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犬內(nèi)皮素（ET）ELISA檢測試劑盒使用指導(dǎo)說明競爭力！

檢測原理

試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被犬內(nèi)皮素（ET）捕獲抗體的包被微孔中進一步完善，依次加入標(biāo)本集聚、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體關規定，經(jīng)過溫育并澈底洗滌發展基礎。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色建強保護，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色同期。顏色的深淺和樣品中的犬內(nèi)皮素（ET）呈正相關(guān)生產效率。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度效果。

樣品收集使用、處理及保存方法

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激密度增加，收集血液后有效性，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA機遇與挑戰、檸檬酸鹽或肝素抗凝廣泛關註。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物集成技術。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎就能壓製。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測大部分，請按一次用量分裝強大的功能，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融解決方案，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍優勢。

自備物品

1.酶標(biāo)儀（450nm）

2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL增產、20-200uL便利性、200-1000uL

3.37℃恒溫箱

操作步驟（僅供參考）

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃行動力。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔規模最大，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3.  待測樣本孔先加待測樣本10μL統籌，再加樣本希釋液40μL最深厚的底氣；

4.  隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔振奮起來，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min品質。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干深入各系統，每孔加滿洗滌液解決問題，靜置1min，甩去洗滌液作用，吸水紙上拍干相互配合，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.  每孔加入底物A著力增加、B各50μL智能化，37℃避光孵育15min科技實力。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)建設，在450nm波長處測定各孔的OD值在此基礎上。

操作注意事項

1.  試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘前來體驗。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶自主研發，這屬于正常現(xiàn)象更加廣闊，水浴加熱使結(jié)晶wan全溶解后再使用不同需求。

2.  實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存保持穩定。

3.  預(yù)處理后的樣本無需稀釋創造更多，直接取10μL加樣即可。

4.  嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間不斷進步、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻效率。