DWD-1紫外檢測(cè)儀（高性能雙光束雙波長）內(nèi)置數(shù)據(jù)處理

波長范圍：254nm導向作用、280nm（同時(shí)檢測(cè)）、另在254nm應用的選擇、280nm-400nm譜線之間任選兩個(gè)波長同時(shí)檢測(cè)十大行動。

*DWD-1儀器特點(diǎn)

蛋白質(zhì)280nm/254nm雙波長測(cè)定：

蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的*左右、*等芳香族氨基酸。它們具有吸收紫外光的性質(zhì)綜合措施，其吸收高峰在280nm波長處可靠保障，且在此波長內(nèi)吸收峰的光密度值與其濃度成正比關(guān)系，故可作為蛋白質(zhì)定性設計標準、定量測(cè)定的依據(jù)開展，正因?yàn)槿绱耍?80nm處的紫外吸收法通常被用于層析系統(tǒng)中蛋白質(zhì)濃度的連續(xù)監(jiān)控。但由于各種蛋白質(zhì)的*和*的含量不同發揮重要帶動作用，故要準(zhǔn)確定量意向，必需要有待測(cè)蛋白質(zhì)的純品作為標(biāo)準(zhǔn)來比較，或且已經(jīng)知道其消光系數(shù)作為參考文化價值。另外形式，不少非蛋白物質(zhì)在280nm波長下也有-定吸收能力，可能發(fā)生干擾不斷完善。其中尤以核酸（嘌呤和嘧啶堿）的影響更為嚴(yán)重數字化。在280nm處的吸收比蛋白質(zhì)強(qiáng)10倍（每克），但核酸在254nm處的吸收更強(qiáng)基礎上，其吸收高峰在254nm附近各領域。核酸254nm處的消光系數(shù)是280nm處的2倍，

而蛋白質(zhì)則相反保持競爭優勢，280nm紫外吸收值大于254nm的吸收值進行培訓。

通常：

純蛋白質(zhì)的光吸收比值：A280/A254》1.8

純核酸的光吸收比值：A280/A254《0.5

因此蛋白質(zhì)溶液中同時(shí)存在核酸時(shí)（生物體系大多數(shù)如此），必須同時(shí)測(cè)定OD254nm不容忽視，與OD280nm提高。然后根據(jù)兩種波長的吸收度的比值可以使用，通過經(jīng)驗(yàn)公式校正進入當下，以消除核酸的影響而推算出蛋白質(zhì)的真實(shí)含量。

蛋白質(zhì)濃度=1.45×A280－0.74×A254（mg/ml）

此經(jīng)驗(yàn)公式是通過一系列已知不同濃度比例的蛋白質(zhì)（酵母烯醇化酶）和核酸（酵母核酸）的混合液所測(cè)定的數(shù)據(jù)來建立的效高化。