單增李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基
（L. mono Differential HiVegTM Agar Base）
貨號(hào) | 產(chǎn)品 | 原裝品名 | 規(guī)格 | 貨期 | 儲(chǔ)存 | 效期 |
MV1540 | 單增李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基（ALOA法） | L. mono Differential HiVegTM Agar Base | 100g(1.3L) 500g（6.9L） | 4-6周 | 2-8°C | 詳見產(chǎn)品包裝 |
FD214-5VL | 添加劑1 | L. mono Enrichment Supplement I | 5管(2.5L) | 4-6周 | -20°C | 詳見產(chǎn)品包裝 |
FD212-5VL | 添加劑2 | L. mono Selective Supplement I | 5管(2.5L) | 4-6周 | 2-8°C | 詳見產(chǎn)品包裝 |
FD213-5VL | 添加劑3 | L. mono Selective Supplement II | 5管(2.5L) | 4-6周 | 2-8°C | 詳見產(chǎn)品包裝 |
應(yīng)用
用于選擇性分離鑒別單核細(xì)胞增生李斯特氏菌信息化。
背景
單核細(xì)胞增生李斯特氏菌是一種革蘭氏陽性食源性人類病原體形勢，使孕婦嚴(yán)重感染并終可能導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎取得明顯成效、新生兒李斯特氏菌病和腦膜炎或成人和青少年原發(fā)性菌血癥約定管轄。伊氏李斯特氏菌對人類的致病性不確定(1)數據。由于單核細(xì)胞增生李斯特氏菌和英諾克李斯特氏菌具有相似的生化特性，傳統(tǒng)培養(yǎng)基（PALCAM培養(yǎng)基）不能區(qū)分業務指導。
原理
Ottoviani 和 Agosti (1,2)開發(fā)了單核細(xì)胞增生李斯特氏菌鑒別基礎(chǔ)培養(yǎng)基改進措施，用于從食物和動(dòng)物飼料中選擇性分離鑒別單核細(xì)胞增生李斯特氏菌就此掀開。這款李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基在該培養(yǎng)基配方上略作改良長足發展。它在制備時(shí)用無瘋牛病風(fēng)險(xiǎn)的植物蛋白胨取代了動(dòng)物蛋白胨。
該培養(yǎng)基中的HiVeg蛋白胨1號(hào)不斷豐富、（HiVeg）水解物實施體系、酵母粉和丙酮酸鈉提供了細(xì)菌生長所必需的營養(yǎng)和氮源物質(zhì)。葡萄糖是可發(fā)酵的碳水化合物各有優勢。氯化鈉維持滲透壓平衡效果較好。磷酸鹽是緩沖液成分。氯化鋰和選擇性添加劑（FD212和FD213）抑制伴隨的菌群生長持續，而允許李斯特氏菌生長等多個領域。李斯特氏菌水解顯色底物，產(chǎn)生綠色菌落產品和服務。從其它李斯特氏菌中鑒別出單核細(xì)胞增生李斯特氏菌應用擴展，是依據(jù)其*的磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C （PIPLC）活性。磷脂酶C水解培養(yǎng)基中的底物添加劑（貨號(hào)FD214）導(dǎo)致單核細(xì)胞增生李斯特氏菌菌落周圍產(chǎn)生不透明的暈環(huán)增多。
培養(yǎng)基組分
成份 | 克/升 |
HiVeg蛋白胨1號(hào) | 18.000 |
（HiVeg）水解物 | 6.000 |
酵母粉 | 10,000 |
丙酮酸鈉 | 2.000 |
葡萄糖 | 2.000 |
甘油磷酸鎂 | 1.000 |
* | 0.500 |
氯化鈉 | 5.000 |
氯化鋰 | 10.000 |
無水* | 2.500 |
顯色底物 | 0.050 |
瓊脂 | 15.000 |
終pH（25℃）7.2±0.2
配置
36.02g干粉溶于 460ml蒸餾水活動上。加熱沸騰使干粉*溶解。15磅（121℃）滅菌15分鐘進一步推進。取李斯特氏菌增菌添加劑（貨號(hào)FD214）1管放置室溫融化導向作用。取李斯特氏菌選擇性添加劑I（貨號(hào)FD212）1管,添加10ml無菌蒸餾水復(fù)溶。取李斯特氏菌選擇性添加劑II（貨號(hào)FD213）1管應用的選擇，添加2ml 0.2N氫氧化鈉十大行動，再加3ml無菌蒸餾水復(fù)溶。待460ml培養(yǎng)基冷卻至45-50°C背景下，無菌加入以上復(fù)溶的3種添加劑綜合措施。混勻并傾注于無菌平皿中等特點。
警告：氯化鋰是有害的建言直達。避免身體接觸和吸入蒸氣。一旦與皮膚接觸將進一步，應(yīng)用大量水沖洗充分發揮。
質(zhì)量控制
外觀：奶油色至黃色均一自由流動(dòng)粉末。
成膠性：牢固成就，與1.5％瓊脂凝膠相當(dāng)重要方式。
成品顏色和透明度：淡琥珀色開展面對面，不透明凝膠。
配比反應(yīng)：25℃時(shí)7.2%（7.2g/100ml蒸餾水）水溶液非常重要，pH: 7.2±0.2
