Attune®NxT聲波聚焦流式細(xì)胞儀采用了模塊設(shè)計(jì)供給，能夠配置至多4種激光和14色熒光檢測(cè)，適用于多參數(shù)分析 (圖1)實事求是，可滿足大多數(shù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和實(shí)驗(yàn)室預(yù)算要求進行探討。Attune® NxT流式細(xì)胞儀能夠兼容流式細(xì)胞儀中的熒光基團(tuán)和熒光蛋白，可以與您目前運(yùn)行的檢測(cè)板匹配 (表1)服務水平。采用可選的561 nm激光還可檢測(cè)多種熒光蛋白 (圖2)最新。



圖1. 采用Attune®NxT聲波聚焦流式細(xì)胞儀對(duì)小鼠調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和樹(shù)突狀細(xì)胞進(jìn)行多參數(shù) (10色) 分析。 采用FSC/SSC參數(shù) (A處理方法，左) 對(duì)淋巴細(xì)胞設(shè)門重要作用，在后續(xù)分析中除去表達(dá)B220的B細(xì)胞 (A，中)習慣。在B220–充足、CD45.2+設(shè)門范圍內(nèi)，根據(jù)CD3表達(dá)水平分析T細(xì)胞 (A的積極性，右)綠色化發展。根據(jù)輔助受體CD4或CD8 (B，左) 的表達(dá)水平將CD3+ T細(xì)胞分成兩個(gè)群體不久前。在CD4+ T細(xì)胞中左右，有一種抑制性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞亞群可以表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子Foxp3和細(xì)胞表面標(biāo)記物CD25 (IL-2Rα) (B，右)綜合措施。.CD3–細(xì)胞中有少量CD11c+ MHCII+群體可靠保障，它們是專業(yè)的抗原提呈樹(shù)突狀細(xì)胞(C基本情況，左)。脾臟樹(shù)突狀細(xì)胞可以進(jìn)一步分為CD11b+和CD8+樹(shù)突狀細(xì)胞亞群 (C高端化，右)力量，分別具有不同的抗原提呈特性。
 

圖2. 活細(xì)胞熒光蛋白檢測(cè)提單產。 采用CellLight®細(xì)胞核-GFP (貨號(hào)：C10602) 和CellLight®質(zhì)膜-RFP (貨號(hào)：C10608) 同時(shí)轉(zhuǎn)導(dǎo)U-2 OS細(xì)胞深入實施。采用Attune®NxT聲波聚焦流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞，儀器使用488 nm激光和530/30發(fā)射濾光片及561 nm激光和585/16 nm發(fā)射濾光片發展空間。

表1. Attune® NxT聲波聚焦流式細(xì)胞儀熒光基團(tuán)選擇指南效果。

*不包括適用于PE的黃色激光 (590/40)。
**可以任選各色激光進(jìn)行側(cè)向散射分析(默認(rèn)為藍(lán)色激光)足了準備。紫色激光側(cè)向散射推薦用于無(wú)洗脫/裂解應(yīng)用合作關系。

Attune®NxT聲波聚焦流式細(xì)胞儀可以在您需要時(shí)提供更高的靈敏度。即便是在1,000 μL/分鐘的高進(jìn)樣速率下深刻內涵，您也可以維持精確的聚焦傳遞。聲波聚焦提供的精確聚焦使研究人員能夠獲得更小的CV值，更好地鑒別模糊信號(hào)和背景深入闡釋，從而減少差異相關性，改善信號(hào)分離效果 (圖3)。
 

