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厭氧菌在有氧的情況下不能生長(zhǎng)發展。要培養(yǎng)厭氧菌,必須創(chuàng)造一個(gè)無氧的環(huán)境支撐作用。通常用培養(yǎng)基中加入還原劑日漸深入,或用物理、化學(xué)方法去除環(huán)境中的游離氧同時,以降低氧化還原電勢(shì)互動式宣講。如皰肉培養(yǎng)基、硫基乙酸鈉培養(yǎng)基模式,牛心腦浸液培養(yǎng)基等自動化。常用的厭氧培養(yǎng)方法有許多,可根據(jù)實(shí)際情況選用。
1.厭氧缸法接種好標(biāo)本的平板或液體培養(yǎng)基試管不折不扣,可放入?yún)捬醺變?nèi)培養(yǎng)支撐能力,厭氧缸是普通的干燥缸,用物理化學(xué)的方法使缸內(nèi)造成厭氧環(huán)境高效利用,從而將厭氧菌培養(yǎng)出來特征更加明顯。
2.厭氧袋(Bio-bag)即在塑料袋內(nèi)造成厭氧環(huán)境來培養(yǎng)厭氧菌。塑料袋透明而不透氣講理論,內(nèi)裝氣體發(fā)生管(有**化鈉的*固體以及5%檸檬酸安瓿)的可能性、美蘭指示劑管、鈀催化劑管市場開拓、干燥劑措施。放入已接種好的平板后,盡量擠出袋內(nèi)空氣要落實好,然后密封袋口緊密相關。先折斷氣體發(fā)生管,后折斷美蘭指示劑管先進技術,命名袋內(nèi)在半小時(shí)內(nèi)造成無氣環(huán)境培訓。如不突變表示袋內(nèi)已達(dá)厭氧狀態(tài),可以孵育宣講手段。
3.厭氧手套箱(Anaerobie glove box)即厭氧培養(yǎng)箱重要工具,是迄今為止上*的培養(yǎng)厭氧菌佳儀器之一。它是一個(gè)密閉的大型金屬箱配套設備,箱的前面有一個(gè)有機(jī)玻璃做的透明面板更優質,板上裝有兩個(gè)手套,可通過手套在箱內(nèi)進(jìn)行操作推進高水平,故名領域。箱側(cè)有一交換室,具有內(nèi)外二門好宣講,內(nèi)門通箱內(nèi)先關(guān)著註入新的動力。欲放物入箱,先打開外門,放入交換室雙重提升,關(guān)上外門進(jìn)行抽氣和換氣(H2,CO2事關全面,N2)達(dá)到厭氧狀態(tài)表現明顯更佳,然后手伸入手套把交換室內(nèi)門打開,將物品移入箱內(nèi)規模,關(guān)上內(nèi)門穩定發展。箱內(nèi)保持厭氧狀態(tài)基石之一,也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘余氧化合成水的原理聯動。該箱可調(diào)節(jié)溫度增持能力,本身是孵箱或孵箱即附在其內(nèi),還可放入解剖顯微鏡便于觀察厭氧菌菌落行業內卷,這種厭氧箱適于作厭氧細(xì)菌的大量培養(yǎng)研究追求卓越,大量培養(yǎng)基可放入作預(yù)還原和厭氧性無菌試驗(yàn)。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣參與能力、充氣合理需求、厭氧環(huán)境和溫度等均系自動(dòng)調(diào)節(jié)。
4.厭氧盒:原理同厭氧袋充分發揮,有成品銷售高質量。
5.生物耗氧法:在一密閉的容器內(nèi)放以生物(多是植物),消耗氧氣選擇適用,同時(shí)產(chǎn)生二氧化碳管理,供細(xì)菌生長(zhǎng)用。我沒見過業務指導。
6.焦性末食子酸法:在一潔凈的玻片上鋪上紗布或?yàn)V紙改進措施,均勻撒上焦性末食子酸,然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液長足發展,迅速將已接種細(xì)菌的平板倒扣在上面今年,用融化的白蠟封邊,造成一個(gè)封閉空間結構不合理。焦性末食子酸與堿反應(yīng)后耗氧組建。該法用于厭氧不嚴(yán)格的厭氧菌的培養(yǎng),簡(jiǎn)單效果較好。如有梭狀芽孢桿菌重要的意義。
7.皰肉培養(yǎng)基:本身就是一個(gè)不需特殊設(shè)備的厭氧培養(yǎng)法。皰肉和肉湯裝入大試管開放以來,液面封凡士林占,造成無氧環(huán)境。
操作室厭氧環(huán)境形成:按使用要求放置好必要的配件和器具提供了有力支撐,并向操作室內(nèi)放入二個(gè)無毒塑料袋激發創作。通電源開照明燈,開控溫儀進一步意見,調(diào)節(jié)所需溫度及安全溫度增幅最大。操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉)。關(guān)緊取樣室內(nèi)外門生產能力,并抽真空校驗(yàn)標準。操作室內(nèi)di一次置換(氮?dú)庵脫Q):先用橡皮管插入操作室內(nèi)進(jìn)氣口示範推廣,另一頭插入塑料袋。接通氮?dú)膺M(jìn)氣路即將展開,打開氮?dú)饪刂崎y大幅增加,使二只塑料袋充足氮?dú)猓缓笤o袋口傳承。把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊等特點。把塑料袋內(nèi)氮?dú)鉂u漸地放于操作室內(nèi),至全部放出多種。操作室第二次置換(氮?dú)庵脫Q)重復(fù)一 次充氮過程將進一步,并注意隨時(shí)用腳踏開關(guān)開閉排氣。操作室第三次置換(混合氣體置換):(混合氣體配比為:N2↑ 85% H2 ↑ 10% CO2↑ 5%)調(diào)換氣路打開混合氣道通閥門進(jìn)氣發展成就,充氣時(shí)要隨時(shí)腳踏開關(guān)開閉排氣成就。混合氣充滿塑料袋后開展面對面,關(guān)掉混合氣直通閥(三通閥)系統,使混合氣經(jīng)過流量計(jì)輸入操作并調(diào)整流量計(jì),流量為每分鐘10毫升左右自動化。把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)提升。通過三次換氣后,操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)意向。操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑意料之外,接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧,一 小時(shí)后打開美蘭指示劑(美蘭安瓶)觀察其變色情況形式,不變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境置之不顧。開紫外線滅菌燈,室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理數字化。滅菌時(shí)間自定方便。
厭氧培養(yǎng)箱注意事項(xiàng):盡可能地安裝于空氣清靜,溫度變化較小的地方各領域。開機(jī)前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器應用領域、儀表的說明書、掌握正確的使用方法進行培訓。培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達(dá)到j(luò)ue對(duì)厭氧環(huán)境后放入發展機遇。如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內(nèi)仍可保持12小時(shí)厭氧狀態(tài)。(超過12小時(shí)則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理)法治力量。經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象全技術方案。調(diào)換氣瓶時(shí),注意要扎緊氣管共享,避免流入含氧氣體信息化。真空泵按要求使用方式之一,定期檢查加油。停止使用新型儲能,關(guān)閉總電源鍵創新能力,及設(shè)備后部的電源開關(guān)。
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