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豬細小病毒（CPV）酶聯(lián)免疫分析

試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍：                                                          96T

1ng/L - 32ng/L

使用目的：

本試劑盒用于測定豬血清穩步前行、血漿及相關(guān)液體樣本中細小病毒（CPV）含量結構不合理。

實驗原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中豬細小病毒（CPV）水平。用純化的豬細小病毒（CPV）抗體包被微孔板逐步改善，制成固相抗體意見征詢，往包被單抗的微孔中依次加入細小病毒（CPV），再與HRP標記的細小病毒（CPV）抗體結(jié)合大大提高，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物的必然要求，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色取得了一定進展，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色完善好。顏色的深淺和樣品中的細小病毒（CPV）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）積極參與，通過標準曲線計算樣品中豬細小病毒（CPV）濃度問題分析。

試劑盒組成

標本要求

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行技術，提取后應(yīng)盡快進行實驗推廣開來。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存相對較高，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品資源配置，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支相關，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋特性。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）等特點、標準孔建言直達、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl將進一步，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl充分發揮，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部成就，盡量不觸及孔壁重要方式，輕輕晃動混勻開展面對面。
2. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 
3. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4. 洗滌：小心揭掉封板膜非常重要，棄去液體進一步提升，甩干，每孔加滿洗滌液營造一處，靜置30秒后棄去改革創新，如此重復(fù)5次，拍干取得顯著成效。
5. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl新模式，空白孔除外。
6. 溫育：操作同3估算。
7. 洗滌：操作同5講理論。
8. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl不要畏懼，輕輕震蕩混勻服務為一體，37℃避光顯色15分鐘.
9. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）逐漸顯現。
10. 測定：以空白空調(diào)零全會精神，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行拓展基地。

操作程序總結(jié)：

計算

  以標準物的濃度為橫坐標集中展示，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線體系流動性，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度探索創新；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式方式之一，將樣品的OD值代入方程式生動，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)創新能力，即為樣品的實際濃度新品技。

注意事項

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完求得平衡，板條應(yīng)裝入密封袋中保存紮實做。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶至關重要，洗滌時不影響結(jié)果提供深度撮合服務。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性的發生，以避免試驗誤差事關全面。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)表現明顯更佳，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣技術節能。

1. 請每次測定的同時做標準曲線，做復(fù)孔廣泛認同。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值）國際要求，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）鍛造。
2. 封板膜只限一次性使用競爭激烈，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存改善。

7．嚴格按照說明書的操作進行空白區，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理信息化。

9．本試劑不同批號組分不得混用形勢。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準取得明顯成效。

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：約定管轄；2-8℃。

2．有效期：6個月