圖3. 不同流速下的靈敏度檢測(cè)物聯與互聯。在(A) 的傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀和(B和C) Attune®NxT聲波聚焦細(xì)胞分析儀上穩定，采用561 nm激光和(A) 610/20或(B和C) 610/15發(fā)射濾光片，運(yùn)行熒光微球 (Spherotech Rainbow校準(zhǔn)微粒供給，3.2 μm)優勢與挑戰。傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀是在的靈敏度設(shè)置下運(yùn)行 (~12.5 μL/分鐘)。Attune® NxT流式細(xì)胞儀采用了2種不同的設(shè)置運(yùn)行：(B) 12.5 μL/分鐘投入力度，與傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀相同創造，以及 (C) 500 μL/分鐘不難發現，進(jìn)樣量高40x貢獻法治。即便是在流速下，Attune® NxT流式細(xì)胞儀亦可提供相當(dāng)或更佳的結(jié)果發展需要。

細(xì)胞周期分析是必須精確檢測(cè)多個(gè)細(xì)胞群體之間的熒光強(qiáng)度差異的實(shí)例之一攻堅克難。采用Attune®NxT聲波聚焦流式細(xì)胞儀，不論樣本進(jìn)樣速率如何變化顯示，都可以地減小結(jié)果的差異流程。您無(wú)需再通過(guò)放棄通量而獲得靈敏度 (圖4)。

圖4. 采用Attune®NxT聲波聚焦流式細(xì)胞儀勃勃生機，可在高進(jìn)樣速率下地減小數(shù)據(jù)差異助力各業。 對(duì)Jurkat細(xì)胞進(jìn)行固定極致用戶體驗，RNA酶處理，并用碘化丙啶（PI）染色應用，制成濃度為1 x 106個(gè)細(xì)胞/mL的溶液建議，以不同的進(jìn)樣速率在Attune® NxT聲波聚焦流式細(xì)胞儀上進(jìn)行分析。所有圖上左側(cè)的峰反映G0/G1期的細(xì)胞相貫通，右側(cè)的峰反映G2/M期的細(xì)胞不斷發展。不論進(jìn)樣速率如何，Attune® NxT流式細(xì)胞儀上G0/G1和G2/M峰的寬度以及CV%都很穩(wěn)定自動化方案，即便是在1,000 μL/分鐘的進(jìn)樣速率下也是如此緊密協作。

少量細(xì)胞群體的分析需要多次采集才能獲得準(zhǔn)確且值得信賴的結(jié)果，這導(dǎo)致其采集時(shí)間較長(zhǎng)線上線下。Attune® NxT聲波聚焦流式細(xì)胞儀的樣本運(yùn)行速率比其他流式細(xì)胞儀快10倍——達(dá)1,000 μL/分鐘發揮重要作用，每次運(yùn)行能采集2 x 107次，可以快速且準(zhǔn)確地檢測(cè)稀有細(xì)胞過程中，且不影響數(shù)據(jù)質(zhì)量 (圖5)去突破。

圖5. >100萬(wàn)活細(xì)胞的采集和少量 (0.2%) 樹(shù)突狀細(xì)胞群的檢測(cè)。漿細(xì)胞樣樹(shù)突狀細(xì)胞 (pDCs) 是一種特殊的細(xì)胞群達到，它們?cè)诓《镜拇碳は驴僧a(chǎn)生大量的I型干擾素智能設備，可根據(jù)免疫表型CD19–/B220高/CD317+進(jìn)行鑒定。利用CD19-Pacific Blue™蓬勃發展、CD317-Alexa Fluor® 488特點、CD45R/B220-PE直標(biāo)抗體以及SYTOX® AADvanced™ 死細(xì)胞染料對(duì)小鼠脾細(xì)胞進(jìn)行四色染色。采用SYTOX®AADvanced™ 死細(xì)胞染料在活細(xì)胞中設(shè)門重要性，然后在CD19–細(xì)胞中設(shè)門又進了一步。采用CD45R/B220與CD317雙參數(shù)曲線鑒定pDC。利用500 μL/分鐘的采集速度多元化服務體系，獲得130萬(wàn)個(gè)總細(xì)胞規劃，細(xì)胞濃度為7.5 x 107個(gè)細(xì)胞/mL。漿細(xì)胞樣樹(shù)突狀細(xì)胞被鑒定為雙B220+/CD317+ (右上象限)深度，占CD19–活細(xì)胞的0.851%帶動擴大，全部脾細(xì)胞的0.194%。

