ELISA檢測實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)的原理
ELISA檢測實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性領域,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性溝通機製,又保留酶的活性。
進(jìn)行檢測時(shí)註入新的動力,樣品中的受檢物質(zhì)(抗原或抗體)與固定的抗體或抗原結(jié)合領先水平。通過洗板除去非結(jié)合物,再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體雙重提升,此時(shí)設計能力,能固定下來的酶量與樣品中被檢物質(zhì)的量相關(guān)。通過加入與酶反應(yīng)的底物后顯色深入開展,根據(jù)顏色的深淺可以判斷樣品中物質(zhì)的含量更為一致,進(jìn)行定性或定量的分析。
由于酶的催化效率很高技術的開發,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果研究與應用,使測定方法達(dá)到很高的靈敏度。
ELISA檢測實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)的基本類型
ELISA可用于測定抗原更高效,也可用于測定抗體全面協議。這種測定方法中有3種必要的試劑:
1. 固相的抗原或抗體;
2. 酶標(biāo)記的抗原或抗體具體而言;
3. 酶作用的底物工具。
根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀及檢測的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法喜愛。
1. 雙抗體夾心法測抗原
針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體重要的角色。適用于測定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原,不適用于測定半抗原及小分子單價(jià)抗原向好態勢,因其不能形成兩位點(diǎn)夾心平臺建設。
2. 競爭法測抗原
首先將特異性抗體包被于固相載體表面,經(jīng)洗滌后分成兩組:一組加酶標(biāo)記抗原和被測抗原的混合液共創美好,另一組只加酶標(biāo)記抗原推動並實現,經(jīng)孵育洗滌后加底物顯色薄弱點,這兩組底物降解量之差,即為所要測定的未知抗原的量優化程度。此方法測定的抗原只要有一個結(jié)合部位即可積極性,對小分子抗原如激素和藥物類的測定常用此法。優(yōu)點(diǎn)是快不斷豐富,缺點(diǎn)是需要較多量的酶標(biāo)記抗原實施體系。
3. 免疫抑制法測抗原
被檢標(biāo)本對底物顯色的抑制程度與標(biāo)本中所含抗原的量成正比,二者之差即為預(yù)測抗原的量各有優勢。
4. 間接法測抗體
是檢測抗體zui常用的方法效果較好,原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體。
本法只要更換不同的固相抗原持續,可以用一種酶標(biāo)抗體檢測各種與抗原相應(yīng)的抗體等多個領域。主要用于對病原體的檢測而進(jìn)行傳染病的診斷。