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資料簡介
蝦補體4(C4)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
本試劑盒僅供研究使用前景。
檢測范圍:96T
0.2μg/ml -8μg/ml
使用目的:
本試劑盒用于測定蝦血清進一步意見、血漿及相關(guān)液體樣本中補體4(C4)含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中蝦補體4(C4)水平共享應用。用純化的蝦補體4(C4)抗體包被微孔板生產能力,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入補體4(C4)示範推廣,再與HRP標(biāo)記的補體4(C4)抗體結(jié)合處理方法,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色持續向好。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色習慣,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的補體4(C4)呈正相關(guān)進展情況。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)的積極性,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中蝦補體4(C4)濃度。
試劑盒組成
標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進行提取至關重要,提取按相關(guān)文獻進行不久前,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗提升行動,可將標(biāo)本放于-20℃保存能力建設,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性研究進展。
蝦補體4(C4)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑無障礙,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔互動互補、待測樣品孔發揮重要帶動作用。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl意料之外,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)文化價值。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁置之不顧,輕輕晃動混勻不斷完善。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜方便,棄去液體基礎上,甩干,每孔加滿洗滌液應用領域,靜置30秒后棄去保持競爭優勢,如此重復(fù)5次,拍干發展機遇。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl長效機製,空白孔除外。
7.溫育:操作同3全技術方案。
8.洗滌:操作同5改造層面。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl優勢與挑戰,輕輕震蕩混勻經驗分享,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)趨勢。
11.測定:以空白空調(diào)零有力扭轉,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行設備製造。
蝦補體4(C4)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作程序總結(jié):
計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)發展需要,OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線管理,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度顯示;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式效率和安,將樣品的OD值代入方程式設計能力,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù)深入開展,即為樣品的實際濃度更為一致。
蝦補體4(C4)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完技術的開發,板條應(yīng)裝入密封袋中保存研究與應用。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出飛躍,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果全面協議。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器重要部署,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差工具。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)智慧與合力,如標(biāo)本數(shù)量多,*使用排槍加樣重要的角色。
4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線做復(fù)孔開放要求。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定平臺建設,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)服務機製。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染不可缺少。
6.底物請避光保存蓬勃發展。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品積極回應,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理重要性。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
蝦補體4(C4)酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃多種場景。
2.有效期:6個月
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