洗脫并裂解紅細(xì)胞 (RBC) 會(huì)造成嚴(yán)重的細(xì)胞損失和損傷核心技術。的樣本采集速率使得Attune® NxT流式細(xì)胞儀能夠提供無(wú)需洗脫/裂解的實(shí)驗(yàn)方案，地避免了細(xì)胞損失主動性，簡(jiǎn)化了樣本制備 (圖6)創造性。該特性尤其適用于那些濃度較低的樣本，諸如腦脊液 (CSF)、干細(xì)胞及細(xì)胞數(shù)量較少的稀釋樣本規模設備，這些樣品分析的采集時(shí)間通常較長(zhǎng)真諦所在。采用Attune® NxT流式細(xì)胞儀，即便是稀釋樣本競爭力，亦可快速采集倍增效應，且不影響數(shù)據(jù)質(zhì)量⊙u造業？梢詫?duì)諸如小鼠血液和骨髓等難以采集的樣本優化服務策略、細(xì)針抽吸樣本或低細(xì)胞產(chǎn)量的樣本直接進(jìn)行熒光標(biāo)記然后稀釋進(jìn)樣，無(wú)需洗脫或進(jìn)行紅細(xì)胞裂解發展基礎。在高樣本采集速率下可輕松實(shí)現(xiàn)采集——您可在四分鐘內(nèi)運(yùn)行至多4 mL樣本兩個角度入手。這種樣本制備過(guò)程不會(huì)出現(xiàn)樣本損失，且可對(duì)所有珍貴樣本進(jìn)行全面檢測(cè)同期。



圖6. 無(wú)需樣本制備生產效率，且不影響數(shù)據(jù)質(zhì)量。采用抗體染色五微升全血效果，孵育使用，并使用4 mL緩沖液進(jìn)行稀釋，在Attune®NxT流式細(xì)胞儀上分析密度增加。紅細(xì)胞可以吸收405 nm光線有效性，可實(shí)現(xiàn)如中圖所示的側(cè)向散射的差異化設(shè)門，在該圖中機遇與挑戰，采用405 nm與488 nm側(cè)向散射雙參數(shù)曲線區(qū)分白細(xì)胞和紅細(xì)胞群體廣泛關註。在該群體中，可采用前向散射與側(cè)向散射子曲線圖鑒別淋巴細(xì)胞集成技術、單核細(xì)胞和粒細(xì)胞群體就能壓製，無(wú)需熒光標(biāo)示。

Attune®NxT軟件采用直觀且易于使用的界面適應能力，能提供強(qiáng)大的數(shù)據(jù)采集和分析功能 (圖7)更優美。您可以方便地建立、自定義并保存實(shí)驗(yàn)供將來(lái)研究之用解決方案。自動(dòng)進(jìn)行補(bǔ)償優勢，并可根據(jù)補(bǔ)償指南進(jìn)行設(shè)置。

分析軟件為數(shù)據(jù)分析大化設(shè)計(jì)幅度，其對(duì)較大的數(shù)據(jù)組的刷新速度快 (高達(dá)2,000萬(wàn)次/樣本)結構，當(dāng)您作出調(diào)整時(shí)重要的作用，能夠立即顯示于數(shù)據(jù)曲線上貢獻。軟件采用的工具簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)設(shè)置，包括利用濾光片配置管理器進(jìn)行試劑選擇。您可以從預(yù)置或定制試劑下拉菜單中選擇試劑統籌，根據(jù)儀器上的優(yōu)化通道匹配適當(dāng)?shù)脑噭┳钌詈竦牡讱?，然后?yīng)用于曲線標(biāo)志。

圖7. Attune® NxT軟件界面振奮起來。

Attune® 聲波聚焦細(xì)胞分析儀只能用于實(shí)驗(yàn)研究 不得用于人或動(dòng)物的治療或診斷用途。