TruSpectral全真光譜高靈敏度多通道成像

采用的光譜檢測技術(shù)的FV3000共聚焦顯微鏡的TruSpectral全真光譜檢測器將高靈敏度與光譜靈活性集于一體，可以檢測微弱的熒光團(tuán)精準調控。

• 透光率是傳統(tǒng)光譜檢測技術(shù)的三倍

• 可獨(dú)立調(diào)整的通道能夠優(yōu)化每個(gè)熒光團(tuán)的信號檢測

• λ掃描模式可對復(fù)雜重疊熒光信號進(jìn)行準(zhǔn)確的光譜拆分

• 濾色片（VBF）模式可同時(shí)進(jìn)行四通道圖像采集功能，在虛擬通道模式下最多可進(jìn)行十六通道的熒光采集

從宏觀到微觀成像和超分辨率顯微鏡

FV3000顯微鏡的從宏觀到微觀工作流程提供了數(shù)據(jù)采集路線圖，讓您能夠在背景中查看數(shù)據(jù)并輕松定位感興趣區(qū)域進(jìn)行高分辨率成像體系。

• 使用低倍率1.25倍或2倍物鏡快速拍攝整體標(biāo)本的大視場（FOV）圖像

• 在拼接圖像上找到感興趣的區(qū)域生產製造，然后利用奧林巴斯超高分辨率技術(shù)（FV-OSR）切換到更高放大倍率物鏡進(jìn)行低至120納米的高分辨率共聚焦成像

• 通過TruSight圖像處理完成采集，并獲得可隨時(shí)發(fā)布的顯微圖像

半個(gè)冠狀小鼠腦片在顯微鏡下拍攝的圖攜手共進，二抗標(biāo)記的是GFP（Alexa Fluor 488共同，綠色）、SV2（Alexa Fluor 565經過，紅色）簡單化、Homer（Alexa Fluor 647，藍(lán)色）明確了方向。

樹突（Anti-GFP抗體 Alexa Fluor 488系統性，綠色）和突觸標(biāo)記（SV2，Alexa Fluor 565單產提升，紅色）傳遞。利用cellSensCI反卷積功能處理的奧林巴斯超級分辨率圖像方法。測量獲得半波峰寬約為135nm。使用100X 1.35 NA硅油物鏡獲取的圖像提供有力支撐。

混合掃描可實(shí)現(xiàn)高速成像以及更高的出圖率

FV3000混合掃描單元將兩套掃描振鏡合二為一，提升共焦成像功能保供。

• FV3000RS混合掃描單元利用常規(guī)掃描振鏡用于高精度掃描自行開發，同時(shí)有共振掃描振鏡對實(shí)時(shí)生理現(xiàn)象進(jìn)行高速成像

• 使用共振掃描振鏡以大視場捕獲視頻速率的圖像，速度可從全視場FN 18的每秒30幀/秒責任，一實(shí)現(xiàn)每秒438幀/秒（fps）

• 使用共振掃描振鏡觀察諸如心臟跳動應用情況、血液流動或細(xì)胞鈣離子（Ca2 +）動態(tài)等快速現(xiàn)象

• 一鍵切換高精度的常規(guī)掃描振鏡和高速度的共振掃描振鏡

精確的時(shí)間序列成像

時(shí)間序列成像實(shí)驗(yàn)需要對樣品進(jìn)行持續(xù)聚焦以及低光毒性。

• 奧林巴斯的TruFocus模塊即便溫度變化或添加試劑也可確保在活細(xì)胞成像過程中保持在焦

• FV3000顯微鏡的高靈敏度檢測器所要求的激光功率大幅度降低組建，配合共振振鏡減少每個(gè)點(diǎn)的曝光時(shí)間表現，從而在減少更多光毒性的同時(shí)得到更精確的圖像數(shù)據(jù)

利用硅油物鏡進(jìn)行深層組織觀察

硅油的折射率接近于活組織的折射率，因此能夠以小球差進(jìn)行活組織內(nèi)部的深度高分辨率觀察深刻變革。

• 折射率匹配提供了更準(zhǔn)確的聚焦結論，實(shí)現(xiàn)了大體積生物體的高還原度的三維重構(gòu)和高分辨率共聚焦成像

• 長工作距離可實(shí)現(xiàn)深層的顯微成像

• 實(shí)時(shí)查看數(shù)據(jù)，并使用3D重構(gòu)軟件輕松觀察結(jié)構(gòu)

