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【中國(guó)儀器網(wǎng) 解決方案】現(xiàn)代液相色譜分析中同期，色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞，選擇合適的色譜柱可以縮短方法開發(fā)所需的時(shí)間使命責任，并且使方法更具穩(wěn)定性效果。但是現(xiàn)在市場(chǎng)上色譜柱種類繁多，不同類型的色譜柱分離對(duì)象不同情況較常見，因此狀況，要做合適的選擇，必須對(duì)此有一定的認(rèn)識(shí)和了解機製。
物理性質(zhì)
柱長(zhǎng)，內(nèi)徑集成應用，如250*4.6mm探討。一般柱長(zhǎng)在2—250mm，柱越長(zhǎng)高效流通，分離度越高調解製度，但柱壓更高，分離所需時(shí)間更長(zhǎng)功能；但分離度與理論塔板數(shù)的平方根成正比應用的因素之一，所以一昧增加柱長(zhǎng)并不是有效的分離手段，一般情況下預期，150mm敢於監督、5um的填料可以提供足夠的塔板數(shù)。
粒徑結構，影響色譜分離度重要的作用。粒徑越小，分離越快規模最大，柱效越高穩中求進，但柱壓力越高，柱容易被污染最深厚的底氣，導(dǎo)致柱壽命降低協同控製。常見分析柱通常使用5um填料，復(fù)雜的多組分樣品分離一般使用3.5um粒徑品質，更大內(nèi)徑的制備色譜柱通常使用更大的粒徑利用好。如果固定相選擇是正確，但是分離度不夠，那么選用更小的粒度的填料是很有用的尤為突出。3.5um填料填充柱的柱效比相同條件下的5um填料的柱效提高近30%規定；然而，3.5um的色譜柱的背壓卻是5um的2倍空間載體，因此如何選擇填料粒徑需要根據(jù)現(xiàn)實(shí)情況而定高質量。
孔徑，60A保護好，120A組建，300A等√攸c？讖叫∩羁套兏?，則含孔率高，比表面積大和諧共生，載碳量高質生產力；色譜柱填料孔徑大小需和分子大小相匹配，保證分子自由進(jìn)出填料孔并與孔內(nèi)表面的鍵合相進(jìn)行分離分配技術交流，通常要求孔徑直徑是分子直徑的3倍以上先進的解決方案，一般小分子使用80—120A，大分子使用300A創造更多。
顆粒形狀宣講活動，一般有球形和不規(guī)則形，當(dāng)使用黏度較大的流動(dòng)相時(shí)工藝技術，球形顆列?？梢越档椭鶋海娱L(zhǎng)色譜柱壽命近年來。
比表面積講道理，指的是每克填料的表面積，如180m2/g—350m2/g技術先進，與粒度和含孔率有關(guān)全面革新；比表面積大，會(huì)增加樣品與鍵合相之間的反應(yīng)情況正常，增加保留和分離度行業分類；比表面積小則可以縮短分析時(shí)間和平衡時(shí)間，并不是比表面積大或者小就更好提高鍛煉，需要選擇合適的比表面積發展邏輯。
化學(xué)性質(zhì)
硅膠基質(zhì)：通用的基質(zhì)，強(qiáng)度大有所提升，化學(xué)修飾容易聽得進，但使用的pH值范圍有限(一般為2—8新的力量，特殊修飾的可以達(dá)到1—12)。
聚合物基質(zhì)：多為聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂便利性，化學(xué)穩(wěn)定更高要求，應(yīng)用pH范圍寬，具有更強(qiáng)的疏水性新技術，對(duì)蛋白質(zhì)等樣品分離效果較好共同學習；但強(qiáng)度較小，有機(jī)溶劑可能導(dǎo)致聚合物溶脹而受損深入，批次重復(fù)性較差效高，商品化色譜柱不多，一般價(jià)格較貴基礎。
載碳量：基質(zhì)表面鍵合相的比例性能，載碳量高，則保留增加對外開放，適合分析非極性化合物技術創新。
鍵合相：鍵合試劑不同，對(duì)化合物的選擇性不同資料，一般長(zhǎng)鏈的烷基鍵合相(C18 C8)比短鏈的(C4 C3)穩(wěn)定廣泛應用；非極性的鍵合相比極性的鍵合相(-NH2)穩(wěn)定。
封端：用短鏈將裸露的硅羥基鍵合后封閉起來堅定不移，以減少殘留的硅醇基，減輕待測(cè)組分與酸性硅羥基反應(yīng)而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象更讓我明白了。尤其對(duì)于極性樣品而言迎難而上，未封端處理的色譜柱分離效果較差。
柱長(zhǎng)及內(nèi)徑的選擇
長(zhǎng)度的選擇：柱越長(zhǎng)探索，總柱效越高(n值越大)堅持先行，柱越長(zhǎng)，分析時(shí)間也越長(zhǎng)滿意度。250—300mm是普遍的柱長(zhǎng)情況較常見，實(shí)驗(yàn)室一半以上的工作都是采用此規(guī)格柱子，一般用來分離l0到50個(gè)組份的中等至復(fù)雜混合物主要抓手；500—600mm體製，要求較高分辨率的應(yīng)用，—般用來分離大于50個(gè)組份或包含有難分離物質(zhì)的復(fù)雜樣品程序升溫分析創新科技。
內(nèi)徑：柱效率與柱半徑平方成反比服務延伸，內(nèi)徑越小柱效越高，但內(nèi)徑越大具有重要意義，柱容量也增加研究，允許進(jìn)樣量就越多。當(dāng)進(jìn)樣量超過柱容量時(shí)，則因柱內(nèi)每塊理論板內(nèi)不能建立真正的平衡提高，將會(huì)導(dǎo)致色譜蜂畸變機構，柱分辨率降低，重現(xiàn)性不好交流。因此對(duì)于復(fù)雜樣品需要分離基礎，必須使用小內(nèi)徑柱子。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物推進一步，為了增加樣品容量就必須使用內(nèi)徑大的柱子經過，目前實(shí)驗(yàn)室使用常見的柱子內(nèi)徑一般是4.6mm。
一般選擇原則：分析大分子量化合物選擇大孔徑色譜柱力度；對(duì)于高pH值或者堿性化合物需要選擇高封端或者特殊封端的色譜柱明確了方向，以改善峰形，延長(zhǎng)色譜柱使用壽命等勇探新路。
現(xiàn)在商品化的液相色譜柱琳瑯滿目單產提升，根據(jù)色譜柱的參數(shù)可以給我們提供一個(gè)初步的選擇，但由于各個(gè)儀器廠商的填料技術(shù)和鍵合技術(shù)都有差異試驗，即使都是C18柱勞動精神，同一品牌不同系列都有不同的功能，有能耐受低pH值的製度保障、有耐高溫的預下達、有適合堿性樣品的等等。所以在選擇色譜柱前要好好研究色譜柱參數(shù)統籌推進，仔細(xì)閱讀色譜柱說明書方案，才能找到合適的色譜柱和適宜的分離方法。
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