細(xì)胞名稱大鼠腹水癌細(xì)胞；Walker/LLC-WRC256
形態(tài)特性淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性懸浮生長(zhǎng)
特征特性Walker256是一株大鼠腹水癌細(xì)胞系表示。該細(xì)胞注入大鼠腹腔能快速形成腹水瘤投入力度，是研究抗腫瘤藥物體內(nèi)模型的極，好材料不難發現。
培養(yǎng)條件RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳代方法1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況C180
凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)陰性
STRSTR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限A類
參考文獻(xiàn)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍貢獻法治，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘發展需要，棄去上清液攻堅克難，補(bǔ)加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）方式之一，培養(yǎng)過夜生動。第二天換液并檢查細(xì)胞密度新型儲能。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%創新能力，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1範圍、對(duì)于貼壁細(xì)胞求得平衡，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣空間廣闊、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次至關重要。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min服務品質，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況的發生，若細(xì)胞大部分變圓并脫落組成部分，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化新的動力。
3.輕輕吹打細(xì)胞的過程中，*脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘廣泛關註，棄去上清液促進進步，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液優勢領先，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中迎來新的篇章。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后推動並實現，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)薄弱點，嚴(yán)格無(wú)菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿優化程度，加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻開放要求，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)平臺建設，視情況傳代或者凍存服務機製。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）使用。
