5×蛋白上樣緩沖液(含DTT)產(chǎn)品簡介:
本產(chǎn)品適用于SDS-PAGE(SDS-變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時作蛋白質(zhì)上樣用綠色化發展。其主要成份為SDS至關重要,DTT,溴酚藍(lán)左右,緩沖鹽溶液等背景下。SDS可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,這時蛋白質(zhì)本身的電荷被SDS掩蓋可靠保障,消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異自然條件;SDS還可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級和三級結(jié)構(gòu)開展。DTT可以斷開L(+)-Cysteine殘基之間的二硫鍵互動互補,破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異意向。最終無電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白(亞單位)意料之外,電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。溴酚藍(lán)用作電泳時的指示劑形式,可大概指示電泳結(jié)束的時間置之不顧。
5×蛋白上樣緩沖液(含DTT)使用說明:
1、請按每40微升蛋白樣品加入10微升上樣緩沖液的比例(5倍稀釋)來使用數字化。如果蛋白樣品濃度過高方便,可用雙蒸水稀釋基礎上。
2、混勻后應用領域,100℃水浴加熱5-10分鐘保持競爭優勢,使蛋白變性。
3發展機遇、冷卻至室溫后長效機製,10000-14000rpm離心2-5分鐘,取上清直接上樣電泳即可全技術方案。
注意事項:
1分享、聚丙烯酰胺凝膠濃度為8%時溴酚藍(lán)指示條帶的位置大概在30kd左右, 膠濃度為12%時分析,約在20kd左右新體系,膠濃度為15%時,大概在10kd創造。請根據(jù)自己目標(biāo)條帶來判斷結(jié)果電泳時間不難發現。
2、本試劑因含DTT設備製造,有一定的毒性發展需要,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作管理。
3顯示、蛋白上樣緩沖液含有溴酚藍(lán)指示劑,PH值受保存溫度影響效率和安,在低溫凍存狀態(tài)下設計能力,溶液可能會呈現(xiàn)深棕色,不影響產(chǎn)品使用深入開展。