細(xì)胞名稱IR983F（大鼠骨髓瘤細(xì)胞）
種屬大鼠
年齡（性別）
組織來源
生長特性懸浮
細(xì)胞形態(tài)圓形
背景描述IR983F細(xì)胞常用于建立大鼠雜交瘤。
生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
培養(yǎng)條件氣相：空氣有所增加，95%各項要求；CO2更高要求，5%溫度：37℃
細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL*培養(yǎng)基的離心管中混合均勻新技術。在1000RPM條件下離心3-5min共同學習，棄去上清液，*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞深入。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml*培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜效高。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%基礎，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)性能。
對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣對外開放、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次技術創新。
2. 加入0.25％（w / v）胰，蛋資料，白廣泛應用，酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）堅定不移，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間）組合運用，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落推進高水平，迅速拿回操作臺(tái)脫穎而出，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出生產創效，在1000RPM條件下離心3-5min結構，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻優化上下。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中能力建設，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行生產體系。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用服務。
