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jpg資料簡介
人 IV型膠原(CoIV) ELISA 檢測試劑盒泰州
本試劑僅供研究使用 標本:尿
試驗原理:
CoIV試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知CoIV濃度的標準品集中展示、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測實力增強。先將CoIV和*標記的抗體同時溫育。洗滌后探索創新,加入親和素標記過的HRP帶來全新智能。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物新產品,然后加入底物A去完善、B,和酶結(jié)合物同時作用長遠所需。產(chǎn)生顏色求索。顏色的深淺和樣品中CoIV的濃度呈比例關(guān)系。
人 IV型膠原(CoIV) ELISA 檢測試劑盒泰州
試劑盒內(nèi)容及其配制
試劑盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
96/48人份酶標板 1塊板(96T) 半塊板(48T) 即用型
塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型
標準品:800ng/ml 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按說明書進行稀稀
空白對照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
標準品稀釋緩沖液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型
人 IV型膠原(CoIV) ELISA 檢測試劑盒泰州
*標記的抗CoIV抗體 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
親和鏈酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型
洗滌緩沖液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按說明書進行稀釋
底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
終止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
標本稀釋液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型
自備材料
蒸餾水。
加樣器:5ul結構、10ul管理、50ul、100ul能力建設、200模樣、500ul、1000ul服務。
振蕩器及磁力攪拌器等很重要。
安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B覆蓋。一旦接觸到這些液體廣泛認同,請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝流動性、抽煙或使用化妝品鍛造。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項
試劑應(yīng)按標簽說明書儲存持續創新,使用前恢復(fù)到室溫改善。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存協調機製。
實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中信息化,密封保存,以免變質(zhì)實踐者。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好取得明顯成效。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用數據。
使用一次性的吸頭以免交叉污染創新的技術,吸取終止液和底物A、B液時顯著,避免使用帶金屬部分的加樣器就此掀開。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品今年。
洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干穩步前行,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā)動手能力,避免長時間打開蓋子逐步改善。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下提升。避免用手接觸大大提高,有毒的必然要求。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致取得了一定進展,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣完善好。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作積極參與。
樣品收集問題分析、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管進一步推進。收集血液后導向作用,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA應用的選擇、檸檬酸鹽十大行動、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒背景下。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物綜合措施。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘自然條件,取上清液
保存------如果樣品不立即使用設計標準,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍將進一步。盡可能的不要使用溶血或高血脂血充分發揮。如果血清中大量顆粒發展成就,檢測前先離心或過濾成就。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍開展面對面。
試劑的準備
標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備系統,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻進一步提升。稀釋比例按下表中進行:
800 ng/ml (6號標準品) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul空間廣闊。
400 ng/ml (5號標準品) 100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液
200 ng/ml (4號標準品) 100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液
100 ng/ml (3號標準品) 100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液
50 ng/ml (2號標準品) 100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液
25 ng/ml (1號標準品) 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液
0 ng/ml (空白對照) 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。
洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋改革創新。
操作步驟
使用前知識和技能,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫新模式,以免加樣時加入大量的氣泡實現,產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)組織了。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔服務體系。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定說服力,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)分析。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔表示、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標記的抗體創造。蓋上膜板不難發現,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時全技術方案。
甩去孔內(nèi)液體分享,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒信息化,甩去洗滌液方式之一,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次新型儲能。如果用洗板機洗滌創新能力,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP範圍,輕輕振蕩混勻求得平衡,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體空間廣闊,每孔加滿洗滌液至關重要,振蕩30秒,甩去洗滌液服務品質,用吸水紙拍干的發生。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌影響,洗滌次數(shù)增加一次新的動力。
每孔加入底物A、B各50ul發展契機,輕輕振蕩混勻廣泛關註,37℃溫育10分鐘。避免光照發力。
取出酶標板優勢領先,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果共創美好。
在450nm波長處測定各孔的OD值推動並實現。
建議使用的實驗方案
標準品濃度(ng/ml)
A 800 800 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
B 400 400 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
C 200 200 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
D 100 100 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
E 50 50 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
F 25 25 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
G 0 0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
H 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
局限
6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果協調機製。
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品信息化。稀釋度的線性開放要求。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)平臺建設。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)服務機製、板間變異系數(shù)均小于10%。
結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1使用、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2大幅拓展、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的CoIV標準品濃度為橫坐標(X)更加堅強,做得相應(yīng)的曲線與時俱進,樣品的CoIV含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。
3初步建立、檢測值范圍:0-800ng/ml
4綜合運用、敏感度: 1.0 ng/ml 硫酸肝素糖蛋白 HSPGELISA試劑盒
冷球蛋白 CGELISA試劑盒
紅細胞膜蛋白 EMPELISA試劑盒
高鐵血紅蛋白 MHBELISA試劑盒
低分子肝素 LMWHELISA試劑盒
補體3裂解產(chǎn)物 C3SPELISA試劑盒
補體片段3b受體 C3bRELISA試劑盒
補體1抑制物抗體 C1INHELISA試劑盒
B因子 BFELISA試劑盒
類白細胞抗原G HLA-GELISA試劑盒
補體片斷3b C3bELISA試劑盒
補體片斷4b C4bELISA試劑盒
補體片斷5b C5bELISA試劑盒
免疫球蛋白重鏈 IgHELISA試劑盒
免疫球蛋白重鏈可變區(qū) IgHVELISA試劑盒
多免疫球蛋白受體 poly-IgRELISA試劑盒
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