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凝膠色譜儀使用注意事項和凝膠色譜柱的保護

   2016年10月19日 10:38  
  凝膠色譜技術是六十年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡單的分離分析技術就能壓製,由于設備簡單至關重要、操作方便,不需要有機溶劑效果,對高分子物質有很高的分離效果有所應。凝膠色譜法又稱分子排阻色譜法。凝膠色譜主要用于高聚物的相對分子質量分級分析以及相對分子質量分布測試合作關系。目前已經(jīng)被生物化學著力提升、分子生物學、生物工程學傳遞、分子免疫學以及醫(yī)學等有關領域廣泛采用融合,不但應用于科學實驗研究,而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。
  
  使用凝膠色譜儀的一些注意事項:
  
  溶劑準備:使用HPLC純?nèi)軇┓€中求進,如有必要統籌,進行過濾。保證溶劑的相溶性協同控製,避免使用對不銹鋼有腐蝕性的溶劑振奮起來。
  
  溶劑脫氣:超聲脫氣。
  
  樣品準備:過濾樣品利用好,確保樣品中不含固體顆粒深入各系統,用流動相溶解樣品。
  
  色譜柱的保護:
  
  (1)防止氣體進入色譜柱系列。凝膠柱是不允許氣泡進入的作用,否則將會使柱效降低甚至形成微小的難以驅除的氣室。因此慢體驗,為了防止氣泡進入色譜柱著力增加,一定要使用經(jīng)過脫氣的流動相,并且要嚴格按照下列步驟來安裝色譜柱科技實力。a.拆卸下色譜柱入口處的密封螺絲處理,觀察是否有溶劑滲出;b.如有溶劑滲出勃勃生機,即可將色譜柱接到管路上助力各業,以避免氣泡的進入極致用戶體驗;c.如無溶劑滲出時提供有力支撐,表明色譜柱的此端已經(jīng)進去空氣了,此時建議,可將色譜柱的出口端接到進樣閥上品率,以流動相來反方向沖洗色譜柱,以便將柱內(nèi)的空氣排除不斷發展。以0.2ml/min的小流量來沖色譜柱積極影響,如果溶劑的流速太快或者是壓力突然的上升都將會導致柱性能的降低;d.如果流出的溶劑里不含有氣泡緊密協作,說明柱內(nèi)的氣體已經(jīng)被排出了越來越重要,再將色譜柱以正確的方向接好,這樣氣泡就進不到色譜柱里面了發揮重要作用。
  
  (2)色譜柱的清洗醒悟。為了不使被測物質和雜質停留在色譜柱中,在每次的樣品分析工作完成之后發展目標奮鬥,都應及時地清洗色譜柱技術先進。首先要用對被測樣品洗脫能力強的溶劑來洗脫色譜柱,以分析工作中常用的反相色譜分析法為例,因其先流出的物質是極性大的物質認為,此時應用100%的甲醇或使用異丙純服務好、四氫呋喃等極性稍弱的溶劑將吸附在柱內(nèi)的極性小的物質洗脫下來,洗脫液的用量一般為柱體積的20倍即可反應能力。如果流動相是緩沖溶液共謀發展,則應先用蒸餾水來沖洗色譜柱,以沖掉柱內(nèi)的鹽有所提升,然后再用合適的溶劑來沖洗聽得進。
  
  凝膠濾過色譜法(GelFiltrationChromatography)中所使用的凝膠柱常用緩沖溶液做流動相,用完之后當然要用蒸餾水來沖洗先進水平。如果是連續(xù)操作便利性,可以將緩沖溶液置于柱內(nèi)過夜,但是維持小流速(<0.5ml/min)以防止緩沖鹽的析出重要平臺,如果流動相中含有鹵化物深刻認識,即使是停一夜,也必須要用蒸餾水將色譜柱沖洗干凈應用提升,以防止它們對柱體的腐蝕主動性。
  
  (3)色譜柱的存放。如果色譜柱暫時不用發展的關鍵,存放時要注意以下幾點:a.幾天之內(nèi)的短期放置道路,凝膠柱則用蒸餾水來沖洗,再把色譜柱的兩頭用密封螺絲密封好即可真諦所在。b.如果色譜柱長期不用指導,僅用上述方法來處理就不行了,這時應使用色譜柱使用說明書中所指明的溶劑來充滿色譜柱充分,凝膠柱則不能用水了進一步完善,因柱內(nèi)如果有微生物的生長則會使柱效降低,此時應用0.05%的NaNs水溶液(防腐劑)來沖洗色譜柱競爭力,再將色譜柱封嚴調整推進。色譜柱長期放置時,一定要將色譜柱的兩端封嚴機製性梗阻,以防止由于溶劑揮發(fā)而造成的柱填料干縮現(xiàn)象不斷創新,因這可導致柱效的嚴重降低。c.色譜柱應貯存在室溫下提供了遵循,如果放置于0℃以下的環(huán)境里參與水平,柱內(nèi)就會結冰,這也將導致柱效的降低滿意度。
  
  (4)不要高溫使用情況較常見。
  
  (5)不要高壓沖洗柱子
  
  對儀器的維護和保養(yǎng)進行記錄可持續。

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