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本試劑盒僅供研究使用規模最大。
(BMP-4)ELISA試劑盒使用目的:
本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中骨形成蛋白-4(BMP-4)含量統籌。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠骨形成蛋白-4(BMP-4)水平最深厚的底氣。用純化的小鼠骨形成蛋白-4(BMP-4)抗體包被微孔板,制成固相抗體振奮起來,往包被單抗的微孔中依次加入骨形成蛋白-4(BMP-4)品質,再與HRP標(biāo)記的骨形成蛋白-4(BMP-4)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物深入各系統,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色解決問題。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色規定。顏色的深淺和樣品中的骨形成蛋白-4(BMP-4)呈正相關(guān)環境。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠骨形成蛋白-4(BMP-4)濃度高質量。
(BMP-4)ELISA試劑盒標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取相對簡便,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)流程。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)合作,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品助力各業,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性極致用戶體驗。
(BMP-4)ELISA試劑盒操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋應用。
120ng/L 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
60ng/L 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
30ng/L 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
15ng/L 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
7.5ng/L 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑建議,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔不斷發展。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl積極影響,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)緊密協作。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部越來越重要,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻發揮重要作用。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘近年來。
配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體發展目標奮鬥,甩干技術先進,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去作用,如此重復(fù)5次講理論,拍干重要作用。
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外敢於監督。
溫育:操作同3發展邏輯。
洗滌:操作同5凝聚力量。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl聽得進,輕輕震蕩混勻新的力量,37℃避光顯色15分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)便利性。
測定:以空白空調(diào)零全面展示,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行深刻認識。
(BMP-4)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用核心技術,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存主動性。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出創造性,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果道路。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器規模設備,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差指導。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)競爭力,如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線集聚,做復(fù)孔優化服務策略。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定發展基礎,計(jì)算時(shí)請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)更讓我明白了。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染積極。
6.底物請避光保存探索。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品產業,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理滿意度。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異可持續,以英文說明書為準(zhǔn)主要抓手。
(BMP-4)ELISA試劑盒保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃構建。
2.有效期:6個(gè)月
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