魚(yú)飼料中氨基酸的高效液相色譜（hplc）檢測(cè)方案
隨著我國(guó)飼料工業(yè)的發(fā)展穩步前行，魚(yú)粉的需要量逐年增加結構不合理，魚(yú)粉的質(zhì)量問(wèn)題越來(lái)越引起飼料行業(yè)、養(yǎng)殖業(yè)的重視各有優勢。魚(yú)粉是水產(chǎn)飼料的主要蛋白源效果較好，尤其含有動(dòng)物生長(zhǎng)所必需的氨基酸，由于魚(yú)粉用量大持續，價(jià)格高等多個領域，有些廠家摻雜使假、以次充好產品和服務，使魚(yú)粉質(zhì)量參差不齊應用擴展，這一行為業(yè)給魚(yú)粉品質(zhì)分析帶來(lái)了一定困難體驗區。因此，有必要建立一個(gè)有效的手段對(duì)魚(yú)粉中氨基酸進(jìn)行定量分析活動上。
隨著我國(guó)飼料工業(yè)的發(fā)展有望，魚(yú)粉的需要量逐年增加，魚(yú)粉的質(zhì)量問(wèn)題越來(lái)越引起飼料行業(yè)導向作用、養(yǎng)殖業(yè)的重視方案。魚(yú)粉是水產(chǎn)飼料的主要蛋白源，尤其含有動(dòng)物生長(zhǎng)所必需的氨基酸十大行動，由于魚(yú)粉用量大左右，價(jià)格高，有些廠家摻雜使假綜合措施、以次充好可靠保障，使魚(yú)粉質(zhì)量參差不齊，這一行為業(yè)給魚(yú)粉品質(zhì)分析帶來(lái)了一定困難建言直達。因此多種，有必要建立一個(gè)有效的手段對(duì)魚(yú)粉中氨基酸進(jìn)行定量分析。
以下是譜祥利用LC高效液相色譜儀對(duì)魚(yú)粉進(jìn)行的HPLC檢測(cè)方案充分發揮。
1發展成就、儀器與試劑
1.1儀器、設(shè)備
高效液相色譜儀
SMA 色譜柱AA：250mm×4.6mm×5μm
分析天平
恒溫箱重要方式，溫度控制在110±1℃
微量進(jìn)樣器開展面對面，（20μL）一支
漩渦混勻器
氮吹儀
針頭過(guò)濾器
微孔濾膜：0.45µm
1.2試劑
鹽酸溶液，6mol/L:將優(yōu)級(jí)純鹽酸與水按1:1(V/V)混合非常重要。
氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進一步提升。
乙腈，色譜純認為。
三水合醋酸鈉系統，優(yōu)級(jí)純。
冰醋酸重要意義。
正己烷交流等，色譜純。
2規劃、供試品溶液和對(duì)照品溶液的制備
對(duì)照品溶液的制備 取氨基酸混合工作標(biāo)液500ul提高，用水稀釋至5ml，即得進入當下。
供試品溶液的制備 稱(chēng)取試樣50-100mg（準(zhǔn)確至0.1mg）于據(jù)塞試管中紮實，加入6.0mol/l鹽酸10ml，混勻，充分提取10min投入力度，蓋緊蓋子創造。將樣品置于110℃恒溫干燥箱中，水解22-24h法治力量。冷卻后充分混勻全技術方案，過(guò)濾。根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求移取適量上清液共享，60℃下氮?dú)獯蹈桑瑐溆梅绞街?。以下按照衍生方法包進(jìn)行生動。
方法包衍生方法：將恒溫水浴鍋預(yù)熱至50±1℃，分別將A創新能力、B兩種衍生試劑用稀釋至原來(lái)濃度的1/5倍新品技。精密量取上述對(duì)照品1ml，至于試管中求得平衡，加入稀釋后的A溶液0.5ml和稀釋后的B溶液0.5ml紮實做，搖勻；在50±1℃的水浴中加熱45分鐘至關重要，取出提供深度撮合服務，加入正己烷溶液1ml，振搖的發生；并用孔徑為0.45μm有機(jī)膜過(guò)濾組成部分，放置30min后，取澄清的下層液進(jìn)行分析實(shí)驗(yàn)重要手段。供試品的衍生步驟與對(duì)照品相同互動講。
3、色譜條件
色譜柱：AA 4. 6 mmx250 mm像一棵樹，粒度5 µm
流動(dòng)相：
流動(dòng)相A：0.1mol/L醋酸鈉溶液（pH6.5）：乙腈=93:7
配置方法：準(zhǔn)確稱(chēng)取三水合醋酸鈉13.6g于1000ml水中過程中，攪拌均勻，溶解能運用，用冰醋酸或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至6.5達到； 準(zhǔn)確量取配制好的三水合醋酸鈉溶液465ml和乙腈35ml，混合均與工具，抽濾智慧與合力，過(guò)0.45μm濾膜。
流動(dòng)相B：水：乙腈=20:80重要的角色。
配制方法：準(zhǔn)確量取水100ml和乙腈400ml開放要求，混合均勻，抽濾，過(guò)0.45μm濾膜服務機製。
波長(zhǎng)：254nm
流速：1. 0 mL/min
梯度設(shè)置：
T（min） | A% | B% |
0.01 | 100.0 | 0.0 |
11 | 93.0 | 7.0 |
13.9 | 88.0 | 12.0 |
14 | 85.0 | 15.0 |
29 | 66.0 | 34.0 |
32 | 30.0 | 70.0 |
35 | 0.0 | 100.0 |
42 | 0.0 | 100.0 |
45 | 100.0 | 0.0 |
60 | 100.0 | 0.0 |
4貢獻力量、測(cè)定法
分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20ul，注入液相色譜儀大幅拓展，測(cè)定發行速度，即得
如果需要技術(shù)咨詢(xún)，請(qǐng)： 劉工
