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氧化磷酸化系列/轉(zhuǎn)氫酶-1測試盒(微量法)

產(chǎn)品規(guī)格 : 100管/96樣

測試方法：微量法

產(chǎn)品分類：氧化磷酸化系列

產(chǎn)品品牌：mlBio/酶聯(lián)生物

產(chǎn)品包裝：液體盒裝

運(yùn)輸條件：快遞包郵

應(yīng)用范圍：僅供科研研究使用

保存條件：低溫避光保存

有效期：６個月

說明書 : 咨詢或電詢客服索取

供應(yīng)商：上海酶聯(lián)生物科技有限公司

注    意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

氧化磷酸化系列/轉(zhuǎn)氫酶-1測試盒(微量法)

測定意義：
TH位于線粒體的內(nèi)膜上研究成果，又稱為呼吸電子傳遞鏈復(fù)合體六取得了一定進展，催化NADH+NADP+和 NAD++NADPH相互轉(zhuǎn)化。催化正向反應(yīng)稱為TH-1體驗區。線粒體NADH含量增加時會導(dǎo)致線粒體膜的H+電化學(xué)梯度升高增多，因而促進(jìn)了電子傳遞鏈上ROS的產(chǎn)生。TH-1促進(jìn)NADH轉(zhuǎn)換為NADPH有望，從而提高線粒體的抗氧化能力進一步推進。
測定原理：
NADH和NADPH均在340nm有特征吸收，因此TH催化的轉(zhuǎn)氫反應(yīng)不能導(dǎo)致340nm吸光度發(fā)生變化標準。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸磷酸（APADP+）替代NADP+，TH-1催化 APADP+還原生成的APADPH在375nm有特征光吸收堅持好，因此通過測定375nm光吸收增加速率即將展開，來計算TH-1活性。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀特性、臺式離心機(jī)傳承、水浴鍋、可調(diào)式移液器建言直達、微量石英比色皿/96孔板多種、研缽、冰和蒸餾水充分發揮。
樣本的前處理：
組織發展成就、細(xì)菌或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離：
①準(zhǔn)確稱取0.1g組織或收集500萬細(xì)胞，加入1mL試劑一重要方式，用冰浴勻漿器或研缽勻漿開展面對面。
②將勻漿600g系統，4℃離心5min。
③棄沉淀進一步提升，將上清液移至另一離心管中空間廣闊，11100g，4℃離心10min改革創新。
④上清液即為除去線粒體的胞漿蛋白知識和技能，可用于測定從線粒體泄漏的TH-1（此步可選做）。
⑤步驟④中的沉淀即為線粒體新模式，加入500uL試劑二實現，超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W講理論，超聲3s方便，間隔10秒，重復(fù)30次）各領域，用于TH-1活性測定應用領域。