pH值：7.00-7.40
培養(yǎng)反應(yīng)
培養(yǎng)基無菌加入3種添加劑（FD212,FD213,FD214）制備好后進一步提升，接種下列菌種，35-37℃孵育24-48小時(shí)后觀察培養(yǎng)反應(yīng)認為。
有機(jī)體 | 接種（CFU） | 生長 | 回收率 | 菌落顏色 | PIPLC活性 |
白色念珠菌（ATCC 10231） | ≥103 | 抑制 | 0% | | |
糞腸球菌（ATCC 29212） | ≥103 | 抑制 | 0% | | |
大腸埃希氏菌（ATCC 25922） | ≥103 | 抑制 | 0% | | |
英諾克李斯特氏菌（ATCC 33090） | ≥103 | 旺盛 | ≥50% | 藍(lán)綠色 | （-） |
格雷氏李斯特氏菌（ATCC 19120） | 50-100 | 旺盛 | ≥50% | 藍(lán)綠色 | （-） |
伊氏李斯特菌（ATCC 19119） | 50-100 | 旺盛 | ≥50% | 藍(lán)綠色 | （+）菌落周圍有不透明暈環(huán) |
單核細(xì)胞增生李斯特氏菌（ATCC 19112） | 50-100 | 旺盛 | ≥50% | 藍(lán)綠色 | （+）菌落周圍有不透明暈環(huán) |
斯氏李斯特氏菌（ATCC 35967） | 50-100 | 旺盛 | ≥50% | 藍(lán)綠色 | （-） |
威爾斯李斯特氏菌（ATCC 43549） | 50-100 | 旺盛 | ≥50% | 藍(lán)綠色 | （-） |
銅綠假單胞菌（ATCC 27853） | ≥103 | 抑制 | 0% | | |
參考文獻(xiàn)
1.Ottaviani F., Ottaviani M., and Agosti M. (1997 a), Industrie Alimentari 36, 1-3.
2.Ottaviani F., Ottaviani M., and Agosti M. (1997 b), Quimper Froid Symposium Proceedings p. 6, A.D.R.I.A. Quimper,France, 16-18 June 1997.
產(chǎn)品引用文獻(xiàn)
1. H Momtaz系統，S Yadollahi. Molecular characterization of Listeria monocytogenes isolated from fresh seafood samples in Iran.Diagnostic Pathology, 2013,8(1):1-6
2. MM Yadav，A Roy重要意義，B Bhanderi交流等，C Joshi.Pheno-genotypic characterization of Listeria monocytogenes from bovine clinical mastitis.Buffalo Bulletin,2010 , 29(1):29-38
3. Nitin Chandhrakant Dudhe,et al. InVitro Characterization of Listeria monocytogenes Isolates by Haemolysis, Camp, Piplc Assay with Protein Profiling and Antibiotic Resistance Recovered from Nagpur Region.Advances in Animal and Veterinary Sciences.2014,2(6): 321–328
4. Shole Yadollahi, Hassan Momtaz,Monir Doudi,Elahe Taj bakhsh. The objective of this study was to isolation and characterization of Listeria species and determines Listeria monocytogenes serotypes in fresh fish,shrimp, crab and lobster in Isfahan and Shahrekord, Iran.International journal of Advanced Biological and Biomedical Research.2013,1(5):493-504
5. Sanjita Sharma, Vishnu Sharma, Dinesh Kumar Dahiya, Aarif Khan, Manisha Mathur, Amit Sharma.Prevalence, Virulence Potential, and Antibiotic Susceptibility Profile of Listeria monocytogenes Isolated From Bovine Raw Milk Samples Obtained From Rajasthan, India.Foodborne Pathogens & Disease, 2017,14(3):132
