梭菌顯色培養(yǎng)基（膜過濾法）

用于歐盟指導(dǎo)委員會(huì)*的對(duì)水樣中產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離和計(jì)數(shù)（采用膜過濾法）（3）

梭菌顯色培養(yǎng)基

M-CP Agar Base

梭菌顯色培養(yǎng)基

基本信息

應(yīng)用

用于歐盟指導(dǎo)委員會(huì)*的對(duì)水樣中產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離和計(jì)數(shù)（采用膜過濾法）（3）

背景　 
 

產(chǎn)氣莢膜梭菌是一種革蘭氏陽性芽孢桿菌穩定性，是人畜共患病原菌蓬勃發展，也是人畜腸道正常菌群必然趨勢，它廣泛存在于自然環(huán)境如土壤規則製定、糞便和污水中（1）。產(chǎn)氣莢膜梭菌分為五個(gè)亞型合規意識，其中一些亞型能分泌外毒素機遇與挑戰。產(chǎn)氣莢膜梭菌作為條件致病菌，可導(dǎo)致水和食品污染合作關系，引發(fā)畜禽和人類疾病，如壞死性腸炎、腹瀉、腸毒血癥提供有力支撐、氣性壞疽和食物中毒越來越重要。

有報(bào)道指出認為，大腸菌群作為水質(zhì)微生物學(xué)指標(biāo)是不可靠的聽得懂，而產(chǎn)氣莢膜梭菌可作為一個(gè)水污染的指示菌深刻認識。歐洲已將其作為水質(zhì)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的補(bǔ)充條款，WHO已在水質(zhì)檢測中將其作為水質(zhì)污染的微生物應用提升。產(chǎn)氣莢膜梭菌數(shù)量與水污染程度有一定的相關(guān)關(guān)系主動性。我國《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 飲用天然礦泉水檢驗(yàn)方法》GB8538—2016規(guī)定創造性，天然礦泉水產(chǎn)品和水源水需檢測產(chǎn)氣莢膜梭菌。

目前指導，檢測產(chǎn)氣莢膜梭菌多采用培養(yǎng)基法和PCR法大型。實(shí)踐證明具有重要意義，采用快速膜過濾技術(shù)和顯色培養(yǎng)基(mCP培養(yǎng)基）方法，簡單、易行系列、可靠深入。

原理

M-CP平板是根據(jù)Armon和Payment的配方而成（2）研學體驗。培養(yǎng)基中的胰蛋白?服務好、酵母粉提供氮源營養(yǎng)要落實好，蔗糖提供碳源營養(yǎng)配套設備。溴甲酚紫為pH指示劑。吲哚β-D-葡萄糖苷為β-D-葡糖苷酶或纖維二糖酶的顯色底物，二磷酸*用于檢測酸性磷酸化酶。添加的D-環(huán)*和*（FD153）抑制伴隨的其他菌群。厭氧環(huán)境也提供了進(jìn)一步的選擇性管理。當(dāng)黃色（纖維二糖酶陰性）菌落在暴露于氨煙30秒后變?yōu)槊倒寮t時(shí)，即可認(rèn)為是產(chǎn)氣莢膜梭菌。顏色鑒別有時(shí)是困難的搖籃，因此傳承，可挑取典型菌落（黃變粉色）和非典型菌落（綠色或沒變色）進(jìn)行驗(yàn)證。驗(yàn)證試驗(yàn)可通過硫還原自動化、革蘭氏陽性、芽孢桿狀不折不扣、無動(dòng)力性支撐能力、硝還原、明膠液化高效利用、乳糖發(fā)酵和其他生化試驗(yàn)證實(shí)（4）特征更加明顯。

培養(yǎng)基組分

終pH值為7.6±0.2（25℃）

配置

35.6g干粉溶485ml蒸餾水。加熱煮沸使培養(yǎng)基全溶講理論。15磅121℃高壓滅菌15分鐘的可能性。冷卻至45-50℃。用5ml無菌蒸餾水溶解添加劑1（FD153）服務為一體，用10ml無菌蒸餾水溶解改良的添加劑2（FD154A）問題，將添加劑2（FD154）室溫孵育。在485ml無菌溶解冷卻的梭菌顯色培養(yǎng)基溶液中全會精神，無菌加入1管添加劑1（FD153）系統穩定性，1管添加劑2（FD154）或改良的添加劑2（FD154A），混勻先進技術，倒入無菌平皿培訓。

質(zhì)量控制

外觀：淡黃至淡綠色松散粉末。

成膠性：牢固搶抓機遇，與1.5％瓊脂凝膠相當(dāng)。

成品顏色和透明度：紫色透明至輕微不透明凝膠表示。

pH值：7.40-7.80

培養(yǎng)反應(yīng)：在無氧條件下加入添加劑后全面闡釋，43-45℃孵育18-24小時(shí)非常激烈，觀察接種反應(yīng)。

*暴露于氨煙30秒后菌落變?yōu)榘得倒迳恋奂t色。