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現(xiàn)貨人髓鞘堿性蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒蘇州
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    2014年11月05日
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人髓鞘堿性蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒
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上海銳聰實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有限公司
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資料簡(jiǎn)介

人髓鞘堿性蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒蘇州
 本試劑僅供研究使用  標(biāo)本:腦脊液

試驗(yàn)原理:
 MBP試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知MBP濃度的標(biāo)準(zhǔn)品行業分類、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將MBP和*標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育提高鍛煉。洗滌后發展邏輯,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌有所提升,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物聽得進,然后加入底物A、B先進水平,和酶結(jié)合物同時(shí)作用便利性。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中MBP的濃度呈比例關(guān)系足夠的實力。
 
人髓鞘堿性蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒蘇州
試劑盒內(nèi)容及其配制
試劑盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
96/48人份酶標(biāo)板 1塊板(96T) 半塊板(48T) 即用型
塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型
標(biāo)準(zhǔn)品:80ng/ml 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按說(shuō)明書進(jìn)行稀稀
人髓鞘堿性蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒蘇州
空白對(duì)照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型
*標(biāo)記的抗MBP抗體 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
親和鏈酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型
洗滌緩沖液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按說(shuō)明書進(jìn)行稀釋
底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
終止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
標(biāo)本稀釋液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型

自備材料
蒸餾水緊迫性。
加樣器:5ul、10ul更適合、50ul、100ul溝通協調、200要素配置改革、500ul、1000ul保障性。
振蕩器及磁力攪拌器等帶動產業發展。

安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B新創新即將到來。一旦接觸到這些液體邁出了重要的一步,請(qǐng)盡快用水沖洗。
實(shí)驗(yàn)中不要吃喝設施、抽煙或使用化妝品需求。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項(xiàng)
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存組合運用,使用前恢復(fù)到室溫更讓我明白了。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存積極。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中探索,密封保存,以免變質(zhì)產業。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好滿意度。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用可持續。
使用一次性的吸頭以免交叉污染主要抓手,吸取終止液和底物A體製、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器集成應用。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液探討。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干高效流通,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水調解製度。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子功能。底物B對(duì)光敏感應用的因素之一,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸預期,有毒敢於監督。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致結構,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣重要的作用。
按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作規模最大。

樣品收集力度、處理及保存方法
血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管系統性。收集血液后勇探新路,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA傳遞、檸檬酸鹽試驗、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒開展攻關合作。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物製度保障。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘自行開發,取上清液
保存------如果樣品不立即使用進行部署,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍應用情況。盡可能的不要使用溶血或高血脂血保護好。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾表現。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍特點。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準(zhǔn)備
標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備結論,不能儲(chǔ)存和諧共生。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻質生產力。稀釋比例按下表中進(jìn)行:
80 ng/ml (6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
40 ng/ml (5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
20 ng/ml (4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10 ng/ml (3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
5.0 ng/ml (2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.5 ng/ml (1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0 ng/ml (空白對(duì)照) 原始濃度不用稀釋直接加入50ul技術交流。

洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋先進的解決方案。


操作步驟
使用前,將所有試劑充分混勻創造更多。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫宣講活動,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差工藝技術。
根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)效率。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定近年來,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔講道理。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔通過活化、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)落地生根。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板健康發展,輕輕振蕩混勻建設項目,37℃溫育1小時(shí)。
甩去孔內(nèi)液體落實落細,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒高效化,甩去洗滌液製高點項目,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次範圍和領域。如果用洗板機(jī)洗滌有所增加,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP更高要求,輕輕振蕩混勻越來越重要的位置,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體共同學習,每孔加滿洗滌液順滑地配合,振蕩30秒,甩去洗滌液效高,用吸水紙拍干前沿技術。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌性能,洗滌次數(shù)增加一次多種方式。
每孔加入底物A對外開放、B各50ul,輕輕振蕩混勻深入交流研討,37℃溫育10分鐘資料。避免光照。
取出酶標(biāo)板關註度,迅速加入50ul終止液橫向協同,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值更讓我明白了。

建議使用的實(shí)驗(yàn)方案
 標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ng/ml) 
A 80 80 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
B 40 40 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
C 20 20 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
D 10 10 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
E 5.0 5.0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
F 2.5 2.5 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
G 0 0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
H 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品

局限
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的迎難而上,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到的結(jié)果。

試劑盒性能
 1. 靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品拓展應用。稀釋度的線性生產創效。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)管理。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)優化上下、板間變異系數(shù)均小于10%。

結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1模樣、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2生產體系、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的MBP標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X)很重要,做得相應(yīng)的曲線能力和水平,樣品的MBP含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出濃度。

3異常狀況、檢測(cè)值范圍:0-80ng/ml

4研究、敏感度: 0.1 ng/ml 吡哆醛/吡哆醇*6激酶 PDXKELISA試劑盒
 二氫嘧啶酶樣2 DPYSL2ELISA試劑盒
 血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2 GSK2ELISA試劑盒
 絲裂原活化蛋白激酶激酶6 MKK6ELISA試劑盒
 吡哆醛/吡哆醇*6磷酸酶 PDXPELISA試劑盒
 T細(xì)胞特異性鳥苷三磷酸酶 TgtpELISA試劑盒
 法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1 FDFT1ELISA試劑盒
 D-乳酸脫氫酶 D-LDH ELISA試劑盒
 α1抗* α1-AISA試劑盒
 *1 KLK 1ELISA試劑盒
 磷酸化乙酰* PaCoAELISA試劑盒
 磷酸甘油酸變位酶2 PGAM2ELISA試劑盒
 前列腺素D合成酶 PTGDSELISA試劑盒
 肽酰脯氨酰異構(gòu)酶 親環(huán)蛋白樣1
 肽酰脯氨酰異構(gòu)酶 親環(huán)蛋白樣1
 

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