突變泰勒蟲PCR試劑盒反應的特異性決定因素:
1.引物與模板DNA特異正確的結合開放以來。
2.堿基配對原則。
3. Tag DNA聚合酶合成反應的忠實性。
4.靶基因的特異性與保守性範圍。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的紮實做。聚合酶合成反應的忠實性及 Tag DNA聚合醇耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大増加加,被擴増的靶基因片段也就能保持很高的正確度空間廣闊。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式増加的,能將皮克(pg=10-129)量級的起始待測模板擴増到微克(ug=10-69)水平提供深度撮合服務。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zu小檢出率為3個細菌服務品質。
(3)簡便、快速
PCR反應用耐高溫的 Tag DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴増液和水浴鍋上進行變性退火-延伸反應,一般在2-4小時完成擴増反應組成部分。擴増產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染表現明顯更佳、易推廣。
(4)對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA粗制品及總RNA均可作為擴増模板技術節能≈笇?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液國際要求、洗嗽液流動性、毛發(fā)、細胞競爭激烈、活PCR技術概論持續創新。