TruSpectral全真光譜檢測

與上一代的光譜檢測單元相比質生產力， TruSpectral全真光譜檢測技術(shù)能夠呈現(xiàn)更為出色的結(jié)果適應性強。FV3000顯微鏡各通道均采用了將光譜檢測器的靈活性與基于濾色片的靈敏度相結(jié)合的TruSpectral全真光譜檢測技術(shù)。

TruSpectral全真光譜檢測技術(shù)的工作原理

基于高效率的技術(shù)體相位全息（VPH）透射光柵先進的解決方案，TruSpectal全真光譜檢測技術(shù)配合可調(diào)狹縫可實(shí)現(xiàn)2nm的光譜檢測拓展。

靈敏度和準(zhǔn)確性

與傳統(tǒng)光譜檢測單元相比， FV3000系列共聚焦顯微鏡均配備的TruSpectral全真光譜檢測技術(shù)實(shí)現(xiàn)更高的光通量信息。體相位全息透射光柵能夠以比反射光柵高三倍的透射效率來衍射光線相關。由此最終獲得出色的活組織和固定組織多色熒光顯微圖像。

更高的量子效率

FV3000顯微鏡的高靈敏度檢測器（HSD）讓您能夠采集到常規(guī)檢測器無法檢測到的微弱熒光信號豐富內涵。HSD單元采用兩個(gè)量子效率45％的GaAsP檢測器生產效率，并通過Pilter固體制冷技術(shù)在極低激發(fā)光下將圖像背景噪聲降低20％。HSD單元可配合FV3000系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)四通道GaAsP成像適應性。

多達(dá)十六通道光譜TruSpectral檢測

TruSpectral全真光譜檢測可在所有顯微鏡通道上獨(dú)立工作保持穩定，因此能夠在多達(dá)四個(gè)通道上實(shí)現(xiàn)真正的多通道同時(shí)λ掃描。多通道λ模式有助于實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)和實(shí)驗(yàn)后處理光譜拆分由此獲得出色的光譜分離結(jié)果面向。在多達(dá)四個(gè)動態(tài)范圍的條件下支撐作用，可單獨(dú)調(diào)節(jié)每個(gè)檢測器的靈敏度實(shí)現(xiàn)明亮和暗淡信號的分離。

原始信號

各通道的靈敏度調(diào)整

光譜拆分

光譜拆分

FV3000系統(tǒng)的光譜反卷積算法讓重疊光譜能夠基于來自λ序列圖像的光譜信息進(jìn)行分離建設項目。在實(shí)時(shí)圖像采集和采集后處理過程中最為突出，可以通過拆分算法消除通道之間的熒光串?dāng)_，從而清晰分離多達(dá)16個(gè)熒光信號相結合。

兩種掃描振鏡模塊

可在兩種掃描單元之間選擇：常規(guī)掃描振鏡（FV3000）或混合的常規(guī)/共振掃描振鏡（FV3000RS）高效化。

• 利用常規(guī)掃描振鏡和奧林巴斯超分辨率技術(shù)（FV-OSR）以高信噪比獲得低至120納米分辨率的圖像

• 常規(guī)振鏡掃描單元可提供精準(zhǔn)的龍卷風(fēng)掃描模式和多點(diǎn)刺激功能製高點項目，而且刺激與成像切換僅需100ms

• 混合式掃描單元既配有用于高精度掃描的常規(guī)掃描振鏡，也配有用于高速成像的共振掃描振鏡

• 共振掃描振鏡讓您能夠以512×512像素全視場每秒捕捉30幀圖像範圍和領域，或者通過剪切Y軸以每秒438幀速度捕獲關(guān)鍵的實(shí)時(shí)生物電生理現(xiàn)象有所增加，如鈣離子信號的檢測。

兼顧速度和視場數(shù)

很多高速掃描方法受制于成像視野更高要求，從而限制了檢查多細(xì)胞大視野的能力越來越重要的位置。FV3000RS顯微鏡的共振掃描振鏡即便在每秒30幀的視頻速率下也可能保持FN 18的全視場成像，可實(shí)現(xiàn)每秒438幀采樣共同學習。

循環(huán)平均化降噪處理

低激光功率高速掃描盡管可以大限度降低光毒性順滑地配合，但往往會降低信噪比，從而難以獲得高分辨率的時(shí)間序列圖像效高。通過循環(huán)平均化降噪處理前沿技術，您不但可以調(diào)整快速延時(shí)圖像獲得更高的信噪比，同時(shí)還可保持時(shí)間分辨率并保留原始數(shù)據(jù)性能。

