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半制備/制備型液相色譜柱的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器模樣、泵、進(jìn)樣器服務、色譜柱很重要、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成覆蓋。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相) 內(nèi), 由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí), 經(jīng)過反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過程, 各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別, 被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出, 通過檢測(cè)器時(shí), 樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來異常狀況。
半制備/制備型液相色譜柱柱接頭采用低死體積結(jié)構(gòu),柱接頭是兩端螺紋組件高效,一端是為7/16英寸內(nèi)螺紋應用創新,另一端是3/16英寸的內(nèi)螺紋(國(guó)內(nèi)外已規(guī)范化)。7/16英寸內(nèi)螺紋與1/4英寸柱管(Φ6.35mm)連接機構,中間放置壓環(huán)用于密封的特性。3/16英寸的內(nèi)螺紋與1/16英寸(Φ1.57mm)的連接管連接,中間也放置壓環(huán)用于柱接頭的密封基礎。為了盡量減少柱外死體積提供堅實支撐,在安裝色譜柱時(shí),用Φ1.57mm連接管通過空心螺釘壓環(huán)后要盡量插到底高產,然后再擰緊空心螺釘信息化技術。壓環(huán)被空心螺釘擠壓變形后緊箍在連接管上(連接管通過壓環(huán)后露出的管長(zhǎng)度應(yīng)嚴(yán)格控制在2.5mm長(zhǎng)或其他固定尺寸)。
在兩端柱接頭內(nèi)明確了方向,柱管兩端各放置一片不銹鋼濾片(或?yàn)V網(wǎng))系統性,用于封堵柱填料不被流動(dòng)相沖出柱外而流失萎a提升?罩鹘M件均為316L不銹鋼材質(zhì)就此掀開,能耐受一般的溶劑作用。但由于含氯化物的溶劑對(duì)其有一定的腐蝕性今年,故使用時(shí)要注意穩步前行,柱及連接管內(nèi)不能長(zhǎng)時(shí)間存留此類溶劑,以避免腐蝕動手能力。
半制備/制備型液相色譜柱的常見故障排除:
1逐步改善、柱壓過高
可能是微粒堵塞. 柱床膨脹意見征詢,不可逆吸附, 細(xì)菌生長(zhǎng)等造成的大大提高。也有可能是系統(tǒng)反壓?jiǎn)栴}的必然要求, 例如阻尼器堵塞,進(jìn)樣器堵塞取得了一定進展, 管路或連接口堵塞. 在線過濾器不干凈完善好, 壓力傳感器不準(zhǔn)確等。
2積極參與、柱效低
可能是色譜柱被污染問題分析、 過濾片部分堵塞、色譜柱內(nèi)的死體積造成交流研討,例如流動(dòng)相p H值或者組成不合適造成固定相損失更加完善。 流動(dòng)相急劇變化造成固定相物理損壞, 機(jī)械振動(dòng)造成固定相產(chǎn)生裂縫建設應用,柱床收縮或干枯支撐作用。
也有可能是儀器連接的問題, 認(rèn)真檢查進(jìn)樣器相關、檢測(cè)器大力發展、 管路豐富內涵、 保護(hù)柱和在線過濾器等是否連接好生產效率,也可能是色譜柱沒有平衡好, 進(jìn)樣量過大等問題適應性。
3節點、重復(fù)性差、不出峰落地生根、回收率低
可能是色譜柱被污染的特點, 流動(dòng)相 p H值或者組成不合適造成固定相損失 , 樣 品溶劑 不同或樣品本身不穩(wěn)定有效保障, 固定 相極性過強(qiáng)或者流動(dòng)相極性過弱. 或者發(fā)生非特異性吸附系統。也可能梯度實(shí)驗(yàn)時(shí)平衡時(shí)間不足,溫度波動(dòng)進一步提升, 流動(dòng)相組成改變空間廣闊, 樣品溶劑不同, 樣品穩(wěn)定性不好改革創新,方法的開發(fā)不好知識和技能, 緩沖液的酸堿度不合適或者緩沖能力不足。
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