關于大鼠ELISA試劑盒HIV測定過程
1 配液:ELISA試劑盒將50ml濃縮洗刷液用蒸餾水或去離子水20倍稀釋至1000ml備用。
2 編號:將樣品對應微孔按序編號了解情況,每板設陰性對照3孔深入、陽性對照Ⅰ型、Ⅱ型各1孔重要的,空白對照1孔開展研究。
3 加樣:分別在相應孔加入待檢標本、陰性相互融合、陽性對照100μl首要任務,用封板膜封板后置37℃溫育30min。
4 洗刷:當心把封板膜揭去不同需求,用洗板機挑選5次程序發展,洗板后拍干。
5 加酶:每孔加酶結合物100μl(空白對照孔除外)總之,充沛混勻面向,用封板膜封板后置37℃溫育30min。
6 洗刷:當心把封板膜揭去研學體驗,用洗板機挑選5次程序建設項目,洗板后拍干。
7 顯色:每孔加入顯色劑A液和B液各50μl落實落細,悄悄振動混勻相結合,封板后置37℃避光顯色15min。
8 測定:每孔加終止液50μl製高點項目,悄悄振動混勻更多的合作機會。設定酶標儀波長為450nm(建議使用雙波長的酶標儀比色延伸,參閱波長630 nm),空白調零服務好,讀取各孔OD值新趨勢。
9 判斷成果:核算臨界值(cut-off)(CO)值。 臨界值=陰性對照A均值+0.12 正常情況下共謀發展,陰性對照孔的OD值≤0.10(若1孔陰性對照的OD值>0.1應放棄學習,若有2孔或2孔以上陰性對照的OD值>0.1,應重復實驗聽得懂。)應用優勢。樣品OD值<臨界值者為HIV抗體陰性。
正常情況下要落實好,陽性對照孔的OD值≥0.80(若1孔陽性對照的OD值<0.8應放棄緊密相關,若有2孔或2孔以上陽性對照的OD值<0.8,應重復實驗先進技術。樣品OD值≥臨界值者為HIV抗體陽性培訓。
ELISA試劑盒注意:關于篩查陽性標本,應從頭取樣雙孔復試宣講手段,復試陽性者應按照《全國*管理規(guī)范》送HIV確證實驗室進行確證實驗重要工具。 質量操控: 每塊板設陰陽性及空白對照,并于每次實驗用克己質控血清作質控配套設備,將質控血清孔OD值采用“即刻法"核算或標在質控圖上更優質,如質控有效,標明實驗牢靠推進高水平;如失控脫穎而出,則要查看試劑效期、貯藏溫度生產創效、試 驗溫度是否正常廣泛應用、操作過程是否正確,直至從頭實驗使其在控橫向協同。
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