（左）以低激光功率（0.05％多種方式，488nm）采集的原始30 fps數(shù)據(jù)。
（右）以低激光功率采集的30 fps數(shù)據(jù)進(jìn)行了循環(huán)平均化降噪處理（10幀）實力增強。

從宏觀到微觀的觀察

以從宏觀到微觀的觀察方式查看數(shù)據(jù)不合理波動。使用FV3000系統(tǒng)經(jīng)過重新設(shè)計(jì)的光路，可生成低至1.25倍的詳細(xì)概覽圖像重要工具，然后即可輕松將所觀察的結(jié)構(gòu)以更高倍率成像積極拓展新的領域。圖像拼接可以讓您采集相鄰視場的連續(xù)3D（XYZ）和4D（XYZT）圖像。從圖像采集到拼接的全過程可自動化更優質，由此節(jié)省時(shí)間并生成更多重要數(shù)據(jù)相對開放。

TruSight反卷積：實(shí)現(xiàn)更高分辨率的圖像處理

利用TruSight反卷積消除模糊并獲得更清晰、更銳利的圖像脫穎而出。FV3000共焦顯微鏡的專用cellSens算法可通過一鍵點(diǎn)擊完成從采集到處理的無縫工作流程拓展應用，并通過GPU處理更快地得到結(jié)果。

GATTA-SIM納米尺的圖像

左圖：原始共聚焦圖像/右圖：使用TruSight獲得的圖像

多達(dá)4通道同步的Olympus超高分辨率 技術(shù)（FV-OSR）

適用于共定位分析的奧林巴斯超分辨率成像模塊可以依次或同時(shí)以120納米的分辨率采集四個(gè)熒光信號結構，分辨率幾乎是傳統(tǒng)奧林巴斯共焦顯微鏡的兩倍管理。

• 不需要特殊的熒光團(tuán)，并且可處理各種樣品

• 只需很少的培訓(xùn)即可輕松上手

• 為FV3000共焦顯微鏡系統(tǒng)添加FV-OSR即可獲得超分辨率顯微鏡

0.5AU共聚焦圖像

使用cellSens高級反卷積的0.5AU共聚焦圖像

奧林巴斯超分辨OSR圖像能力建設，可清晰區(qū)分點(diǎn)狀染色

ruFocus時(shí)間序列成像

TruFocus技術(shù)讓多點(diǎn)實(shí)驗(yàn)和長時(shí)程成像更加穩(wěn)定可靠模樣。TruFocus技術(shù)使用一種具有低光毒性的紅外激光（1類）識別樣品平面位置，并提供兩種模式保持聚焦服務。

• 一鍵自動聚焦（AF）模式可讓您設(shè)置多個(gè)聚焦位置很重要，從而在多點(diǎn)實(shí)驗(yàn)中實(shí)現(xiàn)高效的Z序列采集

• 連續(xù)鎖焦模式可保持相應(yīng)觀察平面精確聚焦，并避免由于溫度變化或添加試劑而導(dǎo)致的焦點(diǎn)漂移，因此成為時(shí)間序列定量實(shí)驗(yàn)的理想選擇

• TruFocus可兼容包括空氣物鏡異常狀況、塑料培養(yǎng)皿和硅油物鏡在內(nèi)的多種共聚焦實(shí)驗(yàn)條件

使用X Line物鏡實(shí)現(xiàn)高性能顯微成像

X Line物鏡可提供寬范圍色差校正研究、均勻的圖像和更高的數(shù)值孔徑，由此提高FV3000共聚焦顯微鏡的成像質(zhì)量應用創新。

左：常規(guī)物鏡/右：X Line物鏡

利用硅油物鏡進(jìn)行深層組織觀察

奧林巴斯提供四款高數(shù)值孔徑硅油浸物鏡提高，使活細(xì)胞成像獲得的效果。

• 硅油的折射率（ne≈1.40）接近于活組織的折射率（ne≈1.38）的特性，因此能夠以小球差進(jìn)行深層的活組織內(nèi)部的高分辨率觀察交流。

• 硅油不會變干或硬化，因此在長時(shí)間觀察過程中無需重新加油

超級色差校準(zhǔn)物鏡（PLAPON60XOSC2）提高共定位分析的可靠性

這款油浸物鏡可大限度減少405-650nm光譜波段橫向和軸向色差共同，使您能夠獲取可靠的共定位圖像并進(jìn)行超高定位精度的測量。物鏡對近紅外線區(qū)域達(dá)850nm波長進(jìn)行色差校正經過，使之成為定量觀察成像的理想選擇簡單化。

