力。
牛血清白蛋白（BSA）酶解樣品的重復(fù)性
2維 LC的高分辨率
牛血清白蛋白（BSA）酶解樣品的重復(fù)性在蛋白質(zhì)組學(xué)分析時(shí)，單一的1D反相分離不足以提供足夠的色譜峰容量範圍；所以求得平衡，為了實(shí)現(xiàn)復(fù)雜樣品的分離，需要進(jìn)行2D分離以保證足夠的峰容量註入新的動力。Prominence nano系統(tǒng)可以進(jìn)行2D分析領先水平，結(jié)合陽離子交換和反相模式，為蛋白質(zhì)組學(xué)分析提供所需的核心技術(shù)雙重提升。下圖為200fmol酵母蛋白質(zhì)的分析圖戰略布局，1D分離中的未分離組分在2D中繼續(xù)分離成幾個(gè)組分，2D分離的峰容量大大大于1D所獲得的效果表現明顯更佳。
分析條件
一維
柱 | PolysulfoethylA (50mmL.×1mmI.D.) |
流動相 | 甲酸銨緩沖液
濃度STEP梯度 |
流速 | 40 nL/min |
捕集柱 | (5 mmL.×300 ?m I.D.)
L-column （micro） |
捕集時(shí)長 | 5分鐘 |
脫鹽溶劑 | 水/蟻酸=100/0.1 |
脫鹽流速 | L/min |
脫鹽時(shí)長 | 5分鐘 |
2維
柱 | PicoFrit (100 mmL.×75 ?m I.D.) |
流動相 | 梯度洗脫
A)水/乙腈/蟻酸=98/2/0.1(v/v) B) 水/乙腈/蟻酸=5/95/0.1(v/v) |
流速 | 600nL/min |
溫度 | 溫度 |
檢測 | LCMS-IT-TOF |
樣本 | 酵母蛋白中的蛋白
（相當(dāng)于200 fmol的） |
* 分別利用1維和2維中不同類型的柱體進(jìn)行其他組合的分離模式也是可行的狀態。在這種情況下，分離或檢測方法由于使用的移動相分離模式或類型之間的相互作用指導，可能會有一些限制廣泛認同。
連接MALDI-TOFMS使用
Prominence nano系統(tǒng)不僅僅可以通過nano ESI接口連接LCMS使用，還可連接到配有自動點(diǎn)靶儀的MALDI-TOFMS儀器流動性。為了準(zhǔn)確分析MALDI靶的每個(gè)色譜峰鍛造，需要LC能夠在1nL到1µL范圍之內(nèi)精確控制流速，Prominence nano系統(tǒng)的滿足了此需要持續創新。
酶解BSA樣品的UV色譜圖（500fmol）
分析條件
檢測器 | UV220 nm |
柱 | MonoCap for Fast-flow 快速M(fèi)onoCap
(250 mmL. × 100 µm I.D.) |
流動相 | 1改善、水/乙腈/蟻酸=98/2/0.1(v/v) B) 水/乙腈/蟻酸=5/95/0.1(v/v)
2、梯度洗脫 |
流速 | 1 µL/min |
溫度 | 環(huán)境溫度 |
捕捉柱 | ODS (1 mmL. × 0.5 mm I.D.) |
點(diǎn)靶間隔 | 12 秒的點(diǎn)斷
每點(diǎn)液體：200nL（不包括基質(zhì)） |
