| 貨號(hào) | 產(chǎn)品 | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存 | 效期 |
| M543 | *測(cè)定用培養(yǎng)基 | 100g | 干粉：8°C以下密閉 制備好的培養(yǎng)基：2-8°C | 30個(gè)月 |
原理
*測(cè)定用培養(yǎng)基（又名*干酪培養(yǎng)基）采用鼠李糖乳桿菌（ATCC 7469）為測(cè)定用菌，用于*的微生物法測(cè)定又進了一步。該培養(yǎng)基是基于Flynn等人(1)的配方多種場景，并經(jīng)Baker等人(2)和Waters多元化服務體系、Mollin(3)改良。用于維生素測(cè)定的培養(yǎng)基通常需要三種：維持培養(yǎng)基擴大公共數據、接種培養(yǎng)基和測(cè)定用培養(yǎng)基深度。后者通常是化學(xué)限定的培養(yǎng)基，包含所有測(cè)定菌生長(zhǎng)所需的養(yǎng)分足夠的實力，但不含有待測(cè)的分子緊迫性。類似的，*干酪培養(yǎng)基包含鼠李糖乳桿菌生長(zhǎng)所需的所有成分更適合，但不包含*高效。因而，添加一系列濃度增加的*要素配置改革，會(huì)觀察到鼠李糖乳桿菌生長(zhǎng)的遞增體系。
鼠李糖乳桿菌（ATCC 7469）的貯備菌制備是在AOAC*的乳桿菌瓊脂（貨號(hào)M366）試管穿刺接種培養(yǎng)，35-37°C孵育18-24小時(shí)后帶動產業發展，試管儲(chǔ)存在冰箱里責任製。每月轉(zhuǎn)接一次。測(cè)定菌液的制備是將貯備菌轉(zhuǎn)種到含10ml微量維生素檢測(cè)接種肉湯（貨號(hào)M133）或乳酸桿菌肉湯（貨號(hào)M367）的試管中倍增效應。35-37°C孵育24小時(shí)后規則製定，在無(wú)菌條件下菌液離心，棄掉上清優化服務策略，再重懸于10ml的無(wú)菌*干酪培養(yǎng)基中（貨號(hào)M543）關規定。再像之前一樣沉淀，并清洗一次兩個角度入手。后建強保護，清洗后的菌株重懸于10ml*干酪培養(yǎng)基中，并用該培養(yǎng)基進(jìn)行1:100稀釋生產效率。1滴重懸液用于接種到每個(gè)測(cè)定管中使命責任。也可用0.85% NaCl代替培養(yǎng)基來(lái)清洗和稀釋。
由于滅菌條件使用，孵育溫度等因素會(huì)影響標(biāo)準(zhǔn)曲線讀數(shù)合規意識，并且每次不會(huì)*一樣，因此每次都應(yīng)制備標(biāo)準(zhǔn)曲線有效性。10ml管內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品量為0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1ng現場。
*標(biāo)準(zhǔn)品的制備：將20mg*干粉溶于含有20ml乙醇的100ml蒸餾水中。用0.1N NaOH調(diào)整溶液pH值為10.0力量，再用0.05N HCl調(diào)pH為 7.0我有所應。該溶液含有200mg*/ml。用999ml蒸餾水稀釋1ml該溶液深入實施，則濃度為200ng/ml至關重要。再用999ml*緩沖液A（貨號(hào)M544）稀釋1ml該溶液發展空間，則為0.2ng/ml的*標(biāo)準(zhǔn)溶液。每管取0,0.5, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0和5ml該溶液應用的因素之一，配置即告完成解決。
樣本*濃度的測(cè)定步驟：如前所述使用0.5,1.0,1.5ml或其他體積的制備好的血清提取物。加入5ml*干酪培養(yǎng)基和足量的蒸餾水敢於監督，使每個(gè)試管的總體積為10ml幅度。15磅121°C滅菌5分鐘。冷卻試管并向每個(gè)試管中加入一滴接種液重要的作用。35-37℃孵育18-24小時(shí)后進(jìn)行濁度讀數(shù)貢獻。讀數(shù)前將試管冷藏15-30分鐘以停止細(xì)菌生長(zhǎng)。620nm檢測(cè)吸光度穩中求進。待測(cè)樣品中的*含量應(yīng)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)確定統籌，不過(guò)要考慮樣品稀釋度。
應(yīng)非常小心協同控製，避免培養(yǎng)基和玻璃器具被污染振奮起來。應(yīng)使用潔凈的無(wú)去污劑的玻璃器具。少量的外源物質(zhì)的污染可能導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果利用好。
應(yīng)用
*干酪培養(yǎng)基用于*的微生物法測(cè)定深入各系統。鼠李糖乳桿菌（ATCC 7469）為測(cè)定用菌。
培養(yǎng)基組分
成分 | 克/升 |
無(wú)維生素酸水解酪蛋白 | 10.000 |
葡萄糖 | 40.000 |
醋酸鈉 | 40.000 |
* | 1.000 |
磷酸二氫鉀 | 1.000 |
DL-* | 0.200 |
天* | 0.600 |
抗壞血酸 | 4.000 |
L-*鹽酸鹽 | 0.500 |
硫酸腺嘌呤 | 0.010 |
* | 0.010 |
黃嘌呤 | 0.020 |
脫水山梨糖醇單油酸酯絡(luò)合物 | 0.100 |
還原型* | 0.005 |
* | 0.400 |
氯化鈉 | 0.020 |
* | 0.020 |
硫酸錳 | 0.015 |
核黃素（維生素B2） | 0.001 |
對(duì)氨基苯甲酸（PABA） | 0.002 |
鹽酸吡哆醇 | 0.004 |
鹽酸硫胺素 | 0.0004 |
* | 0.0008 |
* | 0.0008 |
* | 0.00002 |
終pH值 (25°C) 6.7±0.1
質(zhì)量控制
?外觀——米黃色至黃色均一自由流動(dòng)粉末
?制備好的培養(yǎng)基顏色和透明度——淡琥珀色透明溶液系列，可能有輕微沉淀
?配比濃度——在25°C下9.4%w/v(8.5g/100ml水）水溶液規定，pH值為6.7±0.1
?pH值——6.60-6.80
配置
稱取9.4g干粉培養(yǎng)基溶于100ml蒸餾水，加入50mg抗壞血酸空間載體。加熱至沸騰使培養(yǎng)基*溶解。測(cè)定時(shí)相對簡便，分裝至每管為5ml培養(yǎng)基（包含標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣品）重要組成部分。加蒸餾水，使總體積達(dá)到10ml合作。高壓消毒15磅121°C 5分鐘勃勃生機。立即冷卻。
培養(yǎng)反應(yīng)
采用鼠李糖乳桿菌（ATCC 7469）進(jìn)行*的微生物法測(cè)定極致用戶體驗。35-37°C孵育16-18小時(shí)提供有力支撐。
生長(zhǎng)狀況
可獲得良好的生長(zhǎng)。隨著測(cè)定管*標(biāo)準(zhǔn)品濃度升高（即 0, 0.1,0.2, 0.4, 0.6, 0.8,1ng）建議，鼠李糖乳桿菌生長(zhǎng)逐漸遞增品率，伴隨著620nm處吸光度的增加。
參考文獻(xiàn)
1. Flynn,Williams, ODell and Hogan, 1951, Anal. Chem., 23, 180.
2. Baker, Herbert,Frank, Pasher, Hunter, Wasserman and Sobotka, 1959,Clin. Chem., 5, 275.
3. Waters and Mollin,1961, J. Clin. Path., 14, 335.
產(chǎn)品引用文獻(xiàn)
