5.2.6 豬丹毒疫苗凍干
豬丹毒疫苗主要用于生豬生產(chǎn)中防疫力度。早在20世紀(jì)50年代明確了方向,就有獸醫(yī)藥企業(yè)對(duì)豬丹毒疫苗的凍干進(jìn)行了生產(chǎn)試驗(yàn),給出了凍干工藝勇探新路。之后又不斷對(duì)豬丹毒疫苗的凍干工藝進(jìn)行改進(jìn)單產提升。南京獸醫(yī)生物藥品廠在70年代給出的凍干工藝為:-35℃開(kāi)始升華,1.5h升至35℃保持14.5h試驗,20mL瓶裝7.5mL勞動精神,干后菌存活率高達(dá)89.8%。制品共融點(diǎn)在-12℃左右製度保障,升華干燥7h后結(jié)束預下達,疫苗溫度約-12℃。苗內(nèi)大部分水分在-10℃以下排除統籌推進。14h后苗溫和箱溫接近一致方案,凍干曲線如圖5-5所示。升華干燥期間了解情況,苗溫與箱溫有很大溫差(約55℃)深入,是制品在低溫升華過(guò)程中排除大量的汽化熱所致。解析干燥期間重要的,供熱主要用于排除菌苗中所含的少量水分深刻變革,這一階段供應(yīng)相當(dāng)多的熱量結論,僅能排除有限的水分,是因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)水分比細(xì)胞間的水分較難排除質生產力。研究表明適應性強,供熱速度和溫度的適應(yīng)比裝量多少、升華時(shí)間的長(zhǎng)短具有更重要的意義先進的解決方案。
5.2.7 貓泛白細(xì)胞減少癥疫苗和“犬四聯(lián)"弱毒疫苗凍干
貓泛白細(xì)胞減少癥是貓細(xì)小病毒引起的貓的一種急性拓展、致死性傳染病,乳發(fā)病貓死亡率最高宣講活動,目前尚無(wú)治療藥物不斷進步,需靠疫苗預(yù)防。李六金等研究了凍干貓泛白細(xì)胞減少癥弱毒疫苗的凍干工藝效率。將疫苗按表5-9配方配制生產效率,經(jīng)100℃恒溫處理10min, 冷卻到4~8℃,分裝1mL/瓶適應性,然后進(jìn)行凍干節點。凍干工藝如圖5-6所示。
通過(guò)上述工藝制備的貓泛白細(xì)胞減少癥弱毒疫苗產(chǎn)品落地生根,為乳白色海綿狀疏松團(tuán)塊的特點,易于脫壁,殘余含水量為3.0%~3.2%有效保障。加稀釋液后迅速溶解大數據,溶解后呈淡粉紅色液體。經(jīng)檢測(cè)對(duì)比講實踐,凍干前后配苗毒液效價(jià)大致相同數字技術。肌肉注射給小白鼠和幼貓進(jìn)行安全檢驗(yàn),結(jié)果被試動(dòng)物全部鍵活市場開拓。
凍干技術(shù)也可以用作混合疫苗的制備措施。李六金等還研究了“犬四聯(lián)"弱毒疫苗的凍干。犬四聯(lián)疫苗的配制按表5-10配方完成各項要求。
毒液配制好后更高要求,與穩(wěn)定劑按1:1比例混合并分裝成2mL/瓶。分裝后的疫苗在LGJ型醫(yī)用冷凍干燥機(jī)中凍干新技術。
產(chǎn)品進(jìn)箱后讓凍干箱降溫慢凍共同學習。預(yù)凍的溫度-40℃,到達(dá)預(yù)定的-40℃后再保持1.5h深入。預(yù)凍結(jié)束減壓效高,并在30min左右使真空度達(dá)到l0Pa,直至凍干結(jié)束為止基礎。當(dāng)真空度達(dá)到10Pa之后開(kāi)始加熱性能《喾N方式?偟膬龈蓵r(shí)間為20h。凍干曲線見(jiàn)圖5-7技術創新。
凍干后的犬四聯(lián)疫苗產(chǎn)品呈微黃白色海綿狀疏松團(tuán)塊深入交流研討,易與瓶壁脫離。加稀釋液后迅速溶解成粉紅色澄清液體廣泛應用。經(jīng)檢測(cè)關註度,凍干后疫苗效價(jià)滴度比凍干前降低約0.5~1.0個(gè)滴度,屬于正常范圍去完善。
5.2.8 甲型肝炎減毒活疫苗凍干
液體劑型的甲型肝炎減毒活疫苗在市場(chǎng)上已經(jīng)應(yīng)用多年橋梁作用,并取得了較好的免疫保護(hù)效果,但疫苗需低溫凍結(jié)保存求索,冷鏈運(yùn)輸讓人糾結。凍干的甲肝減毒疫苗,可方便于儲(chǔ)運(yùn)和使用穩定發展。李光譜等研究了甲型肝炎減毒活疫苗的凍干基石之一。甲型肝炎病毒L-A-1株第23代,在人胚肺二倍體細(xì)胞ZBS株上大量培養(yǎng)后能力建設,分別制成純化苗(經(jīng)凍融模樣、高速離心生產體系、PEG6000濃縮服務、氯仿抽提、Sephacryl S-400柱色譜等提純能力和水平,PBS緩沖液稀釋?zhuān)舆m宜保護(hù)劑制成凍干疫苗)和未純化苗(經(jīng)凍融覆蓋、超聲、過(guò)濾等研究,加適宜保護(hù)劑制成凍干疫苗)高效。疫苗在ALPHA1-6凍干機(jī)中凍干。-50℃預(yù)凍提高,-50~30℃抽真空干燥6h機構,-30~-20℃抽真空干燥9h,-20~-5℃抽真空干燥5h交流,-5~28℃抽真空干燥10h基礎。
甲型肝炎病毒屬小RNA病毒,無(wú)脂蛋白包膜還不大,一般不耐受冷凍干燥高產,解決無(wú)脂蛋白病毒冷凍干燥的問(wèn)題需加入凍干保護(hù)劑。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看出發揮作用,不同保護(hù)劑配方對(duì)凍干甲型肝炎減毒活疫苗凍干前后的病毒滴度影響較大良好,以蔗糖逐步顯現、脂肪酸鹽(2%蔗糖、1%脂肪酸鹽)配方為主的保護(hù)劑引領,保護(hù)效果好自動化裝置,凍干前后疫苗病毒滴度下降均在1.0以內(nèi),放置37℃ 1周下降0.5以內(nèi)占,符合規(guī)程要求穩步前行。
未純化疫苗中可能含有各種破壞性的酶(蛋白酶、脂肪酶等)動手能力,凍干后37℃放置1周可能有一部分酶被激活逐步改善,對(duì)病毒外殼結(jié)構(gòu)和核酸RNA有破壞作用,純化后無(wú)酶的影響提升,熱穩(wěn)定性較好大大提高。
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