• 倍率: 60X

• NA數(shù)值孔徑: 1.4（油浸）

• WD工作距離: 0.12毫米

• 色差校正范圍：405–650nm

• 為每個(gè)物鏡提供光學(xué)數(shù)據(jù)

PLAPON60XOSC2

針對電生理實(shí)驗(yàn)的優(yōu)化配置

通過觸發(fā)信號I / O接口控制盒將共聚焦成像與電生理設(shè)備同步。I / O接口控制盒還可將電壓信號轉(zhuǎn)換為能夠以與熒光圖像相同方式進(jìn)行處理的圖像管理≡O計？奢p松實(shí)現(xiàn)在光刺激的同時(shí)利用共聚焦掃描記錄電壓信號圖像的功能。

直觀的軟件

FV3000軟件簡化了從采集到分析的整個(gè)共聚焦成像及分析工作流程改進措施【痛讼崎_？啥ㄖ魄铱杀４娴牟季衷O(shè)置讓您無論復(fù)雜程度如何，均可輕松根據(jù)工作流程和實(shí)驗(yàn)需求自定義界面今年。

實(shí)時(shí)3D渲染和分析

利用FV3000軟件的實(shí)時(shí)3D圖像渲染功能并實(shí)時(shí)查看您的數(shù)據(jù)穩步前行。3D圖像可在圖像采集期間進(jìn)行構(gòu)建并以實(shí)時(shí)圖像方式顯示。

選配NoviSight軟件可以執(zhí)行3D細(xì)胞分析動手能力。該軟件特別適合多孔多細(xì)胞球等標(biāo)本在3D范圍內(nèi)進(jìn)行復(fù)雜的量化分析逐步改善。

利用時(shí)序管理器簡化實(shí)驗(yàn)復(fù)雜性

時(shí)序管理器軟件模塊可輕松處理復(fù)雜的科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究成果。多天時(shí)間序列實(shí)驗(yàn)以微秒級掃描精度和毫秒級序列執(zhí)行精度進(jìn)行控制取得了一定進展。可執(zhí)行各種復(fù)雜實(shí)驗(yàn)方案大面積，其中包括：

• 在高低倍率物鏡之間切換

• 不同間隔的時(shí)間序列成像

• FRAP或FRET（受體漂白法）成像過程中進(jìn)行光刺激

顯微圖像定量分析

FV3000共聚焦顯微鏡可增加一套可選配的分析功能來完成成像工作流程并提供定量數(shù)據(jù)積極參與。

• 計(jì)數(shù)和測量：計(jì)算細(xì)胞的數(shù)量、大小培養、光強(qiáng)和形態(tài)

• 共定位：分析重疊熒光光譜

計(jì)數(shù)和測量 共定位

FRET和FRAP實(shí)驗(yàn)

FV3000顯微鏡與cellSens生命科學(xué)分析模塊配合使用技術，可輕松獲取及分析FRET和FRAP實(shí)驗(yàn)。

• 在FRAP實(shí)驗(yàn)中推動，τ/ 2和移動/靜止部分相對較高，可以通過擬合漂白后熒光恢復(fù)引起的亮度變化曲線來進(jìn)行估算資源配置。

• FRET效率的測量可以通過受體漂白法、比例成像法和敏化發(fā)射法來實(shí)現(xiàn)相關。

左：原始CFP/YFP比值 右：CFP/YFP比值的IMD

目標(biāo)追蹤

使用cellSens目標(biāo)追蹤模塊自動檢測成就、追蹤和分析延時(shí)圖像中的運(yùn)動對象重要方式。追蹤功能提供了強(qiáng)大直觀的工具來量化諸如細(xì)胞移動和分裂等動態(tài)過程。

遠(yuǎn)程開發(fā)（RDK）模塊

遠(yuǎn)程開發(fā)模塊可使用Python系統、C ++和Matlab等語言對特定FV3000顯微鏡功能進(jìn)行遠(yuǎn)程控制和編程非常重要。RDK模塊能夠發(fā)揮系統(tǒng)所蘊(yùn)含的更大潛力，是具有編程經(jīng)驗(yàn)用戶的強(qiáng)大工具空間廣闊。

技術(shù)參數(shù)