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綿羊產(chǎn)氣莢膜梭菌酶聯(lián)免疫分析試劑盒原理
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    2019年10月23日
關(guān)鍵詞
綿羊產(chǎn)氣莢膜梭菌,CP-D,ELISA試劑盒
上傳者
上海一研生物科技有限公司
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資料簡介

  綿羊產(chǎn)氣莢膜梭菌D型(CP-D)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
 
  本試劑盒僅供研究使用。
 
  96T
 
  使用目的:
 
  本試劑盒用于測定綿羊血清示範推廣、血漿及相關(guān)液體樣本中產(chǎn)氣莢膜梭菌D型(CP-D)的表達處理方法。
 
  實驗原理
 
  本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中綿羊產(chǎn)氣莢膜梭菌D型(CP-D)表達。用純化的綿羊產(chǎn)氣莢膜梭菌D型(CP-D)抗體包被微孔板增多,制成固相抗體活動上,可與樣品中產(chǎn)氣莢膜梭菌D型(CP-D)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標記的產(chǎn)氣莢膜梭菌D型(CP-D)抗體結(jié)合進一步推進,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色方案。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色應用的選擇,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)左右,與CUTOFF值相比較背景下,從而判定標本中綿羊產(chǎn)氣莢膜梭菌D型(CP-D)的存在與否。
 
  試劑盒組成
 
  標本要求
 
  1.標本采集后盡早進行提取可靠保障,提取按相關(guān)文獻進行自然條件,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗開展,可將標本放于-20℃保存互動互補,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
 
  2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性意向。
 
  綿羊產(chǎn)氣莢膜梭菌D型(CP-D)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟
 
  1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號意料之外,每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔形式、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑置之不顧,其余各步操作相同)
 
  2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照數字化、陽性對照50μl方便。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl各領域。加樣將樣品加于酶標板孔底部應用領域,盡量不觸及孔壁取得顯著成效,輕輕晃動混勻,
 
  3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘實現。
 
  4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
 
  5.洗滌:小心揭掉封板膜不容忽視,棄去液體,甩干可以使用,每孔加滿洗滌液進入當下,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次效高化,拍干新體系。
 
  6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外創造。
 
  7.溫育:操作同3不難發現。
 
  8.洗滌:操作同5。
 
  9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl設備製造,再加入顯色劑B50μl發展需要,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
 
  10.終止:每孔加終止液50μl管理,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)顯示。
 
  11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)效率和安。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行設計能力。
 
  綿羊產(chǎn)氣莢膜梭菌D型(CP-D)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作程序總結(jié):
 
  計算和結(jié)果判定:
 
  試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
 
  臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
 
  陰性判定:樣品OD值< 臨界值(CUT OFF)者為產(chǎn)氣莢膜梭菌D型(CP-D)陰性
 
  陽性判定:樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為產(chǎn)氣莢膜梭菌D型(CP-D)陽性
 
  綿羊產(chǎn)氣莢膜梭菌D型(CP-D)酶聯(lián)免疫分析試劑注意事項
 
  1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用深入開展。
 
  2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用更為一致,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存技術的開發。
 
  3.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出研究與應用,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果服務品質。
 
  4.封板膜只限一次性使用的發生,以避免交叉污染。
 
  5.底物請避光保存影響。
 
  6.試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準新的動力,使用雙波長檢測時,參考波長為630nm
 
  7.所有樣品發展契機,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理廣泛關註。終止液為2M的硫酸,使用時必須注意安全發力。
 
  綿羊產(chǎn)氣莢膜梭菌D型(CP-D)酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期
 
  1.試劑盒保存:2-8℃優勢領先。
 
  2.有效期:6個月

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