關(guān)于大鼠ELISA試劑盒HIV測定過程
 

　　1 配液：ELISA試劑盒將50ml濃縮洗刷液用蒸餾水或去離子水20倍稀釋至1000ml備用十分落實。
 

　　2 編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號穩中求進，每板設(shè)陰性對照3孔機製性梗阻、陽性對照Ⅰ型自主研發、Ⅱ型各1孔確定性，空白對照1孔。
 

　　3 加樣：分別在相應(yīng)孔加入待檢標(biāo)本損耗、陰性講故事、陽性對照100μl，用封板膜封板后置37℃溫育30min性能穩定。
 

　　4 洗刷：當(dāng)心把封板膜揭去全面革新，用洗板機(jī)挑選5次程序作用，洗板后拍干。
 

　　5 加酶：每孔加酶結(jié)合物100μl(空白對照孔除外)行業分類，充沛混勻技術特點，用封板膜封板后置37℃溫育30min。
 

　　6 洗刷：當(dāng)心把封板膜揭去發展邏輯，用洗板機(jī)挑選5次程序高質量，洗板后拍干。
 

　　7 顯色：每孔加入顯色劑A液和B液各50μl記得牢，悄悄振動混勻，封板后置37℃避光顯色15min重要的作用。
 

　　8 測定：每孔加終止液50μl更多可能性，悄悄振動混勻。設(shè)定酶標(biāo)儀波長為450nm(建議使用雙波長的酶標(biāo)儀比色足夠的實力，參閱波長630 nm)緊迫性，空白調(diào)零，讀取各孔OD值更適合。
 

　　9 判斷成果：核算臨界值(cut-off)(CO)值高效。 臨界值=陰性對照A均值+0.12 正常情況下，陰性對照孔的OD值≤0.10(若1孔陰性對照的OD值>0.1應(yīng)放棄要素配置改革，若有2孔或2孔以上陰性對照的OD值>0.1全方位，應(yīng)重復(fù)實驗。)影響力範圍。樣品OD值<臨界值者為HIV抗體陰性大局。
 

　　正常情況下，陽性對照孔的OD值≥0.80(若1孔陽性對照的OD值<0.8應(yīng)放棄邁出了重要的一步，若有2孔或2孔以上陽性對照的OD值<0.8有序推進，應(yīng)重復(fù)實驗。樣品OD值≥臨界值者為HIV抗體陽性需求。
 

　　ELISA試劑盒注意：關(guān)于篩查陽性標(biāo)本堅定不移，應(yīng)從頭取樣雙孔復(fù)試，復(fù)試陽性者應(yīng)按照《全國*管理規(guī)范》送HIV確證實驗室進(jìn)行確證實驗更讓我明白了。 質(zhì)量操控： 每塊板設(shè)陰陽性及空白對照迎難而上，并于每次實驗用克己質(zhì)控血清作質(zhì)控，將質(zhì)控血清孔OD值采用“即刻法"核算或標(biāo)在質(zhì)控圖上充分，如質(zhì)控有效進一步完善，標(biāo)明實驗牢靠；如失控競爭力，則要查看試劑效期調整推進、貯藏溫度、試 驗溫度是否正常、操作過程是否正確機製，直至從頭實驗使其在控全過程。