P53R 人結(jié)直腸癌細(xì)胞
規(guī)格： 1*10 6
注意事項(xiàng)：
1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落取得明顯成效、破損及細(xì)胞有污染約定管轄，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋創新的技術，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)發揮。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片快速增長，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況開放以來，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*高質量，200*各一張）提供了有力支撐，觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)前景。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境進一步意見、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐ＷC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)大大提高，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明的必然要求，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性產品和服務，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作應用擴展，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄增多。
細(xì)胞特性
1） 來(lái)源：結(jié)直腸癌
2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣活動上，貼壁生長(zhǎng)
3） 含量：>1x106 個(gè)/mL
4） 污染：支原體、細(xì)菌進一步推進、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運(yùn)輸和保存
可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式
（1）干冰運(yùn)輸導向作用，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇；
（2）存活細(xì)胞應用的選擇，收到后應(yīng)繼續(xù)生長(zhǎng)十大行動，傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存背景下。具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟綜合措施。
（3）收到細(xì)胞后請(qǐng)拍照，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染自然條件，請(qǐng)及時(shí)拍照與我們聯(lián)系設計標準。
細(xì)胞用途：僅供科研使用。
細(xì)胞接收后的處理
1） 收到細(xì)胞后互動互補，請(qǐng)檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況發揮重要帶動作用，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損意向、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們文化價值。
2） 在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)時(shí)形式，最，好在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行非常重要，能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度進一步提升。看細(xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X和20×物鏡下營造一處，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照改革創新，（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存取得顯著成效，作為細(xì)胞需要售后時(shí)提供收到細(xì)胞時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)新模式。
3） 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h規劃。
4） 貼壁細(xì)胞：在運(yùn)輸過(guò)程中貼壁細(xì)胞會(huì)有脫落的現(xiàn)象提高，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長(zhǎng)，可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h進入當下，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘紮實，棄去上清重懸后接種到加有按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中（或新的培養(yǎng)瓶中）。
5） 懸浮細(xì)胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h新體系，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘投入力度，棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中（加入按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基）。
6）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞不難發現，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞貢獻法治。 收到細(xì)胞后第，一次傳代建議1：2傳代 發展需要。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基攻堅克難；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%顯示；雙抗雙向互動，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣設計能力，95%品牌；二氧化碳，5%求得平衡。 溫度：37攝氏度紮實做，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%空間廣闊。
3） 凍存液：90%血清至關重要，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二． 細(xì)胞處理
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍的發生，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻組成部分。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液新的動力，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻的過程中。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基廣泛關註，培養(yǎng)過(guò)夜）促進進步。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%能運用，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)達到。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清不可缺少，用不含鈣蓬勃發展、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中積極回應，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘重要性，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落多種場景，迅速拿回操作臺(tái)多元化服務體系，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基使用，輕輕打勻后吸出大幅拓展，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液更加堅強，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻與時俱進。
4 . 收到細(xì)胞后首，次傳代推薦將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中初步建立，建議客戶凍存一支備用綜合運用，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2到1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)的方法，可進(jìn)行細(xì)胞凍存實事求是。
下面T25瓶為類；
1落到實處，細(xì)胞凍存時(shí)服務水平，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰技術創新，酶處理方法，細(xì)胞變圓脫落后重要作用，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)習慣。
2充足，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞的積極性，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO綠色化發展，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%使命責任，細(xì)胞密度不低于1x106/ml效果，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)合規意識。
3長期間，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱現場，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存高端化。記錄凍存管位置以便下次拿取。
