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氧化磷酸化系列/三磷酸腺苷測試盒/微量法
產(chǎn)品規(guī)格 :100管/48樣
測試方法:微量法
產(chǎn)品分類:氧化磷酸化系列
產(chǎn)品品牌:mlBio/酶聯(lián)生物
產(chǎn)品包裝:液體盒裝
運輸條件:快遞包郵
應用范圍:僅供科研研究使用
保存條件:低溫避光保存
有效期:6個月
說明書 : 咨詢或電詢客服索取
供應商:上海酶聯(lián)生物科技有限公司
注 意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定提供了遵循。
氧化磷酸化系列/三磷酸腺苷測試盒/微量法
測定意義:
線粒體復合體Ⅴ又稱F1F0-ATP合酶,廣泛存在于動物發展、植物保持穩定、微生物和培養(yǎng)細胞的線粒體中,由F1和F0兩個亞單位組成面向。該酶利用呼吸鏈產(chǎn)生的質子電化學梯度催化ATP合成支撐作用,也可逆過程水解ATP。此外建設項目,復合體Ⅴ還存在于葉綠體最為突出、異養(yǎng)菌和光合細菌中。復合體Ⅴ是線粒體氧化磷酸化和葉綠體光合磷酸化合成ATP的關鍵酶相結合。
測定原理:
復合體Ⅴ水解ATP產(chǎn)生ADP和Pi高效化,通過測定Pi增加速率來測定復合體Ⅴ活性。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀為產業發展、臺式離心機範圍和領域、水浴鍋、可調式移液器服務好、微量石英比色皿/96孔板新趨勢、研缽、冰和蒸餾水。
樣本的前處理:
組織學習、細菌或細胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:
①準確稱取0.1g組織或收集500萬細胞結構重塑,加入1mL試劑一和10uL 試劑三,用冰浴勻漿器或研缽勻漿應用優勢。
②將勻漿600g高質量發展,4℃離心5min。
③棄沉淀高效節能,將上清液移至另一離心管中影響力範圍,11000g,4℃離心10min新創新即將到來。
④上清液即為除去線粒體的胞漿蛋白邁出了重要的一步,可用于測定從線粒體泄漏的復合體Ⅴ(此步可選做)。
⑤步驟④中的沉淀即為線粒體重要工具,加入800uL試劑二和8uL 試劑三積極拓展新的領域,超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W更優質,超聲3s相對開放,間隔10秒,重復30次)脫穎而出,用于復合體Ⅴ酶活性測定